Charakterisierung der T-Helferzell-Dynamik in einem murinen Modell zur chronisch-allergischen Atemwegsentzündung:
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2014
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Beschreibung: | VII, 112 S. Ill., graph. Darst. 21 cm |
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adam_text | AUS DEM INSTITUT FUER LABORATORIUMSMEDIZIN
UND PATHOBIOCHEMIE,
MOLEKULARE DIAGNOSTIK
GESCHAEFTSFUEHRENDER DIREKTOR: UNIV.-PROF. DR. MED. H. RENZ
DES FACHBEREICHS MEDIZIN DER PHILIPPS-UNIVERSITAET MARBURG
CHARAKTERISIERUNG DERT-HEIFERZEIL-DYNAMIK IN EINEM MURINEN
MODELL ZUR
CHRONISCH-ALLERGISCHEN ATEMWEGSENTZUENDUNG
INAUGURAL-DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES
DOKTORGRADES DER GESAMTEN HUMANMEDIZIN
DEM FACHBEREICH MEDIZIN DER PHILIPPS-UNIVERSITAET MARBURG
VORGELEGT VON
BJOERN WEIB
AUS BOCHUM
MARBURG, 2014
HTTP://D-NB.INFO/1064029930
I
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS I
ABBILDUNGSVERZEICHNIS IV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS VI
1. EINLEITUNG 1
1.1 ASTHMA BRONCHIALE ALS FORM DER BRONCHO-PULMONALEN ALLERGIE 1
1.1.1 EPIDEMIOLOGIE UND SOZIOLOGIE 2
1.1.2 KLINISCHE ASPEKTE 3
1.2 AETIOLOGIE DER ALLERGIE 5
1.2.1 GENETISCHE FAKTOREN 6
1.2.2 UMWELTFAKTOREN 7
1.3 IMMUNPATHOGENESE DES ASTHMA BRONCHIALE 8
1.3.1 SENSIBILISIERUNG GEGEN EIN
ALLERGEN 9
1.3.2 FRUEHPHASE DER ALLERGISCHEN ENTZUENDUNGSREAKTION 11
1.3.3 SPAETPHASE DER ALLERGISCHEN ENTZUENDUNGSREAKTION 12
1.3.4 CHRONISCHES ASTHMA UND REMODELLING
DER ATEMWEGE 13
1.4 CHARAKTERISTIKA VON TH17-ZELLEN 14
1.5 TIERMODELLE DES AKUTEN UND CHRONISCHEN ASTHMA BRONCHIALE 17
1.6 ZIELE DER ARBEIT 20
2. MATERIALIEN UND METHODEN 21
2.1 VORBEMERKUNG 21
2.2 VERSUCHSTIERE, TIERHALTUNG 21
2.3 INDUKTION EINER ALLERGISCHEN ENTZUENDUNG DER ATEMWEGE 21
2.3.1 SENSIBILISIERUNG GEGEN EIN FREMDANTIGEN UND IMMUNMODULATION....21
2.3.2 INDUKTION EINER SEKUNDAEREN IMMUNANTWORT 22
2.3.3 ETABLIERUNG EINER AKUTEN ATEMWEGSENTZUENDUNG 22
2.3.4 ETABLIERUNG EINER CHRONISCHEN ATEMWEGSENTZUENDUNG 23
II
2.4 GEWINNUNG VON PROBENMATERIAL 25
2.4.1 PRAEPARATION DER TIERE 25
2.4.2 BRONCHO-ALVEOLAERE-LAVAGE 26
2.4.3 PERFUSION DER LUNGEN UND HERSTELLUNG EINER EINZELZELLSUSPENSION..
27
2.4.4 HERSTELLUNG EINER MILZZELLSUSPENSION 29
2.4.5 HERSTEILUNG EINER LYMPHKNOTENZELLSUSPENSION 29
2.5 DICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION ZUR GEWINNUNG VON MNCS 30
2.6 KURZZEITSTIMULATION UND INTRAZELLULAERE ANREICHERUNG VON ZYTOKINEN 31
2.7 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN DER STIMULIERTEN ZELLEN 32
2.7.1 MARKIERUNG VON SPEZIFISCHEN, ZELLULAEREN OBERFLAECHENBESTANDTEILEN.
32
2.7.2 INTRAZELLULAERER MARKIERUNG VON SPEZIFISCHEN SEKRETIONSPRODUKTEN
UND
NUKLEAEREN FAKTOREN 33
2.7.3 GERAETEEINSTELLUNGEN ZUR DURCHFLUSSZYTOMETRIE 34
2.8 UNTERSUCHUNGEN
AUF RNA-EBENE 36
2.8.1 CD4-ZELLISOLATION MITTELS
*MAGNETIC BEAD SEPARATION 36
2.8.2 RNA-AUFREINIGUNG, DNA-VERDAU, RNA-QUANTIFIZIERUNG 37
2.8.3 REVERSE TRANSKRIPTION 38
2.9 PCR MIT QUALITATIVER AUSWERTUNG 38
2.10 LEUKOZYTENANALYSE UND
-DIFFERENZIERUNG IN DER
BAL 40
2.11 ELISA ZUR MESSUNG DER ZYTOKINKONZENTRATION IN DER
BALF 41
2.12 CBA ZUR MESSUNG DER ZYTOKINKONZENTRATION IN DER
BALF 44
2.13 IMMUNHISTOCHEMISCHE DARSTELLUNG IN KRYOKONSERVIERTEN ORGANEN 45
2.14 STATISTISCHE AUSWERTUNGEN UND
GRAPHISCHE DARSTELLUNGEN 47
3. ERGEBNISSE 48
3.1 FREQUENZ PULMONALER CD4-ZELL-SUBPOPULATIONEN 48
3.1.1 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH1
-ZELLEN IM LUNGENGEWEBE 49
3.1.2 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH2-ZELLEN IM LUNGENGEWEBE 50
3.1.3 QUANTITATIVE ANALYSE
DER TREG-ZELLEN IM LUNGENGEWEBE 51
III
3.1.4 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH17-ZELLEN IM LUNGENGEWEBE 52
3.2 FREQUENZ SYSTEMISCHER CD4-ZELL-SUBPOPULATIONEN 54
3.2.1 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH1-ZELLEN IM MILZGEWEBE 54
3.2.2 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH2-ZELLEN IM MILZGEWEBE 55
3.2.3 QUANTITATIVE ANALYSE DERTREG-ZELLEN IM MILZGEWEBE 56
3.2.4 QUANTITATIVE ANALYSE DERTH17-ZELLEN IM MILZGEWEBE 57
3.3 FREQUENZ VON CD4-ZELL-SUBPOPULATIONEN IM LLG 58
3.3.1 QUANTITATIVE ANALYSE DERTHL- UND TH2-ZELLFREQUENZEN IM LLG 60
3.3.2 QUANTITATIVE ANALYSE DER TH17-ZELLFREQUENZEN IM LLG 61
3.4 SYSTEMISCHER UND LOKALER CD4
T-ZELL-VERGLEICH 61
3.4.1 VERGLEICHENDE DARSTELLUNG DERTHL- UND TH2-ZELLEN IN LUNGE UND MILZ
UND BILDUNG EINER TH1/TH2-RATIO 62
3.4.2 VERGLEICHENDE DARSTELLUNG DER TH17- UND TREG-ZELLEN
IN LUNGE
UND
MILZ UND BILDUNG
EINER TH17/TREG-RATIO 64
3.5 ANALYSEN DER BAL: INTRALUMINALES
INFILTRAT UND ZYTOKINANALYSEN 65
3.5.1 ABSOLUTE ZELLZAHLEN DES INTRALUMINALEN INFILTRATS 66
3.5.2 RELATIVE LEUKOZYTENVERTEILUNG
DES INTRALUMINALEN INFILTRATS 69
3.5.3 ZYTOKINANALYSEN IN DER BALF 70
3.6 IMMUNHISTOCHEMISCHE DARSTELLUNG VON CD4-ZELLEN IN PROXIMALEN UND
DISTALEN ATEMWEGEN 74
4. DISKUSSION 78
5. ZUSAMMENFASSUNG - DEUTSCH 91
6. ZUSAMMENFASSUNG - ENGLISCH 93
7. LITERATURVERZEICHNIS 95
8. ANHANG 95
8.1 LEBENSLAUF (AUS GEDRUCKTER VERSION ENTFERNT)
8.2 VERZEICHNIS DER AKADEMISCHEN LEHRER 111
8.3 DANKSAGUNG 112
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