Differenzierung von Monozyten nach In-vitro-Partikelexposition:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2014
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 97 S. graph. Darst. 30 cm |
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|---|---|
| adam_text | 1 INHALT
1 INHALT 8
2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 12
3 TABELLENVERZEICHNIS 13
4 EINLEITUNG: GEGENSTAND UND ANLAGE DER UNTERSUCHUNG 14
4.1 PHYSIKALISCHE, CHEMISCHE UND BIOLOGISCHE GRUNDLAGEN DER
UNTERSUCHUNG. 15
4.1.1 PHAGOZYTEN 15
4.1.2 MONOZYTEN UND MAKROPHAGEN 15
4.1.3 DAS MODELL DES M2- MAKROPHAGEN 16
4.2 PARTIKEL 18
4.2.1 EINTEILUNG UND CHARAKTERISIERUNG ANORGANISCHER PARTIKEL 18
4.2.2 INZIDENTELLE NANOPARTIKEL - VORKOMMEN UND TOXIZITAET 18
4.2.3 PARTIKEL ALS URSACHE VON MALIGNER ENTARTUNG, ENTZUENDUNG UND
FIBROSE 19
4.2.4 LUFTVERSCHMUTZUNG - EIN HETEROGENES PARTIKELGEMISCH 20
4.3 ZELLULAERE AUFNAHME UND INTERAKTION MIT MIKRO- UND - NANOPARTIKELN 21
4.3.1 BIOLOGISCHE WECHSELWIRKUNG VON PARTIKELN 22
4.4 KO-KULTUREN - IN-VITRO-MODELL FUER ZELL-ZELL-INTERAKTION: 24
4.5 EIGENSCHAFTEN VERWENDETER PARTIKEL: MINU-SIL 5, MAGNETIT UND PM
2
,5
25
4.5.1 SILIZIUMDIOXID: MIN-U-SIL 5 25
4.5.2 MAGNETIT 25
4.5.3 PARTICULATE MATTER UND PM
2L
5
26
4.6 BIOLOGISCHE PARTIKELEFFEKTE 27
4.7 ZYTOKINE 28
4.7.1 PRO-INFLAMMATORISCHE MI-ZYTOKINE 28
4.7.2 ZYTOKINE ALTERNATIV AKTIVIERTER M2- MAKROPHAGEN 31
5 FRAGESTELLUNG UND EXPERIMENTELLER ANSATZ 33
6 MATERIAL 34
6.1 GERAETE 34
6.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN 36
6.3 BASISCHEMIKALIEN 37
6.4 BIOCHEMISCHE BASISKOMPONENTEN 37
8
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6.5 LOESUNGEN - HERSTELLUNGSPROTOKOLLE 38
6.5.1 ELISA WASCHPUFFER 38
6.5.2 ELISA BICARBONATCOATINGPUFFER 38
6.5.3 TMB-LOESUNG 38
6.5.4 2 M H
2
S0
4
-ELISA-STOPPLOESUNG 39
6.5.5 MACS-MONOZYTENINKUBATIONSPUFFER 39
6.5.6 ELISA BSA-BOCKINGPUFFER 39
6.5.8 0,5 % TRYPSINMOBILISATIONSLOESUNG 40
6.5.9 DMEM-ZELLKULTURMEDIUM 40
6.5.10 RPMI-ZELLKULTURMEDIUM 40
6.6 PARTIKEL 41
6.7 MONOZYTENISOLATION 42
6.8 ELISA-KITS 42
6.9 PROBANDEN 42
7 METHODEN 43
7.1 HERSTELLUNG DER PARTIKEL-STIMULATIONSLOESUNGEN 43
7.1.1 PARTIKEL-STAMMLOESUNG (SUSPENSION) 43
7.1.2 PARTIKEL-GEBRAUCHSLOESUNGEN 44
7.2 A549-ZELLKULTUR 45
7.3 MPNOZYTEN-/-A549-CO-KULTUR 45
7.4 KONDITIONIERTES MEDIUM (=CM) 46
7.5 ISOLATION DER MONOZYTEN 46
7.6 VERSUCHSPROTOKOLLE 48
7.6.1 PROTOKOLL I: 48
7.6.2 PROTOKOLL II: 49
7.6.3 PROTOKOLL III: 49
7.7 PARTIKELEXPOSITION 50
7.8 BEENDIGUNG DER VERSUCHE 50
7.9 AUSWERTUNG DER VERSUCHE : ELISA-MESSUNG 51
7.9.1 ELISA-MESSUNG - DIE STANDARDKALIBRATIONSKURVE 51
7.9.2 ELISA - DURCHFUEHRUNG 51
7.10 STATISTISCHE AUSWERTUNG: 53
8 ERGEBNISSE 54
8.1 CCL18-FREISETZUNG NACH PARTIKELEXPOSITION 54
9
8.1.1 CCL18-FREISETZUNG: PROTOKOLL 1 54
8.1.2 CCL18 FREISETZUNG: PROTOKOLL II 55
8.1.3 CCL18 FREISETZUNG: PROTOKOLL III 56
8.1.4 CCL18: EINFLUSS MONOZYTENREIFUNG 57
8.1.5 CCL18: MONOZYTENREIFUNG UND KO-KULTUR 58
8.1.6 CCL18: EINFLUSS DES CM 59
8.2 IL1RA FREISETZUNG NACH PARTIKELEXPOSITION 60
8.2.1 IL1RA FREISETZUNG: PROTOKOLL 1 60
8.2.2 IL-1RA FREISETZUNG: PROTOKOLL II 61
8.2.3 IL-1RA FREISETZUNG: PROTOKOLL III 62
8.2.4 IL-1RA: EINFLUSS DER MONOZYTENREIFUNG IN KO-KULTUREN 63
8.3 TNF FREISETZUNG NACH PARTIKELEXPOSITION 64
8.3.1 TNF FREISETZUNG: PROTOKOLL I 64
8.3.2 TNF FREISETZUNG PROTOKOLL II 65
8.3.3 TNF FREISETZUNG: PROTOKOLL III 65
8.4 IL-1
SS FREISETZUNG NACH PARTIKELEXPOSITION 66
8.4.1 IL-1
SS FREISETZUNG: PROTOKOLL 1 66
8.4.2 IL-1
SS FREISETZUNG: PROTOKOLL II 66
8.4.3 IL-1
SS FREISETZUNG: PROTOKOLL III 67
8.5 IL-6 FREISETZUNG NACH PARTIKELEXPOSITION 68
. 8.5.1 IL-6 FREISETZUNG: PROTOKOLL I 68
8.5.2 IL-6 FREISETZUNG PROTOKOLL II 68
8.5.3 IL-6 FREISETZUNG: PROTOKOLL III 69
8.6 ZYTOKINFREISETZUNG DER A549 MONOKULTUREN 70
9 DISKUSSION 71
9.1 PARTIKELEFFEKTE 72
9.1.1 NANOMAGNETIT 72
9.1.2 MIN-U-SIL 5 73
9.1.3 PM
2I5
74
9.2 EFFEKT DER PARTIKELKONZENTRATION 75
9.3 EINFLUSS DER MONOZYTENREIFUNG AUF DIE FREISETZUNG PRO- UND
ANTIINFLAMMATORISCHER ZYTOKINE 76
9.4 EINFLUSS DER KO-KULTUR MIT A549 ZELLEN UND DES CM AUF DIE
FREISETZUNG PRO-
UND ANTIINFLAMMATORISCHER ZYTOKINE 77
10
9.5 ALLGEMEINE METHODISCHE UND THEORETISCHE ZUSAMMENHAENGE 78
9.5.1 PARTIKELKONZENTRATIONEN IN VITRO 78
9.5.2 PARTIKELVERMITTELTE ZELLSCHAEDEN MOEGLICHE AUSLOESER EINER
PROINFLAMMATORISCHEN REAKTION 79
9.6 PARTIKELVERMITTELTE M2-EFFEKTE 80
9.7 PARTIKELINDUZIERTE EFFEKTE - GRENZEN UND ERWEITERUNGEN EINES IN
VITRO
MODELLS 81
9.8 SCHLUSSFOLGERUNG UND AUSBLICK 83
10 ZUSAMMENFASSUNG/ABSTRACT 85
11 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 87
12 LEBENSLAUF 88
13 DANKSAGUNG 90
14 LITERATUR 91
11
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