Bedeutung von Seneszenzmechanismen für das chronische Transplantatversagen am Beispiel einer temporär ischämischen Niere der p16INK4a transgenen Maus:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2014
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Edition Scientifique
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Schlagworte: | |
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Beschreibung: | 93 S. Ill., graph. Darst. |
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1.EINLEITUNG 7
1.1 BEDEUTUNG DER NIERENALTERUNG UND IHR EINFLUSS AUF DIE NIERENFUNKTION
7
1.2 NIERENTRANSPLANTATION 10
1.3SENESZENZ 12
1.4 DER ZELLZYKLUSREGULATOR P16
/NK4A
14
1.5 DER
PROLLFERATIONSMARKER KI-67 19
1.6 DIE P38-MITOGENAKTIVIERTE PROTEINKINASE 19
1.7 FRAGESTELLUNG 20
2. MATERIAL
UND METHODEN 22
2.1 MATERIALIEN 22
2.1.1 GERAETE 22
2.1.2 CHEMIKALIEN UND ENZYME 25
2.1.3 PUFFERLOESUNGEN UND REAGENZIEN AUS EIGENER HERSTELLUNG 28
2.1.4 OLIGONUKLEOTIDE 29
2.2 METHODEN 30
2.2.1 TIERE 30
2.2.2 ISCHAEMIE/REPERFUSIONS-MODELL (I/R-MODELL) 31
2.2.3 ORGANENTNAHME 33
2.2.3.1 VORBEREITUNGEN 33
2.2.3.2 OPERATIVES PROZEDERE BEI DER ORGANENTNAHME 33
2.2.4 ORGANAUFARBEITUNG 34
2.2.4.1 FIXIERUNG 34
2.2.4.2 EINBETTUNG 34
2.2.4.3 SCHNEIDEN DER GEWEBEBLOECKE 35
2.2.5 HISTOLOGISCHE FAERBUNGEN 35
2.2.5.1 HAEMATOXYIIN-EOSIN-FAERBUNG (HE-FAERBUNG) 35
2.2.5.2 PERIODIC-ACID-SCHIFF-FAERBUNG (PAS-FAERBUNG) 36
2.2.6 IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 36
2.2.6.1 KI-67 IMMUNHISTOCHEMIE 37
2.2.6.2 PHOSPHO-P38 IMMUNHISTOCHEMIE 38
2.2.7 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 39
2.2.7.1 RNA-ISOLATION 39
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2.2.7.2 UV-SPEKTROSKOPIE 40
2.2.7.3 AGAROSEGELELEKTROPHORESE 41
2.2.7.4 COMPLEMENTARY DNA (CDNA)- SYNTHESE 43
2.2.7.5 QUANTITATIVE REAL-TIME POLYMERASE KETTENREAKTION (QRT-PCR) 44
2.2.8 STATISTIK 47
3. ERGEBNISSE 48
3.1 GESAMT- UND NIERENGEWICHT DER MAEUSE, NIERENFUNKTIONSDATEN 48
3.2 HISTOLOGIE 53
3.2.1 CHRONISCHER SCHADEN 53
3.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 56
3.3.1 KI-67 IMMUNHISTOCHEMIE 56
3.3.2 PHOSPHO-P38 IMMUNHISTOCHEMIE 60
3.4. QUANTITATIVE
REAL-TIME PCR 65
3.4.1 P16
FT
QUANTITATIVE REAL-TIME
PCR 65
3.4.2 TELOMERASE QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 66
4. DISKUSSION 67
4.1 GEWICHTE DER TIERE 68
4.2 ISCHAEMIE/REPERFUSION 69
4.3 HISTOLOGISCHE ERGEBNISSE
UND FUNKTIONELLE DATEN 70
4.4 QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 74
4.4.1 P16 * QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 74
4.4.2 TELOMERASE QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 75
4.5. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 76
4.5.1 DER PROLIFERATINSMARKER KI-67 76
4.5.2 DIE P38-MITOGENAKTIVIERTE PROTEINKINASE 77
4.6 IST PLOE * GEWEBEPROTEKTIV? 77
5. ZUSAMMENFASSUNG 80
6. SUMMARY 82
7. LITERATURVERZEICHNIS 83
8. DANKSAGUNG 93
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