Zielgerichtete Chemotherapie solider Tumoren durch thermosensitive Liposomen in Kombination mit Doxorubicin, Gemcitabin und Mitomycin C:
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2014
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| adam_text | AUS DEM VETERINAERWISSENSCHAFLICHEN DEPARTMENT DER TIERAERZTLICHEN
FAKULTAET
DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
ARBEIT ANGEFERTIGT UNTER DER LEITUNG VON UNIV.-PROF. DR. ECKHARD WOLF
ANGEFERTIGT IN DER MEDIZINISCHEN KLINIK UND POLIKLINIK III
IM KLINIKUM GROSSHADERN
DER LUDWIGS-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
(PD DR. LARS LINDNER)
ZIELGERICHTETE CHEMOTHERAPIE SOLIDER TUMOREN
DURCH THERMOSENSITIVE LIPOSOMEN IN KOMBINATION MIT
DOXORUBICIN, GEMCITABIN UND MITOMYCIN C
INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DER TIERMEDIZINISCHEN DOKTORWUERDE
DER TIERAERZTLICHEN FAKULTAET
DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
VON SIMONE LIMMER
AUS INNSBRUCK
MUENCHEN 2014
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INHALTSVERZEICHNIS I
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 GRUNDLAGEN 3
2.1 LIPOSOMEN 3
2.1.1 PHASENUMWANDLUNG VON PHOSPHOLIPIDEN 4
2.1.2 LANGZIRKULIERENDE LIPOSOMEN 5
2.1.3 THERMOSENSITIVE LIPOSOMEN 6
2.2 WIRKSTOFFE 9
2.2.1 DOXORUBICIN 9
2.2.2 GEMCITABIN 10
2.2.3 MITOMYCIN C 11
2.3 HYPERTHERMIE 11
2.4 DAS BLASENKARZINOM 14
2.5 ZIELSETZUNG 15
3 MATERIAL 17
3.1 LIPOSOMEN 17
3.1.1 LIPIDE 17
3.1.2 ZYTOSTATIKA 18
3.2 ZELLKULTUR 18
3.2.1 ZELLLINIEN 18
3.3 TIERVERSUCHE 19
3.3.1 VERSUCHSTIERE 19
4 METHODEN 21
4.1 LIPOSOMEN 21
4.1.1 LIPOSOMENHERSTELLUNG 21
4.1.2 WIRKSTOFFEINSCHLUSS 22
4.1.3 LIPOSOMENCHARAKTERISIERUNG 24
4.1.4 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG IN LIPOSOMEN 25
4.1.5 TEMPERATURABHAENGIGE MITOMYCIN C-FREISETZUNG 27
4.2 ZELLKULTUR 28
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.1 ZELLKULTIVIERUNG 28
4.2.2 PASSAGIEREN DER ZELLEN 28
4.2.3 BESTIMMUNG DER ZELLZAHL IN DER NEUBAUER ZAEHLKAMMER 29
4.2.4 AUFTAUEN UND EINFRIEREN VON ZELLEN 30
4.2.5 MYKOPLASMENTEST 30
4.2.6 VITALITAETSBESTIMMUNG 31
4.2.7 ZYTOTOXIZITAETSTEST 31
4.2.8 VORBEREITUNGEN FUER TIERVERSUCHE 34
4.3 TIERVERSUCHE 34
4.3.1 RAHMENBEDINGUNGEN 34
4.3.2 ANAESTHESIE UND ANALGESIE 35
4.3.3 ABBRUCH UND EUTHANASIE 35
4.3.4 PHARMAKOKINETIKSTUDIEN 36
4.3.5 WEICHTEILSARKOM-MODELL 37
4.3.6 BLASENKARZINOM-MODELL 40
4.4 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG IM PROBENMATERIAL 44
4.4.1 DOXORUBICINBESTIMMUNG IN PLASMA- UND GEWEBEPROBEN 44
4.4.2 GEMCITABINBESTIMMUNG IN WAESSRIGEN PROBEN 44
4.4.3 MITOMYCIN C-BESTIMMUNG IN WAESSRIGEN PROBEN 45
5 ERGEBNISSE 46
5.1 LIPOSOMEN 46
5.1.1 CHARAKTERISIERUNG VON MITOMYCIN C-LIPOSOMEN 46
5.1.2 TEMPERATURABHAENGIGE MITOMYCIN C-FREISETZUNG 47
5.2 ZELLKULTUR 47
5.3 TIERVERSUCHE 52
5.3.1 LIPOSOMENSTABILITAET IN VIVO 52
5.3.2 THERAPIESTUDIE GEMCITABIN 56
5.3.3 ETABLIERUNG BLASENKARZINOM-MODELL 57
5.3.4 ANREICHERUNGSSTUDIE UND ORGANVERTEILUNG 62
6 DISKUSSION 71
6.1 ZYTOTOXIZITAETSTEST 71
6.2 LIPOSOMENCHARAKTERISIERUNG TSL(MITO) 75
6.3 LIPOSOMENSTABILITAET 76
INHALTSVERZEICHNIS III
6.3.1 TSL(MITO) 76
6.3.2 TSL(DOX) 78
6.3.3 TSL(GEM) 81
6.4 ANREICHERUNG UND GEWEBEVERTEILUNG VON TSL(DOX) IM NEUARTIGEN
BLASENKARZINOM-MODELL 83
6.4.1 ETABLIERUNG TIERMODELL 83
6.4.2 ANREICHERUNG UND GEWEBEVERTEILUNG VON TSL(DOX) 87
6.5 THERAPIE MIT TSL(GEM) AM S.C. WEICHTEILSARKOM-MODELL 93
7 ZUSAMMENFASSUNG 98
8 SUMMARY 101
9 LITERATURVERZEICHNIS 103
10 ANHANG 114
10.1 MATERIALIEN 114
10.1.1 LIPOSOMEN 114
10.1.2 ZELLKULTUR 118
10.1.3 TIERVERSUCHE 120
10.1.4 HPLC ANALYTIK 122
10.1.5 SOFTWARE 125
10.2 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 126
10.3 TABELLENVERZEICHNIS 128
10.4 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 130
10.5 VEROEFFENTLICHUNGEN 132
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