Untersuchungen zur Toxizität von nanoskaligen Partikeln:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
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Veröffentlicht: |
2014
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Beschreibung: | III, 114, XXIII Bl. Ill., graph. Darst. 30 cm |
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUE
RZUNGSVERZEICHNIS I
ZUSAMMENFASSUNG 1
1 EINLEITUNG 3
1.1 NANOSKALIGE PARTIKEL (NP) 3
1.1.1 ALLGEMEINES 3
1.1.2 SUPERPARAMAGNETISCHE EISENOXIDNANOPARTIKEL (SPIONS) 4
1.1.3 AUFNAHMEMECHANISMEN IN DIE ZELLE 5
1.1.3.1 DER EINFLUSS DER GROESSE 7
1.1.3.2 DER EINFLUSS DER FORM 7
1.1.3.3 DER EINFLUSS DER PROTEINKORONA 8
1.1.3.4 DER EINFLUSS DER LADUNG 9
1.1.4 ABBAU VON EISENOXIDNANOPARTIKELN 9
1.1.5 NATUERLICHE AUFNAHMEMECHANISMEN IN DEN MENSCHLICHEN KOERPER 10
1.1.6 BIOKOMPATIBILITAET VON NANOPARTIKELN 12
1.2 BLUT-HIRN-SCHRANKE (BHS) 15
1.3 MULTIZELLULAERE SPHAEROIDE 18
2 ZIELE DER ARBEIT 21
3 MATERIAL UND METHODEN 22
3.1 ZELLKULTUR 22
3.1.1 ZWEIDIMENSIONALE ZELLKULTUR 22
3.1.1.1 MATERIALIEN 22
3.1.1.2 METHODIK 22
3.1.2 ZELLZAHLBESTIMMUNG 22
3.1.2.1 MATERIALIEN 22
3.1.2.2 METHODIK 23
3.1.3 DREIDIMENSIONALE ZELLKULTUR - SPHAEROIDE 23
3.1.3.1 MATERIALIEN 23
3.1.3.2 METHODIK 23
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INHALTSVERZEICHNIS
3.2 NANOPARTIKEL UND HUELLMATERIALIEN 24
3.2.1 MATERIALIEN 24
3.2.2 METHODIK 26
3.3 VITALITAETS- UND ZYTOTOXIZITAETSASSAYS - ENDPUNKTANALYSEN 27
3.3.1 MATERIALIEN 27
3.3.2 METHODIK 27
3.3.2.1 MTS-TEST 28
3.3.2.2 PRESTOBLUE*-ASSAY 29
3.3.2.3 CELLTITER-GLO-ASSAY 29
3.3.2.4 LAKTATDEHYDROGENASE-ASSAY 30
3.4 DURCHFLUSSZYTOMETRIE ZUM NACHWEIS VON APOPTOSE UND NEKROSE 31
3.4.1 MATERIALIEN 31
3.4.2 METHODIK 31
3.5 LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE 32
3.5.1 MATERIALIEN 32
3.5.2 METHODIK 33
3.5.2.1 PHALLOIDIN-FAERBUNG 33
3.5.2.2 LEBEND/TOT-FAERBUNG VON SPHAEROIDEN 33
3.6 REAL-TIME ZELLANALYSE (RTCA) - DAS XCELLIGENCE SYSTEM 34
3.6.1 MATERIALIEN 34
3.6.2 METHODIK 34
3.7 BERLINER-BLAU-FAERBUNG 3 5
3.7.1 MATERIALIEN 35
3.7.2 METHODIK 36
4 ERGEBNISSE 37
4.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR ZWEIDIMENSIONALEN ZELLKULTUR 37
4.1.1 OPTIMIERUNG UND EVALUIERUNG GEEIGNETER TESTSYSTEME 37
4.1.1.1 MTS-TEST 38
4.1.1.2 PRESTOBLUE*-ASSAY 41
4.1.1.3 CELLTITER-GLO-ASSAY 43
4.1.1.4 LDH-ASSAY 45
4.1.2 ETABLIERUNG VON REFERENZPARTIKELN ZUR BEWERTUNG DER ZYTOTOXIZITAET
46
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.3 ANALYSE DER TOXIZITAET VERSCHIEDENER NANOPARTIKEL SOWIE DEREN
HUELLMATERIALIEN 49
4.1.3.1 KERNMATERIAL 50
4.1.3.2 NEUTRAL GELADENE PARTIKEL SOWIE DEREN HUELLMATERIALIEN 50
4.1.3.3 KATIONISCHE PARTIKEL SOWIE DEREN HUELLMATERIALIEN 51
4.1.3.4 ANIONISCHE PARTIKEL SOWIE DEREN HUELLMATERIALIEN 55
4.1.3.5 MEHRFACH UMHUELLTE PARTIKEL SOWIE DEREN HUELLMATERIALIEN 56
4.1.3.6 FLUORESZENZMARKIERTE PARTIKEL 58
4.1.4 WEITERE KURZZEITANALYSEN ZUR TOXIZITAET VON NANOPARTIKELN 59
4.1.4.1 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 59
4.1.4.2 LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE 62
4.1.5 LANGZEITUNTERSUCHUNGEN ZUR TOXIZITAET VON NANOPARTIKELN 65
4.2 UNTERSUCHUNGEN ZUR DREIDIMENSIONALEN ZELLKULTUR - SPHAEROIDE 75
4.2.1 LICHTMIKROSKOPISCHE ANALYSE UEBER DIE ZEIT 75
4.2.2 ANALYSE DER TOXIZITAET VERSCHIEDENER NANOPARTIKEL 77
4.2.3 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 77
4.2.4 LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE 79
5 DISKUSSION 84
6 SCHLUSSFOLGERUNGEN 114
LITERATUR- UND QUELLENVERZEICHNIS I
ANHANG XIII
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