Reduzierte Expression der miRNA196a2 führt über den Transkriptionsfaktor ERG zu einer Hochregulation der Transkriptionsvariante 1 von DUSP4 im malignen Melanom:
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ZUSAMMENFASSUNG VII
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XI
1 EINLEITUNG 1
1.1 MALIGNES MELANOM 1
1.1.1 EPIDEMIOLOGIE DES MALIGNEN MELANOMS 1
1.1.2 AETIOLOGISCHE FAKTOREN 2
1.1.3 KLASSIFIKATION DES MALIGNEN MELANOMS 3
1.1.4 PROGNOSE 4
1.1.5 PATHOGENESE DES MALIGNEN MELANOMS 5
1.2 ETS TRANSKRIPTIONSFAKTOREN 7
1.2.1 MODULATION DER ETS FUNKTION 8
1.2.2 ETS FAKTOREN UND TUMORERKRANKUNGEN 9
1.3 DUAL-SPECIFICITY PROTEIN PHOSPHATASEN (DUSPS) 11
1.3.1 KLASSIFIZIERUNG DER DUSPS 12
1.3.2 MAP KINASEN SIGNALWEGE UND DIE ROLLE DER DUSPS 14
1.3.3 DUSPS UND TUMORERKRANKUNGEN 15
1.4 MICRORNAS 17
1.4.1 BIOGENESE VON MICRORNAS 17
1.4.2 INTERAKTION ZWISCHEN MICRORNA UND ZIEL-MRNA 19
1.4.3 MICRORNAS IM MALIGNEN MELANOM 20
1.5 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 22
2 MATERIALIEN UND METHODEN 24
2.1 MATERIALIEN 24
2.1.1 ALLGEMEINE MATERIALIEN 24
2.1.2 GERAETE 26
2.1.3 BAKTERIENSTAEMME 27
2.1.4 SAEUGETIERZELLLINIEN 27
2.1.5 VEKTOREN 28
2.1.6 OLIGONUKLEOTIDE 28
2.1.7 MEDIEN, ANTIBIOTIKA, PUFFER UND LOESUNGEN 29
2.2 METHODEN 33
2.2.1 ARBEITEN MIT ESCHERICHIA COLI 33
2.2.2 RNA-TECHNIKEN 35
2.2.3 DNA-TECHNIKEN 37
2.2.4 PROTEINCHEMISCHE METHODEN 40
2.2.5 ZELLKULTURMETHODEN 44
IX
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2.2.6 AUSWERTUNG UND DARSTELLUNG DER ERGEBNISSE 44
3 ERGEBNISSE 46
3.1 EXPRESSION DES TRANSKRIPTIONSFAKTORS ERG IM MALIGNEN MELANOM 46
3.2 EXPRESSION DER DUAL-SPECIFICITY PROTEIN PHOSPHATASE DUSP4 IM
MALIGNEN
MELANOM 49
3.3 EXPRESSION DES TRANSKRIPTIONSFAKTORS ERG IN DER MIT DER MIRNA196A2
STABIL
TRANSFIZIERTEN MELANOMZELLLINIE MEL IM 54
3.4 EXPRESSION DER DUAL-SPECIFICITY PROTEIN PHOSPHATSE DUSP4 IN DER
REDUZIERT ERG
EXPRIMIERENDEN, MIT DER MIRNA196A2 STABIL TRANSFIZIERTEN
MELANOMZELLLINIE MEL IM 58
4 DISKUSSION 62
4.1 ERG EXPRESSION IN MELANOMZELLEN UNTERSCHEIDET SICH VON DER IN
GESUNDEN
MELANOZYTEN 62
4.2 DUSP4 ALS ZIELGEN VON ERG IM MALIGNEN MELANOM 64
4.2.1 DUSP4 WIRD DURCH ETS FAKTOREN REGULIERT 66
4.2.2 EXPRESSION VON DUSP4 IM MALIGNEN MELANOM 67
4.3 EXPRESSIONS- UND PROMOTORANALYSEN GEBEN HINWEIS AUF EINE DIREKTE
REGULATION
DER TRANSKRIPTIONSVARIANTE 1 VON DUSP4 DURCH ERG IM MALIGNEN MELANOM 71
4.4 REDUZIERTE EXPRESSION DER MIRNAI 96A2 IM MALIGNEN MELANOM FUEHRT UEBER
ERG
ZU EINER HOCHREGULATION DER TRANSKRIPTIONSVARIANTE 1 VON DUSP4 72
4.4.1 MIRNAI 96A2 ALS NEGATIVER REGULATOR VON ERG IM MALIGNEN MELANOM 72
4.4.2 MIRNAI 96A2 ALS INDIREKTER REGULATOR DER TRANSKRIPTIONSVARIANTE 1
VON
DUSP4 IM MALIGNEN MELANOM 74
5 LITERATURVERZEICHNIS 76
X
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