Die Bedeutung der Glutaminylzyklase für die hippocampale Funktion des Thyreotropin-releasing Hormons bei der Alzheimerschen Erkrankung:
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| Format: | Abschlussarbeit Elektronisch Software E-Book |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2013
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | VI Bl., Bl. 7 - 105 Ill., graph. Darst. 12 cm |
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 7
1.1 DIE ALZHEIMERSCHE ERKRANKUNG 7
1.2 PHYSIOLOGISCHE UND PATHOLOGISCHE PROZESSIERUNG DES APP 10
1.3 VARIANTEN DES ASS-PEPTIDS 12
1.4 DAS ENZYM GLUTAMINYLZYKLASE 14
1.5 DAS QC-SUBSTRAT THYREOTROPIN-RELEASING HORMON 16
1.6 FRAGESTELLUNG 19
2 MATERIAL & METHODEN 21
2.1 CHEMIKALIEN 21
2.2 PUFFER UND LOESUNGEN 21
2.3 VERWENDETE MAUSSTAEMME 21
2.3.1 DAS TG2576 AD-MODELL 21
2.3.2 GENOTYPISIERUNG DER TG2576-MAEUSE 22
2.3.3 DIE C57BL/6-MAUSLINIE 23
2.4 IMMUNHISTOCHEMISCHE TECHNIKEN 24
2.4.1 PERFUSION VON MAEUSEN UND PRAEPARATION DER GEHIRNE 24
2.4.2 ANFERTIGUNG VON KORONALEN HIRNSCHNITTEN 24
2.4.3 IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS VON PROTEINEN MITTELS DAB 25
2.4.4 IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS VON PROTEINEN MITTELS FLUOROCHROMEN
26
2.4.5 MIKROSKOPISCHE AUSWERTUNG DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN FAERBUNGEN 28
2.5 TECHNIKEN ZUR UNTERSUCHUNG DER MRNA EXPRESSION 29
2.5.1 PRAEPARATION VON NEOKORTEX, HIPPOCAMPUS UND VENTRALEM HIRN 29
2.5.2 PRAEPARATION VON RNA 30
2.5.3 TRANSKRIPTION VON RNA 30
2.5.4 DURCHFUEHRUNG DER QUANTITATIVEN REAL-TIME POLYMERASEKETTENREAKTION
(QRT-PCR) 31
2.5.5 STATISTISCHE ANALYSE DER DATENSAETZE 32
2.6 TECHNIKEN FUER DIE KULTIVIERUNG VON PRIMAEREN ZELLEN 33
IV
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2.6.1 PRAEPARATION UND KULTIVIERUNG VON PRIMAEREN ASTROZYTEN 33
2.6.2 PRAEPARATION UND KULTIVIERUNG VON PRIMAEREN NEURONEN 33
2.6.3 STIMULATION KULTIVIERTER ZELLEN MIT LPS UND IFN-Y 34
2.6.4 ANALYSE DER ZYTOTOXIZITAET MITTELS LDH-ASSAY 34
2.6.5 ANALYSE DER ZELLVITALITAET MITTELS MTT-ASSAY 35
2.6.6 IMMUNCYTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN AN PRIMAEREN ZELLEN 35
2.6.7 UNTERSUCHUNG DER EXPRESSION VON MRNA IN PRIMAEREN ZELLEN 35
3 ERGEBNISSE 36
3.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR HIPPOCAMPALEN EXPRESSION VON QC UND TRH IN WT-
MAEUSEN 36
3.1.1 DIE EXPRESSION DER GLUTAMINYLCYCLASE QC IST IM HIPPOCAMPUS VON
WT-MAEUSEN ALTERSABHAENGIG REGULIERT 36
3.1.2 QC UND TRH SIND IM HIPPOCAMPUS VON ADULTEN WT-MAEUSEN KOLOKALISIERT
38
3.2 UNTERSUCHUNGEN ZUR EXPRESSION VON QC- UND TRH-MRNA IM HIPPOCAMPUS
DER TG2576-MAUSLINIE 40
3.2.1 QC-, TRH- UND TRWRJ-MRNA-EXPRESSION IM ALTERSGANG VON
WT- UND TG2576-MAEUSEN 41
3.2.2 DIE GENEXPRESSIONEN VON QC, TRH UND TRHR1 KORRELIEREN IM
HIPPOCAMPUS VON TG2576 MAEUSEN 44
3.3 UNTERSUCHUNGEN ZUR PROTEINEXPRESSION VON QC, TRH UND TRHR1 IM
HIPPOCAMPUS VON TG2576-MAEUSEN 47
3.3.1 TRH- UND TRHRL-POSITIVE ASTROZYTEN SIND IM HIPPOCAMPUS UND
NEOKORTEX VON TG2576-MAEUSEN MIT ASS-PLAQUES ASSOZIIERT 47
3.3.2 NACHWEIS TRH-IMMUNREAKTIVER AKTIVIERTER ASTROZYTEN IN DER UMGEBUNG
VON ASS-PLAQUES MITTELS DOPPELFLUORESZENZMARKIERUNGEN 51
3.3.3 QC UND TRH SIND IN PLAQUE-ASSOZIIERTEN ASTROZYTEN KOLOKALISIERT 52
3.3.4 KOLOKALISATION VON TRH UND DEM REZEPTOR TRHR1 IN AKTIVIERTEN
ASTROZYTEN? 53
3.3.5 DER REZEPTOR TRHR1 IST NICHT MIT SYNAPTISCHEN VESIKELN UND
NEURONALEN
FILAMENTEN KOLOKALISIERT 55
3.4 UNTERSUCHUNGEN ZUR IMMUNREAKTIVITAET VON QC, TRH UND TRHR1 AN
PRIMAEREN ASTROZYTEN UND NEURONEN 57
V
3.4.1 ERHOEHTE LDH-FREISETZUNG NACH INKUBATION PRIMAERER ASTROZYTEN MIT
LPS
UND IFN-Y 57
3.4.2 UNTERSUCHUNGEN ZUR PROTEINEXPRESSION VON TRH UND TRHR1 IN
LPS/IFN-Y-BEHANDELTEN PRIMAEREN ASTROZYTEN 58
3.4.3 UNTERSUCHUNG DER EXPRESSION VON QC-, TRH- UND TRHR1-MRNA IN
LPS/IFN-Y-STIMULIERTEN PRIMAEREN ASTROZYTEN 62
4 DISKUSSION 65
4.1 NEURONALE EXPRESSION VON QC UND TRH IM HIPPOCAMPUS VON WT-MAEUSEN 65
4.2 EINFLUSS DER HAPP-UEBEREXPRESSION IN TG2576-MAEUSEN MIT ASS-PATHOLOGIE
AUF DIE QC-, TRH- UND TRHR1-MRNA EXPRESSION 68
4.3 QC-, TRH- UND TRHRL-IMMUNREAKTIVITAET IN AKTIVIERTEN ASS-PLAQUE-
ASSOZIIERTEN ASTROZYTEN 72
4.4 QC, TRH UND TRHR1 EXPRESSION IM INFLAMMATIONSMODELL IN PRIMAEREN
ASTROZYTEN 75
4.5 SCHEMA DER PHYSIOLOGISCHEN UND PATHOLOGISCHEN BEDEUTUNG VON QC UND
TRH 77
5 ZUSAMMENFASSUNG 79
6 SUMMARY 85
LITERATURVERZEICHNIS 91
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 99
TABELLENVERZEICHNIS 100
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 101
SELBSTSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 103
WISSENSCHAFTLICHER WERDEGANG 104
PUBLIKATIONSLISTE 105
VI
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