Charakterisierung der Reninzellrekrutierung in der Aldosteronsynthase-Knockout-Maus:
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| adam_text | CHARAKTERISIERUNG DER
RENINZELLREKRUTIERUNG IN DER
ALDOSTERONSYNTHASE-KNOCKOUT-MAUS
DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER
MEDIZIN
DER FAKULTAET FUER BIOLOGIE UND VORKLINISCHE MEDIZIN
DER UNIVERSITAET REGENSBURG
VORGELEGT VON
CATHARINA KESSLER
AUS ERLANGEN
IM JAHR 2014
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INHALTSVERZEICHNIS
1. ZUSAMMENFASSUNG 5
2. EINLEITUNG 8
2.1.
DAS RENIN-ANGIOTENSIN-ALDOSTERON-SYSTEM (RAAS) 9
2.1.1.
RENIN 10
2.1.1.1. RENINSYNTHESE IN DER JUXTAGLOMERULAEREN ZELLE 11
2.1.1.2. DIE REGULATION DES RENINSYSTEMS 12
2.1.2. ALDOSTERON 13
2.1.2.1. ALDOSTERONWIRKUNG 14
2.1.2.2.
MINERALOCORTICOID REZEPTOR (MR) 15
2.1.2.3. ALDOSTERONSYNTHASE 16
2.1.2.4. ALDOSTERONSYNTHASE-KNOCKOUT-MAUS 17
2.2.
GEFAESSSYSTEM DER MAUSNIERE 19
2.3. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 20
3. MATERIAL UND METHODEN 22
3.1.
MATERIAL 23
3.1.1.
GERAETE 23
3.1.2. VERBRAUCHSMATERIAL 24
3.1.3.
CHEMIKALIEN 25
3.1.4. ANTIKOERPER 26
3.1.5.
PUFFER UND LOESUNGEN 27
3.1.5.1.
IMMUNHISTOCHEMIE 27
3.1.5.2.
MOLEKULARBIOLOGIE 28
3.1.6. SOFTWARE UND INTERNETDIENSTE 28
3.2.
METHODEN 29
3.2.1. VERSUCHSTIERE 29
3.2.2.
GENOTYPISIERUNG 29
3.2.3. HISTOLOGISCHE METHODEN 31
3.2.3.1. FIXIERUNG DES NIERENGEWEBES 31
3.2.3.2.
EINBETTUNG IN PARAFFIN 32
3.2.3.3. ANFERTIGEN VON PARAFFINSCHNITTEN UND ENTPARAFFINIERUNG 32
3.2.3.4. IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG 33
3.2.4.
DREIDIMENSIONALE REKONSTRUKTION 34
3.2.4.1.
MIKROSKOPIE UND DIGITALISIERUNG 34
3
3.2.4.2.
DATENAUFBEREITUNG MITTELS IMAGEJ 35
3.2.4.3.
REKONSTRUKTION MITTELS AMIRA 36
3.2.5.
MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 38
3.2.5.1.
ISOLIERUNG VON TOTAL-RNA AUS NIEREN 38
3.2.5.2.
REVERSE TRANSKRIPTION (CDNA-SYNTHESE) 39
3.2.5.3.
QUANTITATIVE POLYMERASEKETTENREAKTION (REAL-TIME-PCR) 40
4. ERGEBNISSE 42
4.1.3D-REKONSTRUKTION UND ZELLULAERE ANALYSE 44
4.1.1.
WILDTYP BEI NORMALSALZDIAET (WT NS) 44
4.1.2.
WILDTYP NACH SALZDEPLETION IN KOMBINATION MIT ENALAPRIL FUER
EINE WOCHE (WT LS/E 1 WO) 47
4.1.3.
WILDTYP NACH SALZDEPLETION IN KOMBINATION MIT ENALAPRIL FUER
DREI WOCHEN (WT LS/E 3 WO) 50
4.1.4. ALDOSTERONSYNTHASE-KNOCKOUT-MAUS BEI NORMALSALZDIAET
(KO NS) 54
4.1.5. ALDOSTERONSYNTHASE-KNOCKOUT-MAUS NACH ZEHN TAGEN
SALZDEPLETION (KO LS 10 D) 59
4.2.
MRNA UND VOLUMINA 64
5. DISKUSSION 68
5.1.
RENINEXPRESSIONSMUSTER IN DER MAUSNIERE NACH SALZDEPLETION UND
VERABREICHUNG EINES ACE-HEMMERS 69
5.2.
RAAS-DEFEKTMUTANTE MIT GENETISCHER DELETION DER
ALDOSTERONSYNTHESE 70
6. LITERATURVERZEICHNIS 75
7. ANHANG 83
7.1.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 84
7.2. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 86
7.3.
DANKSAGUNG 88
7.4.
ERKLAERUNG 89
4
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