Nachweis einer Endothelaktivierung durch Mikropartikel reanimierter Patienten:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2013
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 124 Bl. Ill., graph. Darst. 30 cm |
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| adam_text | AUS DEM UNIVERSITAETS-HERZZENTRUM FREIBURG / BAD KROZINGEN
KLINIK FUER KARDIOLOGIE UND ANGIOLOGIE FREIBURG
DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET FREIBURG IM BREISGAU
NACHWEIS EINER ENDOTHELAKTIVIERUNG DURCH
MIKROPARTIKEL REANIMIERTER PATIENTEN
INAUGURAL-DISSERTATION
ZUR
ERLANGUNG DES MEDIZINISCHEN DOKTORGRADES
DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET
DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET
FREIBURG IM BREISGAU .
VORGELEGT 2013
VON MONICA MOEBES
GEBOREN IN DAYTONA BEACH / USA
HTTP://D-NB.INFO/1051642825
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 1
1 EINLEITUNG 4
1.1 KARDIOPULMONALE
REANIMATION 4
1.1.1 DEFINITION
UND EPIDEMIOLOGIE 4
1.1.2 AETIOLOGIE UND PROGNOSE 6
1.1.3 INTENSIVMEDIZINISCHE THERAPIE 9
1.1.4 POST-REANIMATIONSSYNDROM 10
1.2 ENDOTHELZELLEN UND LEUKOZYTEN 13
1.2.1 ENDOTHELZELLEN 13
1.2.2 LEUKOZYTEN 14
1.2.3 ADHAESIONSMOLEKUELE 15
1.3 ZIRKULIERENDE MIKROPARTIKEL 17
1.3.1 DEFINITION 17
1.3.2 ENTSTEHUNG 19
1.3.3 BIOLOGISCHE FUNKTIONEN 21
1.4 SELEN 23
1.4.1 DEFINITION UND VORKOMMEN 23
1.4.2 BIOLOGISCHE FUNKTIONEN 24
1.4.3 ERKRANKUNGEN UND THERAPIEANSAETZE 25
1.5 HYPOTHESEN UND ZIELSETZUNG 27
2 MATERIAL
UND METHODEN 28
2.1 REAGENZIEN 28
2.2 PUFFERLOESUNGEN, KULTURMEDIEN 30
2.3 BIOLOGISCHE MATERIALIEN 32
2.4 REAGENZ-KITS 32
2.5 OLIGONUKLEOTIDE 32
INHALTSVERZEICHNIS
2.6 ANTIKOERPER 33
2.6.1 PROTEIN-IMMUNOBLOT 33
2.6.2 IMMUNZYTOLOGIE 33
2.7 VERBRAUCHSMATERIALIEN 34
2.8 GERAETE 35
2.9 ELEKTRONISCHE
DATENVERARBEITUNGSSYSTEME 36
2.10 PATIENTEN- UND PROBANDENKOLLEKTIV 37
2.10.1 REANIMIERTE PATIENTEN 37
2.10.2 GESUNDE
PROBANDEN 38
2.10.3 EINVERSTAENDNISERKLAERUNG 38
2.11 BLUTENTNAHME
UND MIKROPARTIKEL 39
2.11.1 BLUTENTNAHME 39
2.11.2 ISOLATION VON
MIKROPARTIKELN 39
2.11.3 PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG ISOLIERTER MIKROPARTIKEL UND
UEBERSTAENDE 39
2.12 HUVEC-ZELLKULTUR 40
2.13 MONOZYTEN-ISOLATION 42
2.14 POLYMERASEKETTENREAKTION 43
2.14.1 THEORIE 43
2.14.2 ZELLSTIMULATION 45
2.14.3 MRNA-PRAEPARATION 46
2.14.4 QUANTITATIVE NUKLEINSAEURE-ANALYSE 46
2.14.5 UMSCHREIBUNG DER MRNA IN CDNA 47
2.14.6 REAL-TIME-PCR 47
2.14.7 GRADIENTEN-PCR 48
2.14.8 AGAROSEGELELEKTROPHORESE 48
2.15 PROTEIN-IMMUNOBLOT 50
2.15.1 THEORIE 50
INHALTSVERZEICHNIS
2.15.2 ZELLSTIMULATION 51
2.15.3 PROTEINEXTRAKTION 51
2.15.4 PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG 51
2.15.5 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE) 52
2.15.6 ELEKTROTRANSFER
(WESTERN-BLOT) 52
2.15.7 IMMUNFAERBUNG GEMOTTETER PROTEINE 53
2.16 IMMUNZYTOLOGIE 54
2.16.1 THEORIE 54
2.16.2 ZELLSTIMULATION 54
2.16.3 FAERBUNG 55
2.16.4 AUSWERTUNG MITTELS
FLUORESZENZ-MIKROSKOPIE 56
2.17 FLUSSKAMMER-MODELL 57
2.17.1 THEORIE 57
2.17.2 ZELLSTIMULATION 59
2.17.3 VERSUCHSABLAUF 60
2.17.4 AUSWERTUNG 61
2.18 STATISTISCHE AUSWERTUNG 62
3 ERGEBNISSE 63
3.1 PATIENTEN- UND PROBANDENCHARAKTERISIERUNG 63
3.1.1 CHARAKTERISTIKA DER KARDIOPULMONALEN REANIMATIONEN 63
3.1.2 CHARAKTERISTIKA KLINISCHER PATIENTENDATEN 63
3.1.3 CHARAKTERISTIKA GESUNDER PROBANDEN 65
3.2 PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG ISOLIERTER MIKROPARTIKEL UND
UEBERSTAENDE.... 66
3.3 REAL-TIME-PCR 67
3.3.1 E-SELEKTIN-EXPRESSION 67
3.3.2 ICAM-1-EXPRESSION 68
3.3.3 VCAM-1-EXPRESSION 69
3.4 PROTEIN-IMMUNOBLOT 71
INHALTSVERZEICHNIS
3.4.1 E-SELEKTIN-EXPRESSION 71
3.4.2 ICAM-1-EXPRESSION 73
3.4.3 VCAM-1
-EXPRESSION 75
3.4.4 EXPRESSION DER ADHAESIONSMOLEKUELE NACH VORINKUBATION MIT SELEN 77
3.5 IMMUNZYTOLOGIE 80
3.5.1 E-SELEKTIN-EXPRESSION 80
3.5.2 ICAM-1-EXPRESSION 81
3.5.3 VCAM-1-EXPRESSION 84
3.5.4 EXPRESSION DER ADHAESIONSMOLEKUELE NACH VORINKUBATION MIT SELEN 85
3.6 FLUSSKAMMER-VERSUCH 88
3.6.1 MONOZYTENADHAESION UNTER DYNAMISCHEN BEDINGUNGEN 88
3.6.2 MONOZYTENADHAESION NACH VORINKUBATION MIT SELEN 90
4 DISKUSSION 92
4.1 PATIENTEN- UND PROBANDENKOLLEKTIV 93
4.1.1 REANIMIERTE PATIENTEN 94
4.1.2 KONTROLLEN 95
4.2 ENDOTHELAKTIVIERUNG UND -SCHAEDIGUNG 96
4.2.1 GESTEIGERTE EXPRESSION ENDOTHELIALER ADHAESIONSMOLEKUELEN DURCH
MIKROPARTIKEL REANIMIERTER PATIENTEN 96
4.2.2 VERMEHRTE ADHAESION VON MONOZYTEN AN ENDOTHELZELLEN UNTER
DYNAMISCHEN BEDINGUNGEN DURCH MIKROPARTIKEL REANIMIERTER PATIENTEN 99
4.3 INHIBITION
DER MIKROPARTIKELEFFEKTE DURCH SELEN 100
4.3.1 REDUKTION DER EXPRESSION ENDOTHELIALER ADHAESIONSMOLEKUELE 101
4.3.2 REDUKTION DER MONOZYTENADHAESION AN ENDOTHELZELLEN 102
4.4 LIMITATIONEN 104
4.5 AUSBLICK 105
5 ZUSAMMENFASSUNG 108
LITERATURVERZEICHNIS 109
INHALTSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 118
TABELLENVERZEICHNIS 121
DANKSAGUNG 122
LEBENSLAUF 123
EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 124
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