Untersuchung der Wirkung des Phosphodiesterase-Inhibitors Sildenafil in Kombination mit Chemotherapie beim Pankreaskarzinom:
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Gießen
VVB Laufersweiler
2013
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I. INHALTSVERZEICHNIS
I. INHALTSVERZEICHNIS V
II. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 8
1. EINLEITUNG 11
1.1. DAS IMMUNSYSTEM 11
1.1.1. ZELLEN DES IMMUNSYSTEMS 11
1.1.1.1. NK- UND NKT-ZELLEN 12
1.1.1.2. LYMPHOZYTEN 12
1.1.1.2.1. T-HELFERZELLEN (CD4
+
) 14
1.1.1.2.2. ZYTOTOXISCHE T-ZELLEN (CD8
+
) 14
1.1.1.3. DENDRITISCHE ZELLEN 15
1.1.1.4. REGULATORISCHE ZELLEN 16
1.1.1.4.1. T
I98
16
1.1.1.4.2. MYELOIDE SUPPRESSORZELLEN 18
1.1.1.4.2.1. WIRKUNG VON SILDENAFIL 20
1.2. DAS PANKREASKARZIOM 21
1.2.1. AETIOLOGIE UND RISIKOFAKTOREN 22
1.2.2. DIAGNOSE 23
1.2.3. STAGING UND PROGNOSE 25
1.3. THERAPIE DES PANKREASKARZINOMS 26
1.3.1. CHIRURGISCHE THERAPIE 26
1.3.2. CHEMOTHERAPIE 27
1.3.3. STRAHLENTHERAPIE 28
1.3.4. IMMUNTHERAPIE 28
1.4. ZIELE DER VORLIEGENDEN ARBEIT 29
V
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INHALTSVERZEICHNIS
2. MATERIAL UND METHODEN 30
2.1. MATERIAL 30
2.1.1. MAEUSE 30
2.1.2. PANKREASKARZINOMZELLEN 30
2.1.3. ANAESTHETIKA 30
2.1.4. NICHTSTEROIDALE ANTIPHLOGISTIKA 30
2.1.5. ANTIKOERPER FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE ( ANTI-MOUSE ) 30
2.1.6. ANTIKOERPER FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE ( ANTI-HUMAN ) 31
2.1.7. STREPTAVIDIN FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE 33
2.1.8. LABORGERAETE 33
2.1.9. VERBRAUCHSMATERIALIEN 34
2.1.10. CHEMIKALIEN 34
2.1.11. LOESUNGEN 35
2.1.11.1. PUFFER FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE 35
2.1.11.2. MEDIEN UND LOESUNGEN FUER DIE ZELLKULTUR 35
2.1.12. SOFTWARE 36
2.2. METHODEN 36
2.2.1. DAS ORTHOTOPE MAUSMODELL 36
2.2.1.1. BEHANDLUNG MIT SILDENAFIL UND GEMCITABIN 37
2.2.2. PRAEPARATION VON TUMORGEWEBE UND LYMPHATISCHER ORGANE 37
2.2.3. HERSTELLUNG VON EINZELZELLSUSPENSIONEN 38
2.2.4. DURCHFLUSSZYTOMETRIE 38
2.2.4.1. EXTRAZELLULAERE FACS-FAERBUNG 39
2.2.4.2. INTRAZELLULAERE FACS-FAERBUNG 39
2.2.5. KULTIVIERUNG VON HUMANEN LEUKOZYTEN AUS DEM PERIPHEREN BLUT
MIT SILDENAFIL EX VIVO 40
VI
INHALTSVERZEICHNIS
3. ERGEBNISSE 42
3.1. EFFEKTE VON SILDENAFIL AUF DAS TUMORWACHSTUM, DIE
METASTASIERUNGSRATE
UND DAS UEBERLEBEN DER MAEUSE MIT PANKREASKARZINOM 42
3.1.1. EFFEKTE AUF DAS UEBERLEBEN 42
3.1.2. EFFEKTE AUF TUMORVOLUMEN UND TUMORGROESSE 44
3.1.3. EFFEKTE AUF DIE METASTASIERUNGSRATE 45
3.2. PHAENOTYPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON LEUKOZYTEN IN TUMOREN NACH DER
BEHANDLUNG MIT SILDENAFIL 45
3.3. PHAENOTYPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON LEUKOZYTEN IN GESUNDEN MAEUSEN
NACH DER BEHANDLUNG MIT SILDENAFIL 60
3.4. ANALYSEN DER EFFEKTE VON SILDENAFIL EX VIVO 70
3.5. EFFEKTE DER KOMBINATION VON SILDENAFIL UND CHEMOTHERAPIE
(GEMCITABIN)
AUF DAS TUMORWACHSTUM, DIE METASTASIERUNGSRATE UND DAS UEBERLEBEN
DER TUMORTRAGENDEN MAEUSE 80
3.5.1. EFFEKTE AUF DAS UEBERLEBEN 80
3.5.2. EFFEKTE AUF TUMORVOLUMEN UND TUMORGROESSE 82
3.5.3. EFFEKTE AUF DIE METASTASIERUNGSRATE 82
3.6. PHAENOTYPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON LEUKOZYTEN IN TUMOREN NACH DER
KOMBINIERTEN BEHANDLUNG 83
4. DISKUSSION 91
5. ZUSAMMENFASSUNG 97
6. SUMMARY 98
III. LITERATURVERZEICHNIS 99
IV. TABELLENVERZEICHNIS 111
V. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 112
VI. DANKSAGUNGEN 116
VII
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