Betamuricholsäure schützt vor Gallensäure-induzierter Apoptose in Hepatozyten von Maus, Ratte und Mensch:
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| adam_text | AUS DER MEDIZINISCHEN
KLINIK UND POLIKLINIK
II - GROSSHADERN
KLINIKUM DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
DIREKTOR: PROF. DR.
MED. B. GOEKE
BETAMURICHOLSAEURE SCHUETZT VOR GALLENSAEURE-INDUZIERTER APOPTOSE
IN HEPATOZYTEN VON MAUS, RATTE UND MENSCH
DISSERTATION
ZUM ERWERB DES
DOKTORGRADES DER MEDIZIN
AN DER
MEDIZINISCHEN FAKULTAET DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET ZU MUENCHEN
VORGELEGT VON
CARL-PHILIPP KLEISS
AUS
MANNHEIM
2014
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1 EINLEITUNG -1 -
1.1 CHOLESTATISCHE LEBERERKRANKUNGEN -1 -
/. 1.1 THERAPIEANSAETZE UND MECHANISMEN -4-
1.1.2 GALLENSAEUREN UND HEPATOBILIAERE TRANSPORTMECHANISMEN - 6 *
1.1.3 FORMEN DER LEBERZELLSCHAEDIGUNG
BEI CHOLESTASE -8-
1.1.4 MECHANISMEN DER GALLENSAEUREN-INDUZIERTEN APOPTOSE IN HEPATOZYTEN
-9 -
1.2 APOPTOTISCHER ZELLTOD -11-
1.2.1 GRUNDLAGEN - II -
1.2.2 BEDEUTUNG
FUER DEN ORGANISMUS -12 -
1.2.3 MOLEKULARE MECHANISMEN
DER APOPTOSE -12 -
1.2.4 APOPTOSE WAEHREND CHOLESTASE. -16 -
1.2.5 MITOCHONDRIALES MEMBRANPOTENTIAL -17-
1.3 FRAGESTELLUNGEN DER ARBEIT -19-
2 MATERIAL - 20 -
2.1 PUFFER UND LOESUNGEN -20-
2.2 KOMPLEXE REAGENZIEN UND REAKTIONS-SETS (*KITS ) -21-
2.3 SONSTIGE M ATERIALEN, CHEMIKALIEN UND GERAETE -21-
2.4 ANTIKOERPER . . -22-
3 METHODEN -23-
3.1 ISOLATION UND GEWINNUNG PRIMAERER
HEPATOZYTEN - 23 -
3.1.1 PRIMAERE RATTENHEPATOZYTEN -23-
3.1.2 PRIMAERE MAUSHEPATOZYTEN -23-
3.1.3 PRIMAERE HAMSTERHEPATOZYTEN -24-
3.2 KULTIVIERUNG PRIMAERER HEPATOZYTEN -25-
3.2.1 PRIMAERE RATTENHEPATOZYTEN -25-
3.2.2 PRIMAERE MAUSHEPATOZYTEN - 25 -
3.2.3 PRIMAERE HAMSTERHEPATOZYTEN -26-
3.3 KULTIVIERUNG VON
HEPG2-NTCP ZELLEN - 26 -
3.4 STABILE TRANSFEKTION DER HEPG2 ZELLEN -27-
3.5 APO-ONE HOMOGENEOUS CASPASE-3/7-AKTIVITAETSASSAY - 27 -
3.6 HOECHST 33342-FAERBUNG -28-
3.7 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD - 29 -
3.8 POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) - 29 -
3.9 WESTERN-BLOT -30-
3.10 MITOCHONDRIALES MEMBRANPOTENTIAL -31 -
3.11
MRTOCHONDRIALE
TRANSLOKATION VON BAX -32-
3.12 STATISTIK -33-
4 ERGEBNISSE -34-
4.1 B-MUR1CH0LSAEURE BESITZT ANTI-APOPTOTISCHE EIGENSCHAFTEN - 34 -
4.1.1 GCDCA-INDUZIERTE APOPLOSE WIRD DURCH TSSMCA VERMINDERT - 34
4.1.2 SS-MWICITOLSAEURE SCHUETZT IN PRIMAEREN HEPATOZYTEN
VON NAGERN
VOR APOPTOSE - 38
4.1.3 TSSMCA STABILISIERT DAS MITOCHONDRIALE MEMBRANPOTENTIAL BEI
GCDCA-INDMIERTER APOPTOSE. - 39
4.1.4 TSSMCA STABILISIERT DAS MITOCHONDRIALE MEMHRANPOTENTIAL AUCH
BEIPALMITAL-INDUZIERLER APOPTOSE ...-42
4.1.5 TSSMCA VERHINDERT DIE TRANSLOKATION DES PROAPOPTOTISCHEN BAX. -43
4.2 REAKTIONEN VERSCHIEDENER SPEZIES
AUF HYDROPHILE UND HYDROPHOBE GALLENSAEUREN - 43
4.2.1 A USMASS DER ZELLSCHAEDEN
IN VERSCHIEDENEN
SPEZIES BEI GALLENSAEUREN-INDIAIERTER APOPTOSE -45
4.2.2 NEKROPTOSE ALS
MOEGLICHER SCHAEDIGUNGSMECHANISMUS - 50
5 DISKUSSION -53
5.1 PROTEKTIVE EIGENSCHAFTEN
DER B-MURICHOLSAEURE
BEI HEPATOZELLULAERER
APOPTOSE -53
5.1.1 TAURO-SS-MURICHOLSAEURE VERHINDERT HEPATOZELHDAERE APOPTOSE DURCH
EINE STABILISIERUNG
DES
MITOCHONDRIALEN MEMBNUIPOTENIALS - 54
5.1.2 TSSMCA VERHINDERT PALMITAT-INDUZIERTE APOPTOSE -56
5.1.3 ZUSAMMENFASSUNG -57
5.2 GALLENSAEUREN-INDUZIERTE APOPTOSE IN VERSCHIEDENEN SPEZIES - 58
5.2.1 UNTERSCHIEDE BEI DER CASPASE-AKTIVITAET * - 59
5.2.2 DIE NEKROPTOSE
IN PRIMAEREN RATTENHEPATOZYTEN - 60
5.2.3 ZUSAMMENFASSUNG -61
6 ZUSAMMENFASSUNG - 63
7 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS - 65
8 LITERATURVERZEICHNIS - 68
9 LEBENSLAUF -78
10 DANKSAGUNG -81
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