Inhibition der Differenzierung von T-Lymphozyten in Effektorzelllinien durch Sinusendothelzellen der Leber:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2013
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 2
1.1 DIE LEBER 2
1.1.1. DIE LEBER - UEBERBLICK 2
1.1.2. DIE LEBER - ALS IMMUNOLOGISCHES ORGAN 2
1.2 DIE ZELLEN DER LEBER UND IHRE FUNKTION IM RAHMEN DES
IMMUNSYSTEMS./. 3
1.2.1. DIE ZELLEN DER.LEBER -UEBERBLICK 3
1.2.2. LEBERSINUSENDOTHELZELLEN 3
1.2.3. DENDRITISCHE ZELLEN 4
1.2.4. INTRAHEPATISCHE T-LYMPHOZYTEN 5
1.3 CD4+ T-LYMPHOZYTEN 6
1.3.1. CD-T-LYMPHOZYTEN - UEBERBLICK 6
1.3.2. TH-L-ZELLEN 6
1.3.3. TH-2-ZELLEN 7
1.3.4. TH-17-ZELLEN 7
1.3.5. TREG-ZELLEN 8
1.3.6. TH-3-ZELLEN UND TR-L-ZELLEN 8
1.4 ZYTOKINE UND INTERLEUKINE 8
1.4.1. IFN-Y 8
1.4.2. IL-4 9
1.4.3. IL-10 9
1.5 TRANSKRIPTIONSFAKTOREN 9
1.5.1. GATA-3 9
1.5.2. T-BET 10
1.5.3. ROR-Y-T 10
1.5.4. FOXP3 10
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INHALTSVERZEICHNIS
1.6 WACHSTUMSFAKTOREN 11
1.6.1. TGF-SS UND SMAD 2,3 11
2 MATERIAL UND METHODEN 12
2.1 MATERIAL 12
2.1.1. GERAETE 12
2.1.2. SOFTWARE 13
2.1.3. CHEMIKALIEN 13
2.1.4. WASSER 14
2.1.5. PUFFER UND LOESUNGEN 14
2.1.6. WEITERE MATERIALIEN ZUR ISOLIERUNG DER LSECS 19
2.1.7. ANTIKOERPER 19
2.1.8. BEADS FUER MACS-ISOLIERUNGEN 20
2.1.9. ZELLKULTURMEDIEN UND ZUSAETZE 21
2.1.10. MATERIAL ZUR RNA, CDNA- SYNTHESE UND PCR 21
2.1.11. OLIGONUKLEOTIDE 21
2.1.12. ELISA-KITS 21
2.1.13. MATERIALIEN FUER WESTERN BLOT 22
2.1.14. SONSTIGE VERBRAUCHSMATERIALIEN 22
2.1.15. VERSUCHSTIERE..... 23
2.2 METHODEN 24
2.2.1. ISOLIERUNG UND KULTUR DER LSECS 24
2.2.2. HERSTELLUNG DER DCS UND T-ZELLEN AUS MURINER MILZ 26
2.2.2.A. HERSTELLUNG DER EINZELZELLSUSPENSION 26
2.2.2.B. DC-LSOLATION 27
2.2.2
.C.
CD4+CD25- -T-ZELLEN 27
2.2.2.D. KONTROLLE DER REINHEIT DER ZELLISOLIERUNGEN 29
INHALTSVERZEICHNIS
2.2.3. KULTUR UND IN-VITRO-STIMULATION DER ISOLIERTEN ZELLEN 29
2.2.4. RESTIMULATION DER CD4+T-ZELLEN 31
2.2.5. RNS-ISOLATION 31
2.2.6. CDNS-HERSTELLUNG 32
2.2.7. ANALYSE DER EXPRESSION VON GATA-3, T-BET UND ROR-Y-T....32
2.2.8. POLYMERASEKETTENREAKTION 33
2.2.9. DNS-GELELEKTROPHORESE... 35
2.2.10. PROTEINLYSE 35
2.2.11. WESTERN-BLOT 35
2.2.12. IFN-Y UND IL-4 ELISA 39
ERGEBNISSE 40
3.1 UNTERSUCHUNG DER CD4-T-ZELLANTWORT NACH STIMULATION DURCH DC
UND LSEC 40
3.1.1. INHIBITION DER TH-L-EFFEKTORFUNKTION VON CD4-T-ZELLEN
NACH STIMULATION DURCH LSEC 40
3.1.2. UNTERSUCHUNG DER EXPRESSION VON TRANSKRIPTIONSFAKTOREN
IN CD4-T-ZELLEN NACH STIMULATION DURCH LSEC 43
3.2 UNTERSUCHUNG DER ROLLE VON IL-10 UND TGF-SS BEI DER
INHIBITION DER CD4-T-ZELL-EFFEKTORFUNKTION DURCH LSEC 46
3.2.1. UNTERSUCHUNG DER CD4-T-STIMULATION DURCH IL-10
DEFIZIENTE LSEC 46
3.2.2. STIMULATION VON CD4-T-ZELLEN MIT GESTOERTER TGF-SS-
SIGNALTRANSDUKTION (DNTGF-SS-R) DURCH LSEC 49
3.2.3. UNTERSUCHUNG DER TGF-SS-ABHAENGIGEN
SIGNALTRANSDUKTION IN LSEC STIMULIERTEN CD4-T-ZELLEN 52
3.3 UNTERSUCHUNG DER FUNKTION AUF LSEC STIMULIERTEN CD4-T-ZELLEN
AUF DIE EFFEKTORFUNKTION ANDERER CD4-T-ZELLEN 56
3.3.1. EINFLUSS VON AUF LSEC STIMULIERTEN CD4-T- ZELLEN AUF
DIE EFFEKTORFUNKTION ANDERER CD4-T-ZELLEN 56
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.2. UNTERSUCHUNG, OB DURCH LSEC STIMULIERTE CD4-T-ZELLEN
IL-10 BENOETIGEN, UM DIE EFFEKTORFUNKTION ANDERER
CD4-T-ZELLEN ZU SUPPRIMIEREN 60
3.3.3. UNTERSUCHUNG, OB DURCH LSEC STIMULIERTE CD4-T-ZELLEN
DIE EFFEKTORFUNKTION ANDERER CD4-T-ZELLEN UEBER DEN
TGF-SS-SIGNALWEG SUPPRIMIEREN 64
4 DISKUSSION 69
4.1 AUSWIRKUNGEN DER AKTIVIERUNG VON CD4-T-ZELLEN DURCH LSECS
UND DEREN MECHANISMEN 69
4.2 WIRKUNG VON AUF LSEC-VORINKUBIERTEN CD4-T-ZELLEN AUF NAIVE
CD4-T-ZELLEN UND DEREN MECHANISMEN 72
4.3 AUSBLICK 73
5 ZUSAMMENFASSUNG 75
6 LITERATURVERZEICHNIS 76
DANKSAGUNG 83
LEBENSLAUF 84
EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG 85
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