Freisetzung von endogenem G-CSF als möglicher Mechanismus der kardioprotektiven Effekte von PTH:
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2014
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| adam_text | AUS DER MEDIZINISCHEN KLINIK UND POLIKLINIK I
UNIVERSITAETSKLINIKUM GROSSHADERN DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
DIREKTOR PROF. DR. MED. STEFFEN MASSBERG
FREISETZUNG VON ENDOGENEM G-CSF ALS MOEGLICHER MECHANISMUS DER
KARDIOPROTEKTIVEN EFFEKTE VON PTH
DISSERTATION ZUM ERWERB DES DOKTORGRADES DER MEDIZIN
AN DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET ZU MUENCHEN
VORGELEGT VON
TOBIAS WEINBERGER
AUS MUENCHEN
2014
1
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1 EINLEITUNG 7
1.1 MYOKARDINFARKT 9
1.1.1 EPIDEMIOLOGIE, AETIOLOGIE UND PATHOGENESE DES MYOKARDINFARKTES 9
1.1.2 PATHOPHYSIOLOGISCHE VERAENDERUNG DES HERZENS NACH MYOKARDINFARKT 10
1.2 STAMMZELLTHERAPIE NACH MYOKARDINFARKT 13
1.2.1 ARTEN VON STAMMZELLEN 13
1.2.1.1 PLURIPOTENTE STAMMZELLEN 14
1.2.1.1.1 EMBRYONALE STAMMZELLEN 14
1.2.1.1.2 INDUZIERTE PLURIPOTENTE STAMMZELLEN (IPS) 15
1.2.1.2 ADULTE STAMMZELLEN 15
1.2.2 MECHANISMEN DER STAMMZELLTHERAPIE NACH MYOKARDINFARKT 17
1.2.3 APPLIKATIONSWEISE DER STAMMZELLEN 19
1.2.3.1 DIREKTE INJEKTION VON STAMMZELLEN 19
1.2.3.2 ENDOGENE STAMMZELLTHERAPIE 20
1.2.3.2.1 MOBILISATION VON STAMMZELLEN 20
1.2.3.2.2 HOMING VON STAMMZELLEN 25
13 PARATHORMON 28
1.3.1 WIRKUNG AUF DAS KARDIOVASKULAERE SYSTEM 28
1.3.2 EINSATZ VON PTH IN DER ENDOGENEN STAMMZELLTHERAPIE 29
1.4 FRAGESTELLUNG 31
2 MATERIAL UND METHODEN 32
2.1 MATERIAL 32
2.1.1 ALLGEMEINE CHEMIKALIEN UND LOESUNGSMITTEL 32
2.1.2 ANTIKOERPER 32
2.1.3 FAERBUNGEN 33
2.1.4 PHARMAKA 33
2.1.5 OPERATIONSZUBEHOER 34
2.1.6 LABOR 35
2.1.7 HAEMODYNAMIK 36
2.1.8 HISTOLOGIE 36
2.1.9 SOFT-UND HARDWARE 36
2.1.10 VERSUCHSTIERE 37
2.2 METHODEN 37
2.2.1 TIERHALTUNG 37
3
2.2.2 HERSTELLUNG G-CSF DEFIZIENTER MAEUSE 38
2.2.3 ZUCHT DER G-CSF DEFIZIENTEN MAEUSE 39
2.2.4 VERSUCHSAUFBAU 41
2.2.5 MAUSMODELL 42
2.2.5.1 INFARKTINDUZIERUNG 42
2.2.5.2 GABE VON PARATHORMON 44
2.2.5.3 HAEMODYNAMIK 45
2.2.5.3.1 FUNKTIONSWEISE DES MILLAR-TIP-KATHETERS 45
2.2.5.3.2 PARALLELE CONDUCTANCE (PARALLELE LEITFAEHIGKEIT) 46
2.2.5.3.3 VERSUCHSABLAUF 47
2.2.5.3.4 AUFZEICHNUNG UND MESSPARAMETER 48
2.2.6 HISTOLOGIE 49
2.2.6.1 FAERBUNGEN 49
2.2.6.1.1 HAEMATOXY LIN-EOSIN-F
AERBUNG 49
2.2.6.1.2 MASSON-GOLDNER-T RICHROMFARBUNG 49
2.2.6.2 MORPHOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 49
2.2.6.2.1 INFARKTGROESSE 50
2.2.6.2.2 WANDDICKE IM INFARKTGEBIET 51
2.2.6.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 51
2.2.6.3.1 NEOVASKULARISATION (PECAM-1/CD31) 51
2.2.6.3.2 APOPTOSE (TUNEL) 51
2.2.7 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 52
2.2.7.1 PRINZIP DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 52
2.2.7.2 AUFBEREITUNG DER PROBEN FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE 53
2.2.8 ENZYME-LINKED-IMMUNOASSAY (ELISA) 55
2.2.9 STATISTISCHE ANALYSE 56
3 ERGEBNISSE 57
3.1 EINFLUSS DER G-CSF DEFIZIENZ AUF DIE MOBILISATION UND DAS HOMING
VERSCHIEDENER
STAMMZELLPOPULATIONEN UNTER PTH-BEHANDLUNG 57
3.1.1 DIE MOBILISIERUNG VON KNOCHENMARKSTAMMZELLEN IN DAS PERIPHERE BLUT
DURCH PTH BEHANDLUNG IST
G-CSF VERMITTELT 58
3.1.2 DIE MIGRATION VON BMCS AUS DEM PERIPHEREN BLUT INS ISCHAEMISCHE
MYOKARD NACH PTH-BEHANDLUNG
BLEIBT BEI DER G-CSF DEFIZIENZ ERHALTEN 60
3.2 PTH BEHANDLUNG ERHOEHT DEN ANTEIL AN HOMINGFAKTOREN IM HERZEN
UNABHAENGIG VOM ENDOGENEN G-
CSF 63
3.3 HISTOLOGIE 65
4
3.3.1 PTH-BEHANDLUNG VERBESSERT DAS REMODELING AUCH IN G-CSF DEFIZIENTEN
TIEREN 65
3.3.1.1 INFARKTGROESSE 65
3.3.1.2 LINKSVENTRIKULAERE WANDDICKE 66
3.3.2 ENDOGENES G-CSF HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE VERMEHRTE
NEOVASKULARISATION NACH PTH-BEHANDLUNG
70
3.3.3 PTH-BEHANDLUNG HAT AUCH IN G-CSF DEFIZIENTEN TIEREN EINEN
POSITIVEN EFFEKT AUF DIE APOPTOSE
NACH MYOKARDINFARKT 72
3.4 HAEMODYNAMIK 74
3.4.1 EJEKTIONSFRAKTION 76
3.4.2 HERZMINUTENVOLUMEN 77
3.4.3 MAXIMALER LINKSVENTRIKULAERER DRUCK 78
3.5 UEBERLEBEN 79
4 DISKUSSION 80
4.1 BEI G-CSF DEFIZIENTEN MAEUSEN FINDET NACH PTH-GABE KEINE MOBILISATION
VON STAMMZEILEN AUS DEM
KNOCHENMARK STATT 81
4.2 DAS VERBESSERTE HOMING VON STAMMZELLEN NACH PTH GABE BLEIBT AUCH BEI
G-CSF DEFIZIENZ ERHALTEN
82
4J DIE POSITIVEN EFFEKTE VON PTH AUF DIE NEOVASKULARISATION UND DAS
REMODELING WERDEN NICHT VON
ENDOGENEM G-CSF BEEINFLUSST 84
4.4 BEI DEN G-CSF DEFIZIENTEN TIEREN ZEIGTE SICH IM VERGLEICH MIT DEN
WILDTYPTIEREN EINE VERMEHRTE
ANZAHL AN APOPTOTISCHEN KARDIOMYOZYTEN 85
4.5 DIE KARDIALE FUNKTION SOWIE DAS UEBERLEBEN IM LANGZEITVERGLEICH NACH
MYOKARDINFARKT WIRD NICHT
DURCH DIE G-CSF DEFIZIENZ BEEINFLUSST 86
4.6 LIMITATIONEN DER ARBEIT 88
4.7 PARATHORMON ALS THERAPIEOPTION NACH MYOKARDINFARKT - EIN AUSBLICK 89
5 ZUSAMMENFASSUNG 91
6 LITERATURVERZEICHNIS 93
7 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 109
5
8 DANKSAGUNGEN 112
9 LEBENSLAUF FEHLER! TEXTMARKE NICHT DEFINIERT.
6
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