Intranasale Applikation von Glioblastomzellen und mesenchymalen Stammzellen in Mäusen und Ratten:
Gespeichert in:
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2014
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INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS 3
2 EINLEITUNG 7
2.1 NEURODEGENERATIVE ERKRANKUNGEN UND ZELLTHERAPIE 7
2.2 BISHERIGER KENNTNISSTAND 9
2.2.1 GLIOBLASTOMZELLEN 9
2.2.2 STAMMZELLEN: MIGRATIONS- UND DIFTERENZIERUNGSVERHALTEN 11
2.2.3 THERAPEUTISCHE BEDEUTUNG VON MESENCHYMALEN STAMMZELLEN 13
2.2.4 ABBILDUNG DES OLFAKTORISCHEN SYSTEMS DER MAUS 16
2.2.5 AUFBAU DER MENSCHLICHEN NASENHOEHLE 18
2.2.6 N.
OLFAKTORIUS
19
2.2.7 NERVUS TRIGEMINUS 21
2.2.8 AUFBAU DES NASALEN EPITHELS 21
2.2.9 LAMINA CRIBROSA 23
2.2.10 BLUT-HIM-SCHRANKE 24
2.2.11 TRANSPORTWEGE IN DAS GEHIRN 26
2.2.12 EINFLUSSFAKTOREN AUF DIE INTRANASALE APPLIKATION 29
2.3 FRAGESTELLUNG 30
3 MATERIAL UND METHODEN.... 32
3.1 MATERIAL 32
3.1.1 CHEMIKALIEN 32
3.1.2 PRIMAERANTIKOERPER 33
3.1.3 SEKUNDAERANTIKOERPER 33
3.1.4 ZUSAETZLICHES MATERIAL 34
3.2 METHODEN 36
3.2.1 HERSTELLUNG DES KULTURMEDIUMS FUER DIE ZELLKULTUR DER
GLIOBLASTOMZELLEN.... 36
3.2.2 KULTIVIERUNG DER RATTEN MSC ZELLEN 36
3.2.3 NEUBAUER-ZAEHLKAMMER 36
3.2.4 PASSAGIEREN VON ZELLEN 37
3.2.5 ZELLERNTE FUER DIE INTRANASALE APPLIKATION 38
3.2.6 ISOLATION UND KULTIVIERUNG DER RATTEN MSC AUS DEM KNOCHENMARK 38
3.2.7 KULTIVIERUNG VON R-MSC ZUR INTRANASALEN GABE 39
3.2.8 MARKIERUNG DER ZELLEN MIT VYBRANT* -CFDA SE
(5,6-CARBOXYFLUORESCEIN
DIACETATE, SUCCHINIMIDYL-ESTER) 39
3.2.9 MARKIERUNG DER ZELLEN MIT HOECHST 33342 (BISBENZIMID H 33342) 40
3.2.10 FLUOREZENZMIKROSKOP UND SOFTWARE 41
3.2.11 HALTUNG DER VERSUCHSTIERE 41
3.2.12 UNILATERALE LAESION: STEREOTAKTISCHE 6-OHDA INJEKTION IM LINKEN
MFBBEI
SD-RATTEN 42
3.2.13 INTRANASALE APPLIKATION DER R-MSC ZELLEN 43
3.2.14 INTRANASALE APPLIKATION DER GLIOBLASTOMZELLEN 44
3.2.15 GEHIRNSCHNITTPRAEPARATION 44
3.2.16 DAPI-ANFAERBUNG 44
3.2.17 DIE WAHL DER SCHNITTE FUER IMMUNHISTOCHEMISCHE ANFAERBUNGEN 45
3.2.18 FIXIERUNG UND PERMEABILISIERUNG DER GEWEBESCHNITTE 45
3.2.19 TYROSINHYDROXYLASEANFAERBUNG 45
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4
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.20 ALPHA-SMOOTH-MUSCLE-ACTIN (SMAA)-ANFARBUNG 46
3.2.21 STATISTISCHE ANALYSEN 46
4 ERGEBNISSE 47
4.1 AUSMESSUNG DER GROESSE VON LAMINA CRIBROSA-POREN UND MIGRATION IN DAS
ZNS
EINGEWANDERTER ZELLEN 48
4.2 INTRANASALE APPLIKATION VON HUMANEN GLIOBLASTOMZELLEN BEI RATTEN 52
4.3 INTRANASALE APPLIKATION VON HD-MARKIERTEN R-MSC BEI ADULTEN MAEUSEN
SS
4.4 INTRANASALE APPLIKATION VON CFDA-MARKIERTEN R-MSC IN EINEM
CHEMISCHEN
ERZEUGTEN PARKINSON-MODELL BEI RATTEN 61
5 DISKUSSION 73
5.1 ZELLMIGRATION IN DAS GEHIRN NACH INTRANASALER APPLIKATION 73
5.2 MIGRATIONSWEGE DER ZELLEN VON DER NASALEN MUKOSA IN DAS GEHIM 75
5.2.1 DIE PERIVASKULAERE ROUTE 76
5.2.2 DIE OLFAKTORISCHE ROUTE 78
5.2.3 DIE TRIGEMINALE ROUTE 81
5.2.4 ZUSAMMENFASSUNG DER MIGRATIONSWEGE 82
5.3 LAESIONGERICHTETE MIGRATION VON R-MSC NACH INTRANASALER GABE 83
5.4 GLIOBLASTOMZELLMIGRATION NACH INTRANASALER APPLIKATION IN NAIVEN
RATTEN 86
5.5 DURCHTRITT DER ZELLEN DURCH DIE LAMINA CRIBROSA 89
5.6 TH EXPERSSION BEI LAESION DES LINKEN STRIATUM 90
5.7 MOEGLICHKEIT DER VERSCHLEPPUNG VON R-MSC 90
6 ZUSAMMENFASSUNG 93
7 LITERATURVERZEICHNIS 95
8 QUELLENNACHWEIS 112
9 DANKSAGUNG 114
10 LEBENSLAUF IIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 5
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