Untersuchungen zum Vorkommen verschiedener Genotypen und Untersuchungen zum Kohlenhydratstoffwechsel von Histomonas meleagridis:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
Mensch-und-Buch-Verl.
2014
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| Online-Zugang: | Volltext Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Nebentitel: Investigations on different genotypes and investigations on the carbohydrate metabolism of Histomonas meleagridis |
| Beschreibung: | XV, 159 S. Ill., graph. Darst. |
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS VII
ABBILDUNGSVERZEICHNIS IX
TABELLEN
VERZEICHNIS
XIII
1 EINLEITUNG UND ZIELE DER ARBEIT 1
2 LITERATURUEBERSICHT 3
2.1 HISTOMONAS MELEAGRIDIS 3
2.1.1 ALLGEMEINES 3
2.1.2 MORPHOLOGIE 3
2.1.3 HYDROGENOSOME 4
2.1.4 STOFFWECHSEL 5
2.1.4.1 KULTURBEDINGUNGEN 5
2.1.4.2 ENERGIESTOFFWECHSEL 7
2.1.5 TAXONOMIE 8
2.1.6 VORKOMMEN 9
2.1.7 UEBERTRAGUNG 11
2.1.7.1 UEBERTRAGUNG ZWISCHEN EINZELNEN BESTAENDEN 11
2.1.7.2 UEBERTRAGUNG INNERHALB EINES BESTANDES 14
2.1.8 IMMUNITAET 15
2.1.9 KLINIK, PATHOLOGIE UND HISTOLOGIE 15
2.1.9.1 KLINISCHE SYMPTOME 15
2.1.9.2 MORBIDITAET UND MORTALITAET 16
2.1.9.3 PATHOLOGISCHE VERAENDERUNGEN 16
2.1.9.4 HISTOPATHOLOGISCHE VERAENDERUNGEN 17
2.1.9.5 ANDERE VON DER HISTOMONOSE BETROFFENE ORGANE 18
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2.1.10 DIAGNOSE 19
2.1.10.1 KLINIK, SEKTION 19
2.1.10.2 MIKROSKOPISCHER NACHWEIS 19
2.1.10.3 HISTOPATHOLOGIE 20
2.1.10.4 ANZUCHT IN VITRO 20
2.1.10.5 POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) 21
2.1.10.6 BLUTWERTE 21
2.1.10.7 ENZYME-LINKED-IMMUNOSORBENT-ASSAY (ELISA) 22
2.1.10.8 IN-SITU HYBRIDISATION 22
2.1.10.9 IMMUNOHISTOCHEMISCHER NACHWEIS 23
2.1.10.10 UNTERSUCHUNGEN ZUR GENOTYPISIERUNG 23
2.1.10.11 DIFFERENTIALDIAGNOSEN 24
2.1.11 PROPHYLAXE UND THERAPIE 25
2.1.11.1 HERDENMANAGEMENT 25
2.1.11.2 THERAPEUTIKA UND PROPHYLAKTISCH EINGESETZTE WIRKSTOFFE 26
2.1.11.2.1 EHEMALS VERWENDETE SUBSTANZEN 26
2.1.11.2.2 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 27
2.1.11.2.3 WEITERE SUBSTANZEN 28
2.2 BLASTOCYSTIS SPP 30
2.3 TETRATRICHOMONAS GALLINARUM 32
3 MATERIAL UND METHODEN 34
3.1 MATERIALIEN 34
3.1.1 VERBRAUCHSMATERIALIEN UND GERAETE 34
3.1.1.1 PRAEPARATION DER DNA UND RNA 34
3.1.1.2 PCRS UND GELELEKTROPHORESE 35
3.1.1.3 KLONIERUNG UND PLASMID-PRAEPARATION 35
3.1.1.4 KULTIVIERUNG DER HISTOMONADEN 36
3.1.3 VERWENDETE PUFFER UND MEDIEN 37
3.1.3.1 PCR UND GELELEKTROPHORESE 37
3.1.3.2 KLONIERUNG UND PLASMIDPRAEPARATION 37
3.1.3.3 KULTIVIERUNG VON HISTOMONADEN 39
3.1.4 VERWENDETE SOFTWARE UND INTERNETPROGRAMME 39
3.1.5 HISTOMONADEN-PROBENMATERIAL 40
3.1.5.1 PROBENMATERIAL ZUR UNTERSUCHUNG VON FELDPROBEN UND ZUR
GENOTYPISIERUNG. 40
3.1.5.2 HISTOMONADENSTAEMME FUER UNTERSUCHUNGEN ZUM
KOHLENHYDRATSTOFFWECHSEL. 40
3.2 ANGEWANDTE METHODEN 40
3.2.1 ANGEWANDTE METHODEN ZU UNTERSUCHUNGEN VON FELDPROBEN UND ZUR
GENOTYPISIERUNG 40
3.2.1.1 EXTRAKTION DERDNA 40
3.2.1.1.1 EXTRAKTION AUS ORGANEN UND INVERTEBRATEN 40
3.2.1.1.2 EXTRAKTION AUS TUPFERN UND KULTURMATERIAL 41
3.2.1.1.3 BESTIMMUNG DES DNA-GEHALTES 41
3.2.1.2 PCRS 42
3.2.1.2.1 ZUR DIAGNOSTIK EINGESETZTE REAL TIME-PCR (QUANTITATIVE PCR,
QPCR) ..42
3.2.1.2.2 PCR FUER DAS C-PROFILING 43
3.2.1.2.3 PCRS ZUR UNTERSUCHUNG AUF BLASTOCYSTIS SPP. UND
TETRATRICHOMONAS
GALLINARUM 44
3.2.1.2.4 GEL-ELEKTROPHORESE 45
3.2.1.3 DIREKTE AUFREINIGUNG VON PCR-PRODUKTEN FUER SEQUENZIERUNGEN 45
3.2.1.4 ERSTELLUNG DER C-PROFILE 45
3.2.1.5 ANLEGEN MONOKLONALER KULTUREN 46
3.2.1.5.1 AUSGANGSMATERIAL 46
3.2.1.5.2 MIKROMANIPULATION 46
3.2.1.6 UNTERSUCHUNG MONOKLONALER KULTUREN 47
3.2.1.6.1 GELREINIGUNG 47
3.2.1.6.2 KLONIERUNG 48
I
3.2.1.6.2.1 LIGATION 48
3.2.1.6.2.2 TRANSFORMATION 48
3.2.1.6.2.3 BEURTEILUNG DES KLONIERUNGERFOLGES UND AUSWAHL DER KOLONIEN
FUER DIE
PLASMID-DNA-PRAEPARATION 49
3.2.1.6.2.4 PRAEPARATION DER PLASMID-DNA (MINI-PRAEPARATION) 49
3.2.1.6.2.5 UEBERPRUEFUNG DES PRAEPARATIONSERFOLGES UND SEQUENZIERUNG 50
3.2.2 ANGEWANDTE METHODEN ZU UNTERSUCHUNGEN ZUM KOHLENHYDRATSTOFFWECHSEL
50
3.2.2.1 KULTIVIERUNG VON H. MELEAGRIDIS 50
3.2.2.1.1 KULTURBEDINGUNGEN 50
3.2.2.1.2 BESTIMMUNG DER HISTOMONADENZAHL 50
3.2.2.2 SEQUENZIERUNG VON TEILEN DES ALPHA-AMYLASE- UND DES
GLYKOGENPHOSPHORYLASE-GENS 51
3.2.2.2.1 EXTRAKTION DER GESAMT-RNA 51
3.2.2.2.2 EXTRAKTION EUKARYOTISCHER MRNA 51
3.2.2.2.3 REVERSE TRANSKRIPTASE-PCR (RT-PCR) 52
3.2.2.2.4 KLONIERUNG UND SEQUENZIERUNG DER PCR-PRODUKTE 53
3.2.2.3 UNTERSUCHUNGEN ZUR GENEXPRESSION 53
3.2.2.3.1 GEWINNUNG DER CDNA 53
3.2.2.3.1.1 EXTRAKTION DER GESAMT-RNA 53
3.2.2.3.1.2 REVERSE TRANSKRIPTION 54
3.2.2.3.2 REAL TIME-PCR MIT EVAGREEN 54
4 ERGEBNISSE 57
4.1 UNTERSUCHUNGEN ZUM VORKOMMEN VERSCHIEDENER GENOTYPEN 57
4.1.1 PROBENMATERIAL FUER DAS C-PROFILING 57
4.1.2 ENTWICKLUNG DER PRIMER UND DER PCR FUER DAS C-PROFILING 62
4.1.3 C-PROFILING DER ITSL-REGION 64
4.1.4 C-PROFILING DER ITS2-REGION 66
4.1.5 ANWENDUNGEN DES C-PROFILINGS 67
4.1.5.1 PUTENELTERNTIERBETRIEB 67
4.1.5.2 GEMISCHTER BETRIEB 67
4.1.5.3 MASTELTERNTIERBETRIEB 67
4.1.6 ANLEGEN MONOKLONALER KULTUREN 68
4.1.6.1 MIKROMANIPULATION 68
4.1.6.2 C-PROFILING UND FLUOROGRAMME DER MONOKLONALEN KULTUREN 68
4.1.7 VORKOMMEN VON BLASTOCYSTIS SPP. UND T. GALLINARUM 70
4.2 UNTERSUCHUNGEN ZUM KOHLENHYDRATSTOFFWECHSEL 73
4.2.1 VERSUCHE ZUR PUFFERWIRKUNG VON MOPS UND HEPES 73
4.2.1.1 HEPES 73
4.2.1.2 MOPS 76
4.2.2 VERSUCHE ZUR EIGNUNG UNTERSCHIEDLICHER KOHLENHYDRATE IN M199 UND
PBS 78
4.2.2.1 KULTIVIERUNG IN M199 BASIERTEM MEDIUM 78
4.2.2.2 KULTIVIERUNG IN PBS BASIERTEM MEDIUM 80
4.2.2 VERSUCHE ZUR EIGNUNG VON GLUKOSE 82
4.2.3 VERSUCHE ZUR EIGNUNG VON VERSCHIEDENEN ZWISCHENPRODUKTEN DES
KOHLENHYDRATSTOFFWECHSELS ALS KOHLENHYDRATQUELLE IN PBS 89
4.2.3.1 PYRUVAT 90
4.2.3.2 GLUKOSE-1-PHOSPHAT 93
4.2.3.3 GLUKOSE-6-PHOSPHAT 96
4.2.3.4 MALTOSE 99
4.2.4 VERSUCHE ZUM EINFLUSS VON SAUERSTOFF UND CO2 AUF DAS
HISTOMONADEN-WACHSTUM
102
4.2.4.1 EINFLUSS DES WIEDERHOLTEN OEFFNENS DER KULTURGEFAESSE 102
4.2.4.2 EINFLUSS EINES ANAEROBEN UND EINES MIKROAEROPHILEN MILIEUS 104
4.2.5 EINFLUSS VON PYRUVAT AUF DIE TRANSKRIPTION VERSCHIEDENER ENZYME
106
4.2.5.1 SEQUENZIERUNG VON ABSCHNITTEN DES ALPHA-AMYLASE- UND
GLYKOGENPHOSPHORYLASE-GENS 107
4.2.5.2 ERMITTLUNG DER EFFIZIENZEN DER QPCR-PRIMER 107
4.2.5.3 EXPRESSION VON ALPHA-AMYLASE, GLYKOGEN-PHOSPHORYLASE UND GAPDH
UNTER
VERSCHIEDENEN KULTURBEDINGUNGEN 108
5 DISKUSSION 114
6 ZUSAMMENFASSUNG 132
7 SUMMARY 134
8 LITERATURVERZEICHNIS 136
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS 155
DANKSAGUNGEN 157
SELBSTSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 159
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| spelling | Balczulat, Stefanie Verfasser (DE-588)1051682940 aut Untersuchungen zum Vorkommen verschiedener Genotypen und Untersuchungen zum Kohlenhydratstoffwechsel von Histomonas meleagridis vorgelegt von Stefanie Balczulat Investigations on different genotypes and investigations on the carbohydrate metabolism of Histomonas meleagridis Berlin Mensch-und-Buch-Verl. 2014 XV, 159 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Nebentitel: Investigations on different genotypes and investigations on the carbohydrate metabolism of Histomonas meleagridis Berlin, Freie Univ., Diss., 2014 Histomonas meleagridis cabt genotypes cabt polymerase chain reaction cabt Galliformes cabt carbohydrate metabolism cabt Histomonas meleagridis (DE-588)1060736500 gnd rswk-swf Kohlenhydratstoffwechsel (DE-588)4031656-7 gnd rswk-swf Genotyp (DE-588)4601328-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Histomonas meleagridis (DE-588)1060736500 s Genotyp (DE-588)4601328-3 s Kohlenhydratstoffwechsel (DE-588)4031656-7 s DE-604 Erscheint auch als Online-Ausgabe urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000096716-0 http://www.diss.fu-berlin.de/diss/receive/FUDISS_thesis_000000096716 kostenfrei Volltext DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027327554&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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