Etablierung einer Mehrfach-Immunfluoreszenzfärbung Mittels Quantum Dots zur Charakterisierung humaner mesenchymaler Stammzellen auf Einzelzellniveau:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
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2013
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Beschreibung: | 116 S. Ill., graph. Darst. |
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 6
1.1. HUMANE MESENCHYMALE STAMMZELLEN 6
1.1.1. DEFINITION 6
1.1.2. VORKOMMEN UND POTENTIAL HUMANER MESENCHYMALER STAMMZELLEN 7
1.1.3. IDENTIFIZIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG 10
1.2. IMMUNZYTOCHEMIE 17
1.2.1. ALLGEMEINES 17
1.2.2. GRUNDLAGEN DER FLUORESZENZENTSTEHUNG 18
1.2.3. FLUORESZENZMIKROSKOPIE 19
1.3. QUANTUM DOTS 21
1.3.1. AUFBAU UND EIGENSCHAFTEN 21
1.3.2. ANWENDUNGSMOEGLICHKEITEN 24
1.4. FRAGESTELLUNG 26
2. MATERIAL UND METHODEN 27
2.1. GEWINNUNG HUMANER MESENCHYMALER STAMMZELLEN 27
2.1.1. ZELLISOLIERUNG 27
2.1.2. IDENTIFIZIERUNG HUMANER MESENCHYMALER STAMMZELLEN 28
2.2. ZELLKULTUR 29
2.3. IMMUNZYTOCHEMIE 30
2.3.1. IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG AUF EINZELZELLNIVEAU 30
2.3.2. OPTIMIERUNG DES FAERBEPROTOKOLLS 33
2.3.3. ANTIKOERPER & FLUORESZENZSTOFFE 34
2.4. MANUELLE KONJUGATION EINES ANTIKOERPERS MIT QUANTUM DOTS 35
2.5. BILDAKQUISITION 36
2.5.1. FLUORESZENZMIKROSKOPIE 36
2.5.2. OPTIMIERUNG DER OPTISCHEN GERAETE 40
2.5.3. PROOF OF PRINCIPLE 41
2.6. VERWENDETE MATERIALIEN UND GERAETE 41
4 | S E I T E
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INHALTSVERZEICHNIS
3. ERGEBNISSE 44
3.1. ISOLIERUNG UND IDENTIFIZIERUNG 44
3.2. ZELLKULTUR 45
3.3. IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG AUF EINZELZELLNIVEAU 47
3.3.1. OPTIMIERUNG DES FAERBEPROTOKOLLS FUER QUANTUM DOTS 51
3.3.2. ERGEBNISSE MIT QDOT FILTER 51
3.3.3. PROOF OF PRINCIPLE 53
3.3.4. FAERBUNG EXTRAZELLULAERER MATRIX ALS POSITIVKONTROLLE 55
3.3.5. ERGEBNISSE MIT KONFOKALEM LASERRASTERMIKROSKOP 56
3.3.6. DIREKTE KONJUGATION EINES PRIMAEREN ANTIKOERPERS MIT QUANTUM DOTS
59
4. DISKUSSION 61
4.1. ZELLEN UND KULTUR 61
4.2. METHODIK 63
4.3. VERWENDETE MARKER 68
4.4. QUANTUM DOT FAERBUNG 72
4.5. R6SUME 78
5. ABSTRACT 81
* 6. LITERATURVERZEICHNIS 83
7. ANHANG 111
7.1. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 111
7.2. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 113
7.3. HERSTELLERPROTOKOLLE 114
7.3.1. IMMUNZYTOCHEMIE 114
7.3.2. MANUELLE KONJUGATION EINES ANTIKOERPERS MIT QUANTUM DOTS 114
7.4. EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG 115
7.5. DANKSAGUNG 116
5 | S E I T E
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