Zelluläre Internalisierung von Mikropartikeln:
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2013
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS 1
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 3
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 4
WIDMUNG 6
I. EINLEITUNG 1
1.1 ZELLULAERE MIKROPARTIKEL 1
1.2 TRANSFER VON PLASMAMEMBRANKOMPONENTEN 6
1.3 DIE ROLLE VON MIKROPARTIKELN
BEI MALIGNEN ERKRANKUNGEN 7
1.4 DIE ROLLE VON
MIKROPARTIKELN BEI DER BLUTGERINNUNG 7
1.5 MIKROPARTIKEL UND
TF 8
1.6 CLEARANCE VON MIKROPARTIKELN 10
1.7 INTERNALISIERUNG VON EXTRAZELLULAEREM
MATERIAL DURCH ENDOZYTOSE 11
/. 7.1 CLATHRIN-ABHAENGIGE ENDOZYTOSE 11
I.7.2 CIATHRIN-UNABHAENGIGE ENDOZYTOSE 12
1.8 PHAGOZYTOSE 14
1.9 *EAT-ME -SIGNALE ZUR ERKENNUNG APOPTOTISCHER ZELLEN 15
1.10 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 17
II. MATERIAL UND METHODEN 18
11.1 MATERIAL 18
II.1.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGSMITTEL 18
11.1.2 PUFFER 18
11.1.3 MATERIALIEN ZUR VENOESEN BLUTENTNAHME 19
11.1.4 CHEMIKALIEN ZUR MIKROPARTIKEL- UND ZELLPRAEPARATION 20
11.1.5 EUKARYONTISCHE ZELLEN 21
11.1.6 PLASMIDE 21
11.1.7 KULTUR-UND EINFRIERMEDIEN 21
11.1.8 GERAETE 21
11.1.9 VERBRAUCHSMATERIAL 22
11.2 METHODEN 23
II.
2.1 PROBANDEN UND BLUTABNAHME 23
11.2.2 ZELLPRAEPARATIONEN 23
11.2.3 ZELLKULTUR 25
11.2.4 TRANSFER VON MIKROPARTIKELN AUF AKZEPTORZELLEN 26
11.2.5 MESSUNG MITTELS PH-METHODE 28
11.2.6 PRINZIP DER DARSTELLUNG VON MIKROPARTIKELN IN DER KONFOKALEN
LASERSCANMIKROSKOPIE 29
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2
INHALTSVERZEICHNIS
II.
2.7 STATISTISCHE AUSWERTUNG 31
III. ERGEBNISSE 33
111.1 KALIBRIERUNGSKURVE 33
111.2 MESSUNG DES
PH-WERTES IN ISOLIERTEN MIKROPARTIKELN 34
111.3
PH-MESSUNG IN ABHAENGIGKEIT VON DER INKUBATIONSZEIT BEI
37C 35
111.4
PH-MESSUNG IN ABHAENGIGKEIT VON
DER INKUBATIONSZEIT BEI
4C 36
111.5 INTERNALISIERUNG VON MIKROPARTIKELN
IN THP-1 ZELLEN 37
111.6 HEMMUNG DER MIKROPARTIKEL-INTERNALISIERUNG
DURCH CYTOCHALASIN B 39
111.7 ZIRKULIERENDE MIKROPARTIKEL UND
NEUTROPHILE GRANULOZYTEN 41
111.8 AUFNAHME TF-CFP POSITIVER MIKROPARTIKEL IN THP-1 ZELLEN 42
111.9 0YNAMIN-K44A 44
111.10 BEEINFLUSSUNG DER INTERNALISIERUNG
DURCH ERKENMUNGSMARKER FUER DIE
PHAGOZYTOSE APOPTOTISCHER ZELLEN
45
III.10.1 ANNEXIN V 45
III.
10.2 DURAMYCIN 46
111.10.3 ANTI-CALRETICULIN-AK 47
111.11
INTERNALISIERUNG VON MIKROPARTIKELN
DURCH THROMBOZYTEN
49
IV. DISKUSSION 54
IV.
1
ENDOZYTOSE DER MIKROPARTIKEL
55
IV.2
DIE ROLLE DER AKTIN-POLYMERISATION
UND VON DYNAMIN
BEI DER MIKROPARTIKEL-
ZELL-INTERAKTION 56
IV.3
PHAGOZYTOSE VON MIKROPARTIKELN OBER DIE
ERKENNUNG VON *EAT-ME -SIGNALEN57
IV.4
INTERNALISIERUNG VON TF IN PLAETTCHEN DURCH
ENDOZYTOSE TF-POSITIVER
MIKROPARTIKEL 59
IV.5
VERSCHIEDENE WEGE DER ZELLULAEREN
INTERNALISIERUNG VON MIKROPARTIKELN
....61
IV
.6 AUSBLICK 62
V. ZUSAMMENFASSUNG 64
VI. LITERATURVERZEICHNIS 65
VII. ANHANG 74
VII.1
DANKSAGUNG 74
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