Autoantikörper bei Kindern mit demyelinisierenden ZNS-Erkrankungen:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2014
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| Beschreibung: | 58 S. Ill., graph. Darst. |
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Datensatz im Suchindex
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 1
2 EINLEITUNG 3
2.1 M ULTIPLE SKLEROSE 3
2.1.1 EINFUEHRUNG 4
2.1.2 IMMUNPATHOPHYSIOLOGIE S
2.1.3 PARADIGMENWECHSEL: B-ZELLEN UND AUTOANTIKOERPER IM
FOKUS 7
2.1.4 BESONDERHEITEN DER KINDLICHEN DEMYELINISIERUNG 8
2.2 ZIELSETZUNG 11
3 PATIENTEN, MATERIAL UND METHODEN 12
3.1 PATIENTEN- UND KONTROLLKOHORTE 12
3.2 MATERIAL 14
3.2.1 GERAETE 14
3.2.2 CHEMIKALIEN UND REAKTIONSGETAEBE IS
3.3 METHODEN 16
3.3.1 GEWINNUNG VON SERUM VON HUMANEN SPENDERN 16
3.3.2 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 16
3.3.2.1 TRANSFEKTION UND PROTEINEXPRESSION 16
3.3.2.2 KULTIVIERUNG VON ZELLEN 16
3.3.2.3 EINFRIEREN UND AUFTAUEN VON ZELLEN 17
3.3.2.4 BESTIMMUNG DER LEBENDZELLZAHL 17
3.3.3 PROTEINANALYTIK 17
3.3.3.1 PROTEINBESTIMMUNG: BICINCHONINSAEURETEST (BCA
TEST) 17
3.3.3.2 PROTEINAUFREINIGUNG 18
3.3.3.3 GELELEKTROPHORESE 20
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INHALTSVERZEICHNIS
3.3.3.4 SILBERFAERBUNG 22
3.3.3.5 ELEKTROBLOTTING 23
3.3.3.6 MASSENSPEKTROMETRIE 24
3.3.4 IMMUNOLOGISCHE METHODEN 24
3.3.4.1 WESTERN BLOT 24
3.3.4.2 DURCHFLUSSZYTOMETRIE: ANALYSE VON ANTIKOERPERN
GEGEN ZELLBASIERTES MOG 26
3.3.4.3 DURCHFLUSSZYTOMETRIE: BLOCKIERUNG DER ANTI-
MOG REAKTIVITAET 27
3.3.4.4 ELISA: SERUMREAKTIVITAET GEGEN REKOMBINANTE
ANTIGENE 27
3.4 STATISTISCHE ANALYSE 28
4 ERGEBNISSE 29
4.1 ISOLIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG DER (GLYKO-) PROTEINE DER WEIBEN
UND GRAUEN SUBSTANZ 29
4.2 IDENTIFIZIERUNG VON AUTOANTIGENKANDIDATEN IM SERUM VON PATIENTEN
MITTELS PROTEOM ANALYSE 30
4.2.1 PATIENTEN UND KONTROLLEN ERKENNEN MOEGLICHE AUTOANTIGENE
IM EIN-DIMENSIONALEN WESTERN BLOT 31
4.2.2 WEITERE DIFFERENZIERUNG DER GRAUEN SUBSTANZ ANTIGENE IM
ZWEIDIMENSIONALEN WESTERN BLOT 34
4.3 WEITERE CHARAKTERISIERUNG DER AUTOANTIGEN-KANDIDATEN MITTELS
ELISA MIT REKOMBINANTEN PROTEINEN 36
4.3.1 DAS UBIQUITAERE GAPDH ALS MOEGLICHES ZIELANTIGEN 36
4.3.2 DAS HITZESCHOCKPROTEIN HSP60 ALS MOEGLICHES ZIELANTIGEN..
38
4.3.3 MOG ALS MOEGLICHES ZIELANTIGEN 39
4.4 WEITERE CHARAKTERISIERUNG DER AUTOANTIGENKANDIDATEN MITTELS
DURCHFLUSSZYTOMETRIE 39
4.4.1 MOG ALS MOEGLICHES ZIELANTIGEN 39
4.4.1.1 DIFTERENZIELLE MOG ERKENNUNG IN PATIENTEN UND
KONTROLLEN 39
INHALTSVERZEICHNIS
4.4.1.2 CHARAKTERISIERUNG DER ANTI-MOG AUTOANTIKOERPER.
44
4.4.1.3 LANGZEITVERLAUF DER ANTI-MOG ANTIKOERPER 44
4.S ASSAY VERGLEICH ZUR DETEKTION VON ANTI-MOG AUTOANTIKOERPEM 47
5 DISKUSSION 49
5.1 ANTI-MOG ANTIKOERPER CHARAKTERISIEREN EINE SUBPOPULATION VON
KINDERN MIT AKUTER DEMYELINISIERUNG 49
5.2 LONGITUDINALE ANALYSE DER ANTI-MOG ANTIKOERPER ZEIGT EINEN
DIFTERENZIEILEN VERLAUF BEI AKUTER VERSUS CHRONISCHER
DEMYELINISIERUNG IN KINDERN 49
5.3 DIAGNOSTISCHE UND PATHOPHYSIOLOGISCHE RELEVANZ DER ANTI-MOG
ANTIKOERPER 50
5.4 DIFTERENTE ANTI-MOG REAKTIVITAET IN PAEDIATRISCHER UND ADULTER
DEMYELINISIERUNG 51
5.5 ASSAY VERGLEICH: ZELLBASIERTER ASSAY ALS METHODE DER WAHL ZUR
DETEKTION VON ANTI-MOG ANTIKOERPERN 52
5.6 PATHOPHYSIOLOGISCHE RELEVANZ ANDERER ANTIGENE 53
LITERATURVERZEICHNIS
ABBILDUNGS- UND TABELLENVERZEICHNIS
ABKURZUNGSVERZEICHNIS
CURRICULUM VITAE
EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG
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