Die Kontrolle der monoallelen Expression, antigenen Variation und Entwicklung in Trypanosoma brucei:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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2013
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG / SUMMARY 1
2 ABKUERZUNGEN 3
3 EINLEITUNG 5
3.1 AFRIKANISCHE TRYPANOSOMEN 5
3.1.1 DIE VERSCHIEDENEN ARTEN AFRIKANISCHER TRYPANOSOMEN 5
3.2 TRYPANOSOMA BRUCEI 6
3.2.1 DIE ZELLARCHITEKTUR UND DER ZELLZYKLUS 6
3.2.2 DER LEBENSZYKLUS 8
3.2.3 DIE ANTIGENE VARIATION 12
3.3 MONOALLELE GENEXPRESSION 16
3.3.1 DIE MONOALLELE VSG EXPRESSION IN T. BRUCEI 18
4 MATERIALIEN UND METHODEN 22
4.1 MATERIALIEN 22
4.1.1 ENZYME UND KITS 22
4.1.2 OLIGONUKLEOTIDE 22
4.1.3 ANTIKOERPER 24
4.1.4 CHEMIKALIEN 25
4.1.5 KULTURMEDIEN 25
4.1.6 PUFFER UND LOESUNGEN 26
4.1.7 BESONDERE TECHNISCHE GERAETE 28
4.1.8 COMPUTERPROGRAMME 28
4.1.9 PLASMIDE 29
4.1.10 TRYPANOSOMEN 30
4.2 METHODEN 31
4.2.1 ARBEITEN MIT T. BRUCEI 31
4.2.2 ARBEITEN MIT E COLI 34
4.2.3 MOLEKULARBIOLOGISCHE ARBEITEN 35
5 ERGEBNISSE 44
5.1 DIE REGULATION DER VSG EXPRESSION 44
5.1.1 INDUZIERBARE EXPRESSION DES EKTOPISCHEN VSG121 45
5.1.2 DAS EKTOPISCHE VSG121 REPRIMIERT DAS ENDOGENE VSG221 47
5.1.3 DAS EKTOPISCHE VSG
121 WIRD GLEICHMAESSIG IN DER POPULATION EXPRIMIERT 49
5.2 DIE REGULATION DER AKTIVEN VSG EXPRESSIONSSTELLE 51
I
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INHALTSVERZEICHNIS
5.2.1 DIE AKTIVE BES WIRD DURCH EINE VSG UEBEREXPRESSION INAKTIVIERT 51
5.2.2 DIE AKTIVE BES WIRD GRADUELL INAKTIVIERT 53
5.3 DER EINFLUSS DER BES AKTIVITAET AUF DEN ZELLZYKLUS 57
5.3.1 DIE BES ATTENUIERUNG FUEHRT ZU EINER VERLAENGERTEN G1-PHASE 57
5.3.2 DIE GLOBALE RNA-SYNTHESERATE WIRD REDUZIERT 61
5.4 DER EINFLUSS DER BES-AKTIVITAET AUF DIE ENTWICKLUNG DER TRYPANOSOMEN
65
5.4.1 DIE BES ATTENUIERUNG FUEHRT ZUR EXPRESSION EINES SHORT STUMPY
REPORTERS 66
5.4.2 DAS NATIVE PAD1 WIRD STADIENSPEZIFISCH IN DER G1-PHASE EXPRIMIERT
70
5.4.3 DIE RUHENDEN TRYPANOSOMEN SIND DIFFERENZIERUNGSKOMPETENT 72
5.5 DIE AKTIVITAET DER BES WIRD DURCH ESAG1 UND ESAG2 GEMESSEN 78
5.5.1 DIE DEPLETION VON ESAG1
UND 2 FUEHRT ZU WACHSTUMSDEFEKTEN UND INDUZIERT DEN
SHORT STUMPY-MARKER GFPIPADUTR 78
5.6 DIE FUNKTION DER VSG 3 UTR BEI DER REGULATION DER BES AKTIVITAET 82
5.6.1 DAS KONSERVIERTE 16MER IST NOTWENDIG FUER DIE INITIATION DER BES
ATTENUIERUNG 84
5.6.2 DIE EXPRESSION EINES REPORTER-GENS MIT VSG121 3 UTR FUEHRT ZUR
DEPLETION DER
ENDOGENEN VSG MRNA 86
6 DISKUSSION 91
6.1 EINE NEGATIVE RUECKKOPPLUNG KONTROLLIERT DIE BES AKTIVITAET 91
6.2 WODURCH WIRD DIE NEGATIVE RUECKKOPPLUNG AUSGELOEST? 95
6.3 WELCHE ROLLE SPIELT DIE CHROMATINSTRUKTUR BEI DER BES ATTENUIERUNG?
103
6.4 WELCHE ROLLE SPIELEN DIE ESAGS BEI EINEM IN SITU WECHSEL? 111
6.5 ANTIGENE VARIATION UND ENTWICKLUNG IN T. BRUCEI: EIN INTEGRATIVES
MODELL 117
7 AUSBLICK 121
8 LITERATURVERZEICHNIS 123
9 ANHANG 135
9.1 EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 135
9.2 PUBLIKATIONSLISTE 136
9.3 LEBENSLAUF 137
9.4 DANKSAGUNGEN 138
II
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