Untersuchung der Lebenszeit von Plasmazellen nach der oralen Immunisierung von Mäusen:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Berlin
Mensch und Buch Verl.
2013
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Beschreibung: | Nebentitel: Analysis of lifetime of plasma cells after oral immunization of mice |
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1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS IMMUNSYSTEM 1
1.2 DIE HUMORALE IMMUNANTWORT 2
1.2.1 STRUKTUR UND FUNKTIONSWEISE VON ANTIKOERPERN 2
1.2.2 AKTIVIERUNG DER B-ZELLEN UND IHRE DIFFERENZIERUNG 3
1.2.3 LOKALISATION UND LEBENSDAUER VON PLASMAZELLEN 5
1.2.4 DAS KONZEPT DER UEBERLEBENSNISCHE 7
1.3 DAS MUKOSALE IMMUNSYSTEM 9
1.3.1 DAS DARMIMMUNSYSTEM 9
1.4 MUKOSALE VAKZINE 17
1.4.1 ORAL VERABREICHTE MUKOSALE VAKZINE 17
1.5 DAS CHOLERATOXIN 20
2 ZIELSETZUNG DIESER ARBEIT 21
3 MATERIAL UND METHODEN 22
3.1 MEDIEN UND PUFFER 22
3.2 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 23
3.3 ALLGEMEINE VERBRAUCHSMATERIALIEN 23
3.4 ANTIKOERPER UND REAGENZIEN FUER DIE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE UND IMMUNFLUORESZENZ 24
3.5 ANTIKOERPER FUER ELISPOT UND ELISA 25
3.6 GERAETE 25
3.7 VERSUCHSTIERE UND BEHANDLUNGEN 26
3.7.1 VERWENDETE MAEUSE UND TIERHALTUNG 26
3.7.2 DIE ORALE IMMUNISIERUNG MITTELS MAGENSONDE 26
3.7.3 DIE BEHANDLUNG MIT EDU ZUR ANALYSE DER ZELLPROLIFERATION 26
3.8 ZELLPRAEPARATIONEN 27
3.8.1 ISOLIERUNG VON LYMPHOZYTEN AUS MILZ UND KNOCHENMARK 27
3.8.2 ISOLIERUNG DER LYMPHOZYTEN AUS DUENNDARM UND LYMPHKNOTEN 27
3.9 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYSE DER PLASMAZELLEN 28
3.9.1 PRINZIP DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 28
3.9.2 FLUORESZENZMARKIERUNG VON OBERFLAECHENMOLEKUELEN 29
3.9.3 ZELLFIXIERUNG UND FLUORESZENZMARKIERUNG VON INTRAZELLULAEREN
MOLEKUELEN 30
3.9.4 FLUORESZENZMARKIERUNG VON INTRANUKLEAEREN EDU 30
3.9.5 ZELLZAHLBESTIMMUNG 30
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3.10 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG VON GEWEBESCHNITTEN 31
3.10.1 EINFRIEREN VON DARMGEWEBE 31
3.10.2 ANFERTIGEN VON GEWEBESCHNITTEN DES DARMES UND FIXIERUNG 31
3.10.3 FIXIERUNG UND EINFRIEREN VON KNOCHEN 31
3.10.4 ANFERTIGEN VON KRYOSCHNITTEN DES KNOCHENS 32
3.10.5 IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG VON GEWEBESCHNITTEN 32
3.10.6 PRINZIP DER KONFOKALEN MIKROSKOPIE 33
3.11 QUANTIFIZIERUNG DER ANTIGEN-SPEZIFISCHEN PLASMAZELLEN 34
3.11.1 PRINZIP DER ENZYMGEKOPPELTEN IMMUNOSPOT METHODE 34
3.11.2 DURCHFUEHRUNG DES ELISPOT ASSAYS 34
3.12 UNTERSUCHUNG SEROLOGISCHER ANTIKOERPER 35
3.12.1 PRINZIP DES ELISA 35
3.12.2 DURCHFUEHRUNG DES ELISA 35
3.13 GRAPHISCHE DARSTELLUNG UND STATISTISCHE AUSWERTUNG 36
4 ERGEBNISSE 37
4.1 UNTERSUCHUNG DER PLASMAZELLEN NACH ORALER IMMUNISIERUNG 37
4.1.1 ENTWICKLUNG EINER ORALEN IMMUNISIERUNGSSTRATEGIE 37
4.1.2 DIE DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE IDENTIFIKATION DER MUKOSALEN
PLASMAZELLEN ....39
4.1.3 ANZAHL DER PLASMAZELLEN DER LAMINA PROPRIA UND DES KNOCHENMARKS 41
4.1.4 UNTERSUCHUNG DER ISOTYP-EXPRESSION DER PLASMAZELLEN
DER LAMINA PROPRIA UND DES KNOCHENMARKS 43
4.2 ANALYSE DER MUKOSAL INDUZIERTEN PLASMAZELLEN 45
4.2.1 DETEKTION VON OVA-SPEZIFISCHEN ASC NACH DER ORALEN IMMUNISIERUNG
45
4.2.2 ANZAHL DER OVA-SPEZIFISCHEN PLASMAZELLEN IN DER LAMINA PROPRIA UND
IM KNOCHENMARK NACH DER ORALEN IMMUNISIERUNG 47
4.2.3 UNTERSUCHUNG DER ISOTYP-EXPRESSION DER OVA-SPEZIFISCHEN
PLASMAZELLEN
DER LAMINA PROPRIA UND DES KNOCHENMARKS 49
4.2.4 SOWOHL OVA ALS AUCH CT-SPEZIFISCHE PLASMAZELLEN SIND 9 MONATE NACH
IMMUNISIERUNG IN LAMINA PROPRIA UND KNOCHENMARK NACHWEISBAR 50
4.2.5 INTESTINAL INDUZIERTE PLASMAZELLEN SEZERNIEREN ANTIGEN-SPEZIFISCHE
ANTIKOERPER UND BILDEN EINEN STABILEN SERUMTITER 52
4.2.6 UNTERSUCHUNG DER OVA-SPEZIFISCHEN PLASMAZELLEN
DER PEYER SEHEN PLAQUES, DER MESENTERIALEN LYMPHKNOTEN UND DER MILZ...53
4.3 UNTERSUCHUNG DES PROLIFERATIONSVERHALTENS VON PLASMAZELLEN MITTELS
EDU-EINBAU IN DIE DNA 55
4.3.1 PROLIFERIERENDE ZELLEN KOENNEN EFFIZIENT MIT EDU MARKIERT WERDEN 55
4.3.2 LOKALISATION DER EDU+ OVA-SPEZIFISCHEN PLASMAZELLEN NACH DER
MARKIERUNGSPHASE IM GEWEBEVERBAND 57
4.3.3 DETEKTION VON LANGLEBIGEN PLASMAZELLEN IN DER LAMINA PROPRIA UND
IM KNOCHENMARK MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 59
4.3.4 UNTERSUCHUNG DER MUKOSAL INDUZIERTEN OVA-SPEZIFISCHEN PLASMAZELLEN
AUF IHR POTENZIAL ZUR LANGLEBIGKEIT IN LAMINA PROPRIA UND KNOCHENMARK 61
4.3.5 UNTERSUCHUNG DER ISOTYP-EXPRESSION DER LANGLEBIGEN PLASMAZELLEN 63
4.3.6 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER LANGLEBIGEN ASC IM GEWEBEVERBAND 65
5 DISKUSSION 72
5.1 DISKUSSION DER METHODIK 72
5.1.1 DIE ORALE IMMUNISIERUNG INDUZIERT DIE BILDUNG SPEZIFISCHER
PLASMAZELLEN...72
5.1.2 LANGLEBIGE PLASMAZELLEN KOENNEN MIT EDU EFFIZIENT MARKIERT WERDEN
73
5.1.3 MUKOSALE ASC KOENNEN EINDEUTIG IDENTIFIZIERT WERDEN 75
5.2 DISKUSSION DER IN DEN EXPERIMENTEN ERZIELTEN ERGEBNISSE 77
5.2.1 DAS KNOCHENMARK BEHERBERGT DAS GROESSERE LYMPHOZYTENRESERVOIR
IM VERGLEICH MIT DER LAMINA PROPRIA DES DUENNDARMS 77
5.2.2 DIE PLASMAZELLKOMPARTIMENTE DER LAMINA PROPRIA UND DES
KNOCHENMARKS
UNTERSCHEIDEN SICH DEUTLICH IN IHRER ISOTYP-ZUSAMMENSETZUNG 78
5.2.3 ORAL INDUZIERTE PLASMAZELLEN PERSISTIEREN IN VERSCHIEDENEN ORGANEN
BIS ZU 9 MONATEN NACH IHRER ENTSTEHUNG 80
5.2.4 OVA-SPEZIFISCHE ASC EXPRIMIEREN IM DARM UEBERWIEGEND IGA,
WAEHREND IM KNOCHENMARK LGA+ UND LGG1+ ASC DIE MEHRHEIT BILDEN 83
5.2.5 ORAL INDUZIERTE PERSISTIERENDE PLASMAZELLEN HALTEN EINEN
STABILEN SERUMTITER AUFRECHT 84
5.2.6 PLASMAZELLEN DER LAMINA PROPRIA KOENNEN LANGLEBIG WERDEN 85
5.2.7 UEBERLEBENSNISCHEN IN DER LAMINA PROPRIA DES DUENNDARMS 88
5.2.8 DAS DUENNDARMGEWEBE BEHERBERGT WEITERE LANGLEBIGE ZELLEN 90
5.2.9 INTESTINAL INDUZIERTE PLASMAZELLEN TRAGEN ZUM LANGLEBIGEN
PLASMAZELLKOMPARTIMENT DES KNOCHENMARKS BEI 91
5.3 AUSBLICK 95
6 ZUSAMMENFASSUNG 97
7 SUMMARY 98
8 LITERATURVERZEICHNIS 99
9 ANHANG 115
I. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 115
II. TABELLENVERZEICHNIS 117
III. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 118
IV. PUBLIKATIONEN UND KONGRESSBEITRAEGE 120
V. DANKSAGUNG 121
VI. ERKLAERUNG 122
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spelling | Lemke, Anja Verfasser (DE-588)1046818910 aut Untersuchung der Lebenszeit von Plasmazellen nach der oralen Immunisierung von Mäusen vorgelegt von Anja Lemke Analysis of lifetime of plasma cells after oral immunization of mice Berlin Mensch und Buch Verl. 2013 122 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Nebentitel: Analysis of lifetime of plasma cells after oral immunization of mice Berlin, Freie Univ., Diss., 2013 mice cabt oral vaccination cabt immune response cabt plasma cells cabt longevity cabt intestinal mucosa cabt bone marrow cabt Schluckimpfung (DE-588)4210797-0 gnd rswk-swf Plasmazelle (DE-588)4174842-6 gnd rswk-swf Darmschleimhaut (DE-588)4228214-7 gnd rswk-swf Humorale Immunität (DE-588)4160794-6 gnd rswk-swf Knochenmark (DE-588)4031332-3 gnd rswk-swf Antikörper (DE-588)4002290-0 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Darmschleimhaut (DE-588)4228214-7 s Knochenmark (DE-588)4031332-3 s Plasmazelle (DE-588)4174842-6 s Humorale Immunität (DE-588)4160794-6 s Schluckimpfung (DE-588)4210797-0 s Antikörper (DE-588)4002290-0 s DE-604 Erscheint auch als Online-Ausgabe urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000096017-2 http://www.diss.fu-berlin.de/diss/receive/FUDISS_thesis_000000096017 kostenfrei Volltext DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027036951&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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