Pharmakologische und pharmakokinetische Untersuchungen zu Salicylalkoholderivaten aus Salicis cortex:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2013
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:bvb:355-epub-289435 kostenfrei Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | VII, 174 S. Ill., graph. Darst. |
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Datensatz im Suchindex
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adam_text | INHALT
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1 SALIX , DIE
WEIDE 1
1.2 SALICIS CORTEX:
DIE WEIDENRINDE 2
1.2.1 SALICIS CORTEX: VON DER HISTORISCHEN VERWENDUNG DER WEIDENRINDE
ZUR ENTWICKLUNG
VON ASPIRIN 2
1.2.2 SALICIS CORTEX:
AKTUELLE INDIKATIONEN UND
MONOGRAPHIEN DER WEIDENRINDE 3
1.2.3 SALICIS CORTEX:
INHALTSSTOFFE DER WEIDENRINDE 4
1.2.3.1 PHENOLGLYKOSIDE 5
1.2.3.2 FLAVONOIDE 7
1.2.3.3 GERBSTOFFE UND
WEITERE INHALTSSTOFFE 9
1.3 STUDIEN ZU WIRKUNGEN
DER WEIDENRINDE 10
1.3.1 IN VIVO
STUDIEN (TIERMODELLE) 10
1.3.2 KLINISCHE STUDIEN 11
1.4 VERTRAEGLICHKEIT DER WEIDENRINDE UND
TOXIKOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 13
1.5 PHARMAKOKINETISCHE STUDIEN DER WEIDENRINDE UND
IHRER INHALTSSTOFFE 14
1.6 STUDIEN ZUM WIRKMECHANISMUS
DER WEIDENRINDE IN VITRO 16
1.7 PHARMAKOTHERAPIE BEI
ARTHROSE, KREUZSCHMERZ UND
RHEUMATOIDER ARTHRITIS 18
1.8 ZIELSETZUNG
DER VORLIEGENDEN ARBEIT 20
2. BIOAKTIVITAETSGELEITETE FRAKTIONIERUNG
EINES WEIDENRINDENEXTRAKTES 21
2.1 HINTERGRUND 21
2.1.1 HINTERGRUND DER BIOAKTIVITAETSGELEITETEN
FRAKTIONIERUNG 21
2.1.2 HINTERGRUND DER PHYTOCHEMISCHEN
CHARAKTERISIERUNGEN 23
2.1.2.1 GESAMTSALICINBESTIMMUNG 23
2.1.2.2 FLAVONOIDGEHALTSBESTIMMUNG 24
2.1.2.3 GERBSTOFFGEHALTSBESTIMMUNG 25
2.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION 25
2.2.1 FRAKTIONIERUNG DES WEIDENRINDENEXTRAKTES UND NACHFOLGENDE
PHYTOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG 25
HTTP://D-NB.INFO/1045252107
INHALT
2.2.1.1 FRAKTIONIERUNG DES
WEIDENRINDENEXTRAKTES AN SEPHADEX*
LH-20 25
2.2.1.2 PHYTOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DES
EXTRAKTES UND DER
FRAKTIONEN S1-S326
2.2.2 IN VITRO TESTUNG
DES EXTRAKTES UND
DER FRAKTIONEN S1-S3
IM ICAM-1
ASSAY 29
2.2.3 FRAKTIONIERUNG
DER S1-FRAKTION MITTELS FLASH-CHROMATOGRAPHIE 30
2.2.4 IN VITRO TESTUNG
DER FRAKTIONEN F1-F8
IM ICAM-1 ASSAY 31
2.2.5 ISOLIERUNG
UND STRUKTURAUFKLAERUNG VON SALICORTIN
UND TREMULACIN 32
2.2.5.1 ISOLIERUNG
UND REINHEITSBESTIMMUNG VON
SALICORTIN 32
2.2.5.2 STRUKTURAUFKLAERUNG VON SALICORTIN 33
2.2.5.3 ISOLIERUNG
UND REINHEITSBESTIMMUNG VON
TREMULACIN 37
2.2.5.4 STRUKTURAUFKLAERUNG VON TREMULACIN 38
2.2.6 ZUSAMMENFASSUNG UND
AUSBLICK 41
2.3 EXPERIMENTELLER TEIL 42
2.3.1 FRAKTIONIERUNG 42
2.3.1.1 OFFENE SAEULENCHROMATOGRAPHIE
MIT SEPHADEX LH-20 42
2.3.1.2 FLASH-CHROMATOGRAPHIE VON S1 44
2.3.2 ISOLIERUNGEN 45
2.3.2.1 ISOLIERUNG VON
SALICORTIN AUS F5 UND VON
TREMULACIN AUS F7 45
2.3.2.2 STRUKTURAUFKLAERUNG DER ISOLATE 47
2.3.2.2.1 NMR-SPEKTROSKOPIE 47
2.3.2.2.2 MASSENSPEKTROMETRIE 48
2.3.2.3 REINHEITSBESTIMMUNGEN DER
ISOLATE 49
2.3.3 PHYTOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DES VERWENDETEN
WEIDENRINDENEXTRAKTES
UND
DER FRAKTIONEN S1-S3 50
2.3.3.1 GEHALTSBESTIMMUNG DES
GESAMTSALICINS NACH EUROPAEISCHEM
ARZNEIBUCH (PH.
EUR. 6.1) 50
2.3.3.2 FLAVONOIDGEHALTSBESTIMMUNG 52
2.3.3.3 BESTIMMUNG DES
GERBSTOFFGEHALTS 53
2.3.4 ICAM-1 ASSAY 54
2.3.5 STATISTIK 55
3. ENTZUENDUNGSHEMMENDE EIGENSCHAFTEN
VON SALICORTIN UND TREMULACIN
IN VITRO SOWIE
IHRE STABILITAETSKONTROLLE UNTER ZELLKULTURBEDINGUNGEN 57
3.1 HINTERGRUND
DER IN VITRO
TESTUNGEN 57
3.1.1 INVOLVIERUNG VON
ICAM-1 IN ENTZUENDUNGSMECHANISMEN 58
II
INHALT
3.1.2ICAM-1 ASSAY ALS ENTZUENDUNGSMODELL IN VITRO 60
3.1.3 MTT ASSAY ALS
CYTOTOXIZITAETSMODELL 61
3.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION 62
3.2.1 AKTIVITAET VON SALICORTIN
UND TREMULACIN
IM ICAM-1
ASSAY 62
3.2.2 STABILITAETSKONTROLLE VON
SALICORTIN UND TREMULACIN
UNTER ZELLKULTURBEDINGUNGEN 63
3.2.3 AKTIVITAET VON CATECHOL
IM MODIFIZIERTEN
ICAM-1 ASSAY 67
3.2.4 CYTOTOXIZITAETS (MTT)-ASSAY
MIT SALICORTIN, TREMULACIN UND
CATECHOL 68
3.2.5 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 70
3.3 EXPERIMENTELLER TEIL 71
3.3.1 ZELLKULTUR -HMEC-1-ZELLEN 71
3.3.1.1 ICAM-1 ASSAY 72
3.3.1.1.1 SUBSTANZAUFGABE 72
3.3.1.1.2 ICAM-1-EXPRESSIONSSTIMULATION 72
3.3.1.1.3 AUFARBEITUNG DER ZELLEN
MIT EINEM FITC-MARKIERTEN
ICAM-1-ANTIKOERPER FUER
DIE FACS-ANALYSE 73
3.3.1.1.4 FACS-ANALYSE UND AUSWERTUNG 73
3.3.1.2 MODIFIZIERTER ICAM-1
ASSAY 74
3.3.1.3 MTT ASSAY 74
3.3.1.3.1 SUBSTANZAUFGABE 74
3.3.1.3.2 MTT-AUFGABE UND AUFLOESUNG
DER ZELLEN 74
3.3.1.3.3 BESTIMMUNG DER ABSORPTION
UND AUSWERTUNG 75
3.3.1.4 VERWENDETE GERAETE, CHEMIKALIEN,
VERBRAUCHSMATERIALIEN UND
ZELLKULTURMEDIEN
IN KAPITEL 3.3.1 75
3.3.2 STABILITAETSKONTROLLE VON SALICORTIN UND TREMULACIN UNTER ICAM-1
ASSAY
BEDINGUNGEN 76
3.3.2.1 INKUBATION UND
PROBENAUFARBEITUNG 76
3.3.2.2 QUANTIFIZIERUNG VON
CATECHOL, SALICORTIN UND
TREMULACIN AUS DEN
PROBEN DER
STABILITAETUNTERSUCHUNGEN - 76
3.3.3 STATISTIK 78
4. IN
VIVO METABOLISIERUNG VON SALICORTIN
ZU CATECHOL NACH
PERORALER AUFNAHME 79
4.1 HINTERGRUND DES TIERMODELLS 79
4.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION 80
4.2.1 AUFARBEITUNG
DER SERUMPROBEN, HPLC-METHODE UND
VALIDIERUNG 80
III
INHALT
4.2.1.1 VERGLEICHBARKEIT VON
HUMAN- UND RATTENSERUM
4.2.1.1.1 VERGLEICHBARKEIT DER SELEKTIVITAET
4.2.1.1.2 VERGLEICHBARKEIT DER
WIEDERFINDUNG
80
80
82
4.2.2 CATECHOL- UND SALICYLSAEUREKONZENTRATION IM SERUM VON WISTAR-RATTEN
NACH
PERORALER APPLIKATION VON SALICORTIN UND ENZYMATISCHER AUFARBEITUNG DER
SERUMPROBEN
83
4.2.3 CATECHOL- UND SALICYLSAEUREKONZENTRATION IN NICHT ENZYMATISCH
AUFGEARBEITETEN
SEREN VON WISTAR-RATTEN
NACH PERORALER APPLIKATION VON
SALICORTIN 85
4.2.4 CATECHOLKONZENTRATION IM SERUM VON WISTAR-RATTEN
NACH PERORALER APPLIKATION VON
SALICORTIN UND
NUR PARTIELLER ENZYMATISCHER AUFARBEITUNG DER
SERUMPROBEN 86
4.2.5 ZUSAMMENFASSUNG UND
AUSBLICK 86
4.3. EXPERIMENTELLER TEIL 87
4.3.1 TIERMODELL 87
4.3.1.1 TIERE 88
4.3.1.2 SALICORTIN-APPLIKATION, BLUTNAHME UND SERUMGEWINNUNG 88
4.3.2 ANALYTIK DER SERUMPROBEN 88
4.3.3 STATISTIK 89
4.3.4 PHARMAKOKINETISCHE PARAMETER 89
5. SYNTHESE DES CATECHOLMETABOLITS
CATECHOLGLUCURONID UND SEINE AKTIVITAET
IM ICAM-1
ASSAY 91
5.1 HINTERGRUND 91
5.1.1 HINTERGRUND
DER TESTUNG VON METABOLITEN 91
5.1.2 HINTERGRUND DER
GLUCURONIDSYNTHESE 92
5.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION 93
5.2.1 SYNTHESE
DES CATECHOLGLUCURONIDS 93
5.2.1.1 SYNTHESE DER
GESCHUETZTEN CATECHOLGLUCURONIDVORSTUFE (PERACETYLIERTER
CATECHOLGLUCURONSAEUREMETHYLESTER) 93
5.2.1.2 ENTSCHUETZUNG DER
GESCHUETZTEN VORSTUFE
ZUM CATECHOLGLUCURONID 96
5.2.1.3 STRUKTURAUFKLAERUNG DES
SYNTHETISIERTEN CATECHOLGLUCURONIDS 96
5.2.1.4 REIHEITSBESTIMMUNG DES SYNTHETISIERTEN
CATECHOLGLUCURONIDS 99
5.2.2 IN VITRO AKTIVITAET DES
CATECHOLGLUCURONIDS IM ICAM-1
ASSAY 99
5.2.3 ZUSAMMENFASSUNG UND
AUSBLICK 101
5.3 EXPERIMENTELLER TEIL 103
IV
5.3.1 SYNTHESE DES
CATECHOLGLUCURONIDS 103
5.3.1.1 SYNTHESE DES
GESCHUETZTEN (PERACETYLIERTEN)
CATECHOLGLUCURONIDS 103
5.3.1.2 ENTSCHUETZUNG DES
PERACETYLIERTEN CATECHOLGLUCURONIDS ZU CATECHOLGLUCURONID
105
5.3.1.3 STRUKTURAUFKLAERUNG UND
REINHEITSBESTIMMUNG DES CATECHOLGLUCURONIDS 106
5.3.1.4 SONSTIGE VERWENDETE CHEMIKALIEN UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN IN KAPITEL 5.3.1
107
5.3.2 ICAM-1 ASSAY
VON CATECHOLGLUCURONID UND
CATECHOL 107
6. ENTZUENDUNGSHEMMENDE EIGENSCHAFTEN VON SALICORTIN IN VIVO 109
6.1 HINTERGRUND 109
6.1.1 HINTERGRUND DER IN VIVO
TESTUNG VON SALICORTIN 109
6.1.2 CARRAGEEN-INDUZIERTE ENTZUENDUNG IM *SIX-DAY-OLD AIR POUCH MODELL
ALS
ENTZUENDUNGSMODELL IN VIVO 110
6.1.3 QUANTIFIZIERTE ENTZUENDUNGSMARKER IM IN
VIVO MODELL 111
6.1.3.1 ZYTOKINE 111
6.1.3.1.1 INTERLEUKIN 1 BETA (IL-1 SS) 111
6.1.3.1.2 TUMOR NEKTROSE
FAKTOR ALPHA (TNF-A) 112
6.1.3.1.3 INTERLEUKIN 6 (IL-6) 113
6.1.3.2 MARKER DES OXIDATIVEN STRESSES 113
6.1.3.2.1 GLUTATHION
(GSH) 113
6.1.3.2.2 MALONDIALDEHYD (MDA) 114
6.1.3.2.3 MYELOPEROXIDASE (MPO) 114
6.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION . 115
6.2.1 ZYTOKINE
IM EXSUDAT UND
PLASMA 115
6.2.1.1
IL-1
SS 115
6.2.1.2 TNF-A 117
6.2.1.3 IL-6 118
6.2.2 MARKER DES
OXIDATIVEN STRESSES
IM PLASMA UND
/ ODER
IM EXSUDAT 120
6.2.2.1 GSH * 120
6.2.2.2 MDA 121
6.2.2.3 MPO 122
6.2.3 ZUSAMMENFASSUNG UND
AUSBLICK 123
6.3 EXPERIMENTELLER TEIL 126
6.3.1 *SIX-DAY-OLD AIR POUCH
MODELL 126
INHALT
6.3.1.1 CARRAGEEN
INDUZIERTE ENTZUENDUNG
IM *SIX-DAY-OLD AIR
POUCH MODELL 126
6.3.1.2 APPLIKATION DER
TESTSUBSTANZEN 126
6.3.1.3 EXSUDAT- UND
PLASMAGEWINNUNG 127
6.3.2 QUANTIFIZIERUNG
DER ENTZUENDUNGSMARKER 127
6.3.2.1 ZYTOKINE 127
6.3.2.2 MARKER DES OXIDATIVEN
STRESSES 128
6.3.2.2.1 GLUTATHION 128
6.3.2.2.2 MALONDIALDEHYD 128
6.3.2.2.3 MYELOPEROXIDASE 129
6.3.3 AUSWERTUNG 129
6.3.4 REAGENZIEN 130
7. PHARMAKOKINETISCHE STUDIE:
IDENTIFIZIERUNG PHENOLISCHER METABOLITE IM SERUM
GESUNDER PROBANDEN NACH
EINNAHME EINES WEIDENRINDENEXTRAKTES 131
7.1 HINTERGRUND 131
7.1.1 HINTERGRUND
DER PHARMAKOKINETISCHEN STUDIE 131
7.1.2 RECHTLICHE GRUNDLAGEN DER PHARMAKOKINETISCHEN STUDIE ALS KLINISCHE
PRUEFUNG UND
GESETZLICHE VORGABEN FUER IHRE
DURCHFUEHRUNG 132
7.1.3 FESTLEGUNG DER PRUEFMEDIKATION
DURCH CATECHOL-, SALICORTIN- UND
TREMULACINGEHALTS-
BESTIMMUNG IN ASSALIX*,
OPTOVIT ACTIFLEX UND
PROAKTIV
0
133
7.2 ERGEBNISSE UND
DISKUSSION 134
7.2.1 CATECHOL-, SALICORTIN- UND TREMULACINGEHALT IN ASSALIX* OPTOVIT
ACTIFLEX
8
UND
PROAKTIV 134
7.2.2 SERUMPROBENANALYTIK 136
7.2.2.1 VALIDIERUNG 136
7.2.2.2 CATECHOL- UND SALICYLSAEUREKONZENTRATION
IM SERUM GESUNDER
PROBANDEN NACH
EINNAHME EINES WEIDENRINDENEXTRAKTES
UND ENZYMATISCHER AUFARBEITUNG DER
SERUMPROBEN 137
7.2.2.3 CATECHOL- UND SALICYLSAEUREKONZENTRATION
IN NICHT ENZYMATISCH
AUFGEARBEITETEN
SEREN GESUNDER PROBANDEN NACH
EINNAHME EINES WEIDENRINDENEXTRAKTES 139
7.2.2.4 CATECHOLKONZENTRATION IN SEREN GESUNDER PROBANDEN NACH
EINNAHME EINES
WEIDENRINDENEXTRAKTES UND
NUR PARTIELLER ENZYMATISCHER AUFARBEITUNG
DER
SERUMPROBEN 140
7.2.3 ZUSAMMENFASSUNG UND
SCHLUSSFOLGERUNG 141
7.2.4 AUSBLICK 142
7.3 EXPERIMENTELLER TEIL 143
VI
INHALT
7.3.1 CATECHOL-, SALICORTIN- UND TREMULACINGEHALTSBESTIMMUNG IN
ASSALIX , OPTOVIT
ACTIFLEX UND PROAKTIV 143
7.3.1.1 HERSTELLUNG DER
UNTERSUCHUNGSLOESUNGEN 143
7.3.1.2 KALIBRIERUNG 144
7.3.1.3 HPLC-ANALYTIK 144
7.3.1.4 BERECHNUNG DES
CATECHOL-, SALICORTIN- UND
TREMULACINGEHALTS IN ASSALIX,
OPTOVIT ACTIFLEX UND
PROAKTIV 145
7.3.1.5 VERWENDETE GERAETE,
CHEMIKALIEN UND VERBRAUCHSMATERIALIEN
IN KAPITEL
7.3.1
145
7.3.2 ABLAUF DER KLINISCHEN
PRUEFUNG 146
7.3.2.1 PROBANDENREKRUTIERUNG 146
7.3.2.2 KINETIKTAG 147
7.3.2.3 DIAETPLAN 148
7.3.2.4 BLUTENTNAHME UND SERUMGEWINNUNG 148
7.3.3 ANALYTIK DER SERUMPROBEN 149
7.3.3.1 AUFARBEITUNG UND
EXTRAKTION 149
7.3.3.1.1 ENZYMATISCHE AUFARBEITUNG
UND EXTRAKTION
DER SERUMPROBEN 149
7.3.3.1.2 NICHT-ENZYMATISCHE AUFARBEITUNG
UND EXTRAKTION DER SERUMPROBEN 149
7.3.3.1.3 PARTIELL
ENZYMATISCHE AUFARBEITUNG UND EXTRAKTION
DER SERUMPROBEN 150
7.3.3.2 HPLC-ANALYTIK DER AUFGEARBEITETEN
SERUMPROBEN 150
7.3.3.3 GEHALTSBESTIMMUNGSMETHODE 151
7.3.3.3.1 MATRIXHERSTELLUNG FUER DIE
KALIBRIERUNG 151
7.3.3.3.2 HERSTELLUNG DER
KALIBRIERLOESUNGEN 152
7.3.3.4 VALIDIERUNG DER GEHALTSBESTIMMUNGSMETHODE 152
7.3.3.4.1 KALIBRIERUNG 152
7.3.3.4.2 WIEDERFINDUNGSVERSUCHE 152
7.3.3.4.3 DETEKTIONS- UND
QUANTIFIZIERUNGSGRENZE 153
7.3.3.4.4 PRAEZISION 153
7.3.3.4.5 SELEKTIVITAET 153
7.3.3.5 PHARMAKOKINETISCHE PARAMETER 154
7.3.3.6 VERWENDETE GERAETE,
CHEMIKALIEN UND VERBRAUCHSMATERIALIEN
IN KAPITEL 7.3.3
154
8. ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 155
9. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 159
10. LITERATURVERZEICHNIS 163
VII
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