Osteoporoseprophylaxe mit pflanzlichen Wirkstoffen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2013
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| Beschreibung: | Zsfassung in dt. und engl. Sprache |
| Beschreibung: | 155 Bl. Ill., graph. Darst. |
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 1
2 SUMMARY , 3
3 EINLEITUNG 5
3.1 OSTEOPOROSE 5
3.1.1
WIRTSCHAFTLICHE ECKDATEN
5
3.1.2
KRANKHEITSBILD OSTEOPOROSE
5
3.1.3
GESTOERTE KNOCHENHOMOEOSTASE BEI
OSTEOPOROSE
7
3.1.3.1 KNOCHENHOMOEOSTASE 7
3.1.3.2 KNOCHENRESORPTION UND -FORMATION 7
3.1.4 KNOCHENMETASTASIERUNG BEI MAMMA- UND PROSTATAKARZINOMEN 9
3.2 BEHANDLUNGSMOEGLICHKEITEN VON OSTEOPOROSE 10
3.2.1 CALCIUM UND VITAMIN D 10
3.2.2 ANTIRESORPTIVE THERAPIE 11
3.2.2.1 HRT (HORMONERSATZTHERAPIE) 11
3.2.2.2 SERMS (SELEKTIVE ESTROGEN-REZEPTOR MODULATOREN) 11
3.2.2.3 BISPHOSPHONATE 13
3.2.2.4 RANKL-ANTIKOERPER 14
3.2.2.5 CATHEPSIN-K-ANTAGONISTEN 16
3.2.2.6 CALCITONIN 16
3.2.3 OSTEOANABOLE THERAPIE 17
3.2.3.1 TERIPARATID 17
3.2.3.2 STRONTIUMRANELAT 18
3.2.3.3 SOST-ANTIKOERPER 18
3.2.3.4 FLUORID 19
3.3 TRAUBENSILBERKERZE (CIMICIFUGA RACEMOSA) 20
3.3.1 PORTRAIT DER PFLANZE 20
3.3.2 ANWENDUNG IN DER GESCHICHTE 21
3.3.3 VERMUTETE INHALTSSTOFFE 22
3.3.3.1 PHYTOOESTROGENE? 22
3.3.3.2 TRITERPENE 24
HTTP://D-NB.INFO/1044049685
3.3.3.3 PHENOLSAEUREN 26
3.3.3.4 N-METHYLSEROTONIN 27
3.4 ZIEL DER ARBEIT 29
4 MATERIAL UND METHODEN 30
4.1 MATERIAL 30
4.1.1 GERAETE 30
4.1.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN 31
4.1.3
CHEMIKALIEN/REAGENZIEN
31
4.1.4 KITS 32
4.1.5 PRIMER 33
4.1.5.1 PRIMER FUER SEMI-QUANTITATIVE PCR 33
4.1.5.2 PRIMER FUER QUANTITATIVE REALTIME-PCR 34
4.1.6 VEKTOREN 35
4.1.7 SOFTWARE UND INTERNETSEITEN 35
4.1.8 LOESUNGEN, PUFFER UND MEDIEN 36
4.1.8.1 ALLGEMEINE LOESUNGEN 36
4.1.8.2 ZELLKULTURMEDIEN 39
4.2 METHODEN 42
4.2.1 FRAKTIONIERUNGSPROZESS VON
CIMICIFUGA RACEMOSA 42
4.2.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN
43
4.2.2.1 ISOLIERUNG VON ZELLULAERER RNA 43
4.2.2.2 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON NUKLEINSAEUREN 43
4.2.2.3 REVERSE TRANSKRIPTION 43
4.2.2.4 SEMI-QUANTITATIVE POLYMERASE-KETTENREAKTION (PCR) 44
4.2.2.5 QUANTITATIVE ECHTZEIT POLYMERASE-KETTENREAKTION 45
4.2.2.5.1 DURCHFUEHRUNG 45
4.2.2.5.2 AUSWERTUNG 46
4.2.2.6 AGAROSEGELELEKTROPHORESE 47
4.2.2.6.1 DENATURIERENDE AGAROSEGELELEKTROPHORESE 47
4.2.2.6.2 NICHT-DENATURIERENDE AGAROSEGELELEKTROPHORESE 48
4.2.2.7 MIKROARRAY-ANALYSEN 48
4.2.2.7.1 STATISTISCHE AUSWERTUNG VON MIKROARRAY-DATEN 49
4.2.3 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 49
4.2.3.1 ISOLIERUNG VON HUMANEN MESENCHYMALEN STAMMZELLEN
(HMSC) AUS
SPONGIOSA/HUEFTKOPF 49
4.2.3.2 KULTIVIERUNG VON EUKARYOTISCHEN ZELLEN 50
4.2.3.3 BESTIMMUNG DER ZELLZAHL 50
4.2.3.4 MESSUNG DER APOPTOSE 51
4.2.3.5 MESSUNG DER
PROLIFERATION 51
4.2.3.6 BERECHNUNG DER
POPULATIONSVERDOPPLUNG ZUR BESTIMMUNG DER SENESZENZ 51
4.2.3.7 KRYOKONSERVIERUNG VON EUKARYOTISCHEN ZELLEN 52
4.2.3.8 DIFFERENZIERUNG 52
4.2.3.8.1 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNG VON HMSC
UND SAOS-2 52
4.2.3.8.2 ADIPOGENE DIFFERENZIERUNG VON HMSC 52
4.2.3.8.3 TRANSDIFFERENZIERUNG VON HMSC 53
4.2.3.9 ZYTOCHEMISCHE FAERBUNGEN 53
4.2.3.9.1 ALIZARIN ROT S-FAERBUNG 53
4.2.3.9.2 OELROT O-FAERBUNG 54
4.2.4 BIOCHEMISCHE METHODEN 54
4.2.4.1 GESAMTPROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD 54
4.2.4.2 BESTIMMUNG DER BIOLUMINESZENZ 54
4.2.4.3 BESTIMMUNG VON OXIDATIVEM STRESS 55
4.2.4.3.1 MESSUNG DER
GLUTATHIONPEROXIDASE (GPX) 55
4.2.4.3.2 MESSUNG DER
THIOREDOXIN REDUKTASE (TRXR) 55
4.2.4.4 UNTERSUCHUNG DER EXTRAKTE AUF DIE P16-PROMOTORAKTIVITAET 55
4.2.4.4.1 ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA IM PRAEPARATIVEM MASSSTAB 55
4.2.4.4.2 TRANSIENTE TRANSFEKTION 56
4.2.4.5 MECHANOTRANSDUKTION 57
5
ERGEBNISSE 59
5.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR TOXIKOLOGIE VON CIMICIFUGA RACEMOSA UND DEREN
AUFGEREINIGTER
SUBFRAKTIONEN 59
5.1.1
APOPTOSE- UND PROLIFERATIONSSTUDIEN IN VERSCHIEDENEN
ZELLEN UND
ZELLLINIEN
59
5.1.1.1 HUMANE MESENCHYMALE
STAMMZELLEN (HMSC) 59
5.1.1.2 PROSTATAKARZINOMZELLEN (LNCAP) 62
5.1.1.3 MAMMAKARZINOMZELLEN (MCF7 UND MDA-MB-231) 63
5.1.1.4 OSTEOSARKOMZELLEN (SAOS-2) 66
5.1.1.5 MURINE PRAEOSTEOBLASTAERE ZELLEN (MC3T3-EL) 67
5.1.1.6 MURINE OSTEOKLASTAERE ZELLEN (RAW264.7) 68
5.1.2 UNTERSUCHUNGEN ZUM EFFEKT VON
CIMICIFUGA RACEMOSA
AUF ANTIOXIDATIVE ENZYME..
69
5.1.2.1 GPX-AKTIVITAET 69
5.1.2.2 TRXR-AKTIVITAET 70
5.1.3 UNTERSUCHUNGEN ZUR SENESZENZ 72
5.1.3.1 BESTIMMUNG DER KUMULATIVEN POPULATIONSVERDOPPLUNG IN HMSC 72
5.1.3.2 GENEXPRESSIONSMUSTER VON P16
UND PSG5 WAEHREND
DER SENESZENZ 73
5.1.3.3 P16-PROMOTORANALYSEN MIT EXTRAKTEN VON CIMICIFUGA RACEMOSA 78
5.2 DIFFERENZIERUNGSSTUDIEN VON CIMICIFUGA RACEMOSA UND DEREN
AUFGEREINIGTER
SUBFRAKTIONEN AUF HMSC
UND SA
OS
-2-ZELLEN 79
5.2.1 TRANSDIFFERENZIERUNGSSTUDIEN IN HMSC. 79
5.2.2 ADIPOGENE DIFFERENZIERUNGSSTUDIEN IN HMSC 82
5.2.3 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNG 88
5.2.3.1 HMSC 88
5.2.3.2 SAOS-2-ZELLEN 94
5.3 UNTERSUCHUNGEN VON MECHANOSENSITIVITAET VON CIMICIFUGA RACEMOSA UND
DEREN
AUFGEREINIGTER SUBFRAKTIONEN AUF HMSC-TERT 100
5.3.1 HMSC-TERT-SP1 100
5.3.2 HMSC-TERT-AP1 102
5.4
MLKROARRAY-ANALYSEN VON CLMIFUGA RACEMOSA AUF
HMSC 105
5.4.1 COMPARISON-ANALYSE VON C001
AUF HMSC 105
5.4.1.1 TECHNISCHE EVALUIERUNG DER
COMPARISON-ANALYSE VON
C001
AUF HMSC 105
5.4.2
SAM-ANALYSE VON
C001/S AUFHMSC
108
5.4.2.1 TECHNISCHE EVALUIERUNG
DER SAM-ANALYSE VON
C001/S AUF HMSC 109
DISKUSSION ! 112
6.1 SAFETY VON CR 113
6.1.1 ZYTOTOXIZITAET VON CIMICIFUGA RACEMOSA 114
6.1.1.1 EXTRAKTE VON CR VERBESSERN DAS UEBERLEBEN VON
HMSC 114
6.1.1.2 CR-EXTRAKTE FUEHREN ZU EINEM VERBESSERTEN
UEBERLEBEN VON TUMORZELLLINIEN
UND SAPONINHALTIGE EXTRAKTE WIRKEN ANTI-PROLIFERATIV 116
6.1.1.3 CR-EXTRAKTE WIRKEN ANTI-APOPTOTISCH UND
PROLIFERATIONS-INDUZIEREND AUF
SAOS-2-ZELLEN 117
6.1.1.4 CR-EXTRAKTE WIRKEN ANTI-PROLIFERATIV AUF OSTEOBLASTAERE
MAUSZELLEN 118
6.1.1.5 C001
WIRKT ANTI-PROLIFERATIV AUF OSTEOKLASTAERE MAUSZELLEN 119
6.1.2 KEINE ANTIOXIDATIVE WIRKEIGENSCHAFTEN VON C001/S IN SAOS-2-ZELLEN
120
6.1.3
CR-EXTRAKTE HABEN KEINEN EINFLUSS AUF
DIE
SENESZENZ VON HMSC
120
6.2 DIFFERENZIERUNGSSTUDIEN MIT CR 122
6.2.1 TRANSDIFFERENZIERUNGSSTUDIEN 122
6.2.1.1 SAPONINHALTIGE EXTRAKTE VON CR INDUZIEREN OSTEOGENESE
VS. ADIPOGENESE IN
HMSC 123
6.2.2 ADIPOGENE DIFFERENZIERUNGSSTUDIEN MIT CR 124
6.2.2.1 R3 INDUZIERT ADIPOGENESE IN HMSC 125
6.2.2.2 SAPONINHALTIGE FRAKTIONEN INHIBIEREN DIE ADIPOGENESE VON HMSC
125
6.2.2.3 C001
HEMMT ADIPOGENESE IN HMSC 126
6.2.3 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNGSSTUDIEN MIT CR 127
6.2.3.1 R3 INDUZIERT OSTEOGENESE
IN HMSC 127
6.2.3.2 CR INDUZIERT GENEXPRESSION VON SOEST
IN HMSC 128
6.2.3.3 NETTOEFFEKTE VS. EFFEKTE DER SUBFRAKTIONEN WERDEN DEUTLICH
ANHAND DES
GENEXPRESSIONSPROFILS KNOCHENRELEVANTER GENE IN SAOS-2-ZELLEN 129
6.2.4 CR BEEINFLUSST NICHT DIE
ZELLULAERE MECHANOSENSITIVITAET 130
6.2.5 MIKROARRAY-ANALYSEN SIND
FUER VIELSTOFFGEMISCHE WIE CR NICHT GEEIGNET 131
6.2.6
ZUSAMMENFASSUNG
132
6.2.7 AUSBLICK 134
7 LITERATURVERZEICHNIS 136
8 ANHANG 148
8.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 148
8.2 TABELLENVERZEICHNIS 151
8.3 FORMELVERZEICHNIS 152
8.4 PUBLIKATIONEN UND KONGRESSBEITRAEGE 153
8.5 DANKSAGUNG 155
|
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