Die Mechanismen der kompensatorischen renalen Hypertrophie:
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2012
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 7
1.1 AUFBAU UND FUNKTION DER NIERE 7
1.1.1 DIE FILTRATION DES PRIMAERHARNS 7
1.1.2 AUFBAU UND TRANSPORTMECHANISMEN DES PROXIMALEN TUBULUS 9
1.2 DIE KOMPENSATORISCHE RENALE HYPERTROPHIE 11
1.3 DIE NATRIURETISCHEN PEPTIDE 15
1.3.1 SYNTHESE DES ATRIALEN NATRIURETISCHEN PEPTIDS 15
1.3.2 SYNTHESE DES B-TYP NATRIURETISCHEN PEPTIDS 16
1.3.3 DER NPR-A UND DIE BILDUNG DES SECOND MESSENGERS CGMP 17
1.3.4 REGULATION UND PHYSIOLOGISCHE WIRKUNGSMECHANISMEN 18
1.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 22
2. METHODEN 24
2.1 TIERHALTUNG 24
2.2 UNILATERALE NEPHREKTOMIE 24
2.3 BNP-INFUSION MITTELS OSMOTISCHER MINIPUMPE 25
2.4 UNTERSUCHUNG KLINISCHER PARAMETER 26
2.4.1 URINANALYSE 26
2.4.2 PLASMAKONZENTRATIONSBESTIMMUNG DER NATRIURETISCHEN PEPTIDE 26
2.4.3 BESTIMMUNG DER GLOMERULAEREN FILTRATIONSRATE 27
2.4.4 MESSUNG DES BLUTDRUCKES UND DER HERZFREQUENZ 28
2.5 UNTERSUCHUNG DER ENTNOMMENEN ORGANE 28
2.5.1 BESTIMMUNG DER PROTEIN- UND DNA-KONZENTRATION 28
2.5.2 ISOLIERUNG DER GESAMT-RNA 29
2.5.3 REVERSE TRANSKRIPTION DER RNA (RT-PCR) 29
2.5.4 QUANTITATIVE POLYMERASE KETTENREAKTION (QPCR) 29
2.5.5 WESTERN IMMUNOBLOTTING 30
2.5.6 IMMUNHISTOCHEMISCHE FLUORESZENZFAERBUNG 30
2.6 ISOLIERT PERFUNDIERTE NIERE 31
2.7 IN VITRO -EXPERIMENTE 32
2.7.1 ZELLPRAEPARATION UND-KULTIVIERUNG 32
2.7.2 SUPERFUSION PROXIMALER TUBULUSZELLEN 33
2.7.3 STIMULATION DER PROXIMALEN TUBULUSZELLEN 33
2.7.4 BESTIMMUNG DER PROTEIN- UND DNA-KONZENTRATION 34
2.7.5 BESTIMMUNG DES ZELLVOIUMENS 34
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2.7.6 IMMUNHISTOCHEMISCHE FLUORESZENZFAERBUNG 35
3. ERGEBNISSE 36
3.1 ENTWICKLUNG DER KOMPENSATORISCHEN RENALEN HYPERTROPHIE BEI 36
WILDTYPMAEUSEN NACH UNILATERALER NEPHREKTOMIE
3.1.1 DIURESE UND NATRIURESE NACH UNINEPHREKTOMIE 36
3.1.2 PLASMAKONZENTRATION DER KARDIALEN NATRIURETISCHEN PEPTIDE 37
3.1.3 UNTERSUCHUNG DER ENTNOMMENEN ORGANE 38
3.1.3.1 GENEXPRESSION DER NATRIURETISCHEN PEPTIDE UND IHRE REZEPTOREN 39
3.1.3.2 PROTEINANALYSE 40
3.2 DIE KOMPENSATORISCHE RENALE HYPERTROPHIE BEI GUANYLATZYKLASE-A 41
KNOCKOUTMAEUSEN
3.2.1 DER PHAENOTYP DER GC-A KNOCKOUTMAEUSE IM VERGLEICH ZU IHREN 42
WILDTYPGESCHWISTERN
3.2.2 DIE FUNKTIONELLE ANPASSUNG DER VERBLEIBENDEN NIERE BEI GC-A 43
KNOCKOUTMAEUSEN
3.2.3 DAS KOMPENSATORISCHE NIERENWACHSTUM BEI GC-A KNOCKOUTMAEUSEN 45
3.2.4 BESTIMMUNG DER ZELLFLAECHE VON PROXIMALEN TUBULI NACH
UNINEPHREKTOMIE 47
3.3 DIE KOMPENSATORISCHE RENALE HYPERTROPHIE BEI ANP KNOCKOUTMAEUSEN 49
3.4 DIE WIRKUNG DES BNPS AUF DIE FUNKTION UND DAS WACHSTUM DER NIEREN 52
3.5 DIE WIRKUNG DES BNPS AUF DIE NIERENFUNKTION AM MODELL DER *ISOLIERT
54
PERFUNDIERTEN NIERE
3.6 IN VITRO
- UNTERSUCHUNGEN 56
3.6.1 CHARAKTERISIERUNG DER VERWENDETEN ZELLMODELLE 56
3.6.2 SUPERFUSION VON PROXIMALEN TUBULUSZELLEN 58
3.6.2.1 SUPERFUSION ANDERER NIERENZELLEN 61
3.6.2.2 DIE BETEILIGUNG VERSCHIEDENER TRANSPORTPROTEINE DES PROXIMALEN
62
TUBULUS
3.6.2.3 DER MTOR SIGNALWEG 64
3.6.2.4 DIE ROLLE DES TRANSFORMING GROWTH FACTORS SS 65
3.6.2.5 TRANSFER DES KONDITIONIERTEN MEDIUMS 66
3.6.3 DIREKTER EFFEKT NATRIURETISCHER PEPTIDE AUF DIE HYPERTROPHIE DES
67
PROXIMALEN TUBULUS
4. DISKUSSION 69
5. ZUSAMMENFASSUNG 80
6. LITERATURVERZEICHNIS 82
7. ANHANG 90
7.1 VERWENDETE MATERIALIEN 90
7.1.1 DIE VERSUCHSTIERE 90
7.1.2 DIE ZELLEN 90
7.1.3 DIE PUFFER UND LOESUNGEN 91
7.1.3.1 ISOLIERUNG PROXIMALER TUBULUSZELLEN 91
7.1.3.2 WESTERN IMMUNOBLOTTING 92
7.1.3.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE FLUORESZENZFAERBUNG 92
7.1.4 DIE OLIGONUKLEOTIDE 93
7.1.5 INTERNETDIENSTE UND SOFTWARE 93
7.2 ABKUERZUNGEN 94
7.3 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 96
7.4 DANKSAGUNG 98
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