Über den Mechanismus des Ribosomenabbaus von Kaninchenretikulozyten in vitro: Nachweis u. Charakterisierg e. ribosomalen alkal. RNase
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Berlin
1969
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INHALT
SVERZEICHNIS
SEIT
1
O
EINLEITUNG
1
11.
PROBLEMSTELLUNG
1
1
O
2,
HISTORISCHE
VORBEMERKUNG
2
1O3O
BIOCHEMISCHE
GRUNDLAGEN
DER
DIFFERENZIERUNG
UND
REIFUNG
4
13
E
1O
PRINZIPIEN
DER
STEUERUNG
UND
REGELUNG
AUF*
ZELLULAERER
EBENE
5
1
A
3 2
0
DIE
CRGANDIFFERENZIERUNG
DES
ERYTHROIDEN
SYSTEMS
6
1
O
.3
E
3
A
DIE
VERAENDERUNGEN
DER
SYNTHESELEISTUNGEN
WAEHREND
DER
DIFFERENZIERUNG
7
1*3O3 1
O
DER
DKS-STOFFWECHSEL
7
1
O
3O3 2
O
RES
UND
PROTEINSTOFFWECHSEL
10
14.
EUKLEAEEN
14
1O41
EINTEILUNG
UND
.SPEZIFITAET
VON
RL.ASEN
14
1
O
4O2
ZUM
PROBLEM
DER
LOKALISATION
16
1O5
RIBOSOMEN
17
1
U
5O1O
PHYSIKALISCH-CHEMISCHE
DATEN
3
CHEMISCHE
ZUSAMMENSETZUNG
STRUKTUR
UND
INTRAZELLU
LAER
LOKALISATION
DER
RIBOSOMEN
VON
KANINCHENRETIKULOZYTEN
1?
15
*2
RIBOSOMALE
RES
19
1
O
53*
DAS
RIBOSOMALE
PROTEIN
21
1O5O4O
DIE
STRUKTURELLEN
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
RRIJS
UND
RPROTEIN
22
155O
SYNTHESE
RIBOSOMALER
PARTIKEL
23
1O55
O
1
SYNTHESE
RIBOSOMALER
RES
23
1O5
O
52
A
SYNTHESE
RIBOSOMALER
PROTEINE
24
1O5A6
A
DIE
ROLLE
DER
RIBOSOMEN
IN
DER
PROTEINSYNTHESE
26
1 57
DIE
ABBAUPROZESSE
DER
RRES
BEI
DER
REIFUNG
DER
RETIKULOZYTEN
29
2
UATARIAL
UND
LLETHODEN
30
2.1.
ZEILEN
30
2.1.1.
AUSLOESUNG
EINER
ANAEMIE
30
2.1.2.
ZELLGEWINNUNG
30
2.1.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZCLLPOPULATION
'
31
2.2.
ZELLFRAKTIONEN
32
2.2.1.
ZERSTOERUNG
DER
INTEGRITAET
DER
ZELLEN
32
2.2.2.
FRAKTIONIERUNG
32
2.221.
ALLGEMEINE
PRINZIPIEN
32
2.2.2.2.
DIFFERENTIALZENTRIFUGATION
33
2.2.2.3.
DIEHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION
33
2.3.
RPROTEIN
UND
RRL'S
34
2.4.
GEWINNUNG
DER
PHOSPHATHALTIGEN
FRAKTIONEN
35
2.5.
PHOTOMEIRISCHE
BESTIMMUNGEN
35
2.5.1.
PHOSPHAT
35
2.5.2
PROTEIN
36
2.5.3.
36
2.5.4.
OS
37'
2.6.
ENZYMBESTIMMUNGEN
38
2.6.1.
RHASE
38
2.6.2.
PHOSPHATASEN
39
2.6.3.
ATPASE
39
2.7.
BESTIMMUNG
DER
SEDIMENTATIONSKONSTANTEN
VON
39
RIBOSOMALEN
PARTIKELN
UND
RRTS
2.8.
CHROMAT
OGRAPHIE
40
3.
ERGEBNISSE
41
3.1.
DIE
SUBZELLULAERE
RLLS-VERTEILUNG
IN
41
RETIKULOZYTENHAEMOLYAATEN
3.2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
RETIKULOZYTENRIBOSOMEN
42
3.2.1.
DER
NACHWEIS
FREIER
RIBOSOMEN
42
3.2.2.
PROTEINGEHALT
DER
RIBOSOMEN
43
3
9
2 3
UELG-GEHALT
DER
RIBOSOMEN
43
3O24O
DAS
SEDIMENTATIONSVERHALTEN
DER
RIBOSOMEN
43
3 2O5
DER
EINFLUSS
VERSCHIEDENER
HAEMOLYSE
BEDINGUNGEN
44
3O2
A
6
O
REINHEITSKRITERIEN
DER
RIBOSOMENPRAEPARATIONEN
45
3O3
EINFLUSS
DES
LAG
UND
DER
EINWERTIGEN
KATIONEN
AUF
DIE
STRUKTUR
DER
RIBOSOMEN
46
3
4.
ENZYMAKTIVITAET
IN
RETIKULOZYTENRIBOSOMEN
49
3O41O
NACHWEIS
VON
RNASE-AKTIVITGT
BEI
PH
7
9
5
49
342
O
PHOSPHATABSPALTUNG
AUS
UONONUKLEOTIDEN
49
3O5O
RES
GEHA.LT
UND
RNASE-AKTIVITAET
IN
REIFENDEN
ROTEN
BLUTZELLEN
50
36E
ABLOESUNG
RIBOSOMALEN
PROTEINS
UND
LOESLICH
MACHUNG
DER
ALKALISCHEN
RIBOSOMALEN
REASE
51
3O7.
CHARAKTERISIERUNG
DER
RIBOSOMALEN
ALKALISCHEN
RLLASE
52
3
VELO
PH-ABHAENGIGKEIT
DES
RRNS-ABBAUS
52
3
O
7O2.
AKTIVIERUNG
UND
HEMMUNG
DER
ALKALISCHEN
REASE
DURCH
EINWERTIGE
KATIONEN
53
37O3O
TEMPERATURABHAENGIGKEIT
DES
RRNS-ABBAUS
54
3O7O4O
RRNS-ABBAU
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
RIBOSOMEN
UND
RPROTEIN-KONZENTRATION
54
3O75O
ZEITABHAENGIGKEIT
DES
RRES-ABBAUS
55
37O6
O
EINFLUSS
VON
MG
'
W
'
AUF
DEN
RRIIS-ABBAU
IN
DEN
RIBOSOMEN
UND
IM
REKONSTRUIERTEN
SYSTEM
55
3O7C7
EINFLUSS
DER
LUG^-KOMPLEXBILDNER
ATP
UND
AEDTA
AUF
DIE
REASE-AKTIVITAET
IM
RIBOSOM
56
3.8.
SPEZIFITAET
DER
ALKALISCHEN
RNASE
57
308.I0
NACHWEIS
DES
ENDONUKLEASETYPS
57
3O8O2
IDENTIFIZIERUNG
DER
GESPALTENEN
PHOSPHAT
ESTERBINDUNG
58
308.3
NACHWEIS
DER
BASENSPEZIFITAET
DES
ENZYMS
58
3
O
8 ,3O1.
BASENZUSAMMENSETZUNG
DER
ITONONUKLEOTIDFRAKTION
58
3O8
O
3O2A
BASENZUSAMMENSETZUNG
DER
EUKLEOSIDFRAKTION
58
39O
VERSUCH
ZUR
INTRARIBOSOMALEN
LOKALISATION
DER
ALKALISCHEN
RLLASE
60
4.
DISKUSSION
61
4.1
ABBAU
DER
RETIKULOZYTENRIBOSOMEN
61
4.1.1.
ALTERUNG
VON
POLYSOMEN
UND
RIBOSOMEN
61
4.1.2.
HYPOTHESE
UEBER
DEN
RIBOSOMENABBAU
63
4.2.
DIE
REIFUNGSABHAENGIGEN
VERAENDERUNGEN
DES
RKS-GEHALTS
DER
SUBZELLULAEREN
FRAKTIONEN
64
4.3.
DIE
HETEROGENITAET
DER
RETIKULOZYTENPOPULATION
UND
IHRE
MOEGLICHEN
AUSWIRKUNGEN
AUF
REASE
AKTIVITAET
UND
RIBOSOMENABBAU
66
4.4.
RIBOSOMENSTRUKTUR
UND
RJIASE-AKTIVITAET
68
4.4.1.
WIE
ERKLAERT
SICH
DER
EINFLUSS
DER
LONENSTAERKE
AUF
DAS
SEDIMENTATIONSVERHALTEN
DER
RIBOSO
MALEN
PARTIKEL?
69
4.4.2.
WIE
ERKLAEREN
SICH
DIE
STUFENWEISEN
UEBERGAENGE
IN
DEN
STRUKTURVERAENDERUNGEN
DER
RIBOSOMALEN
UNTER
EINHEITEN?
70
4.4.3.
ABLOESUNG
RIBOSOMALEN
PROTEINS
71
4.4.4
ZUM
PROBLEM
DER
LOKALISATION
DER
ALKALISCHEN
REASE
73
4.4.5.
WARUM
SIND
RHASE-AKTIVIERUNG
U.
STRUKTURVERAEN
DERUNGEN
DER
RIBOSOMEN
UNABHAENGIGE
PROZESSE?
74
4.5.
DIE
RHASEN
DER
ROTEN
BLUTZELLEN
74
4.6.
DIE
BIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
REASEN
DES
RETIKULOZYTEN
76
4.7.
EIGENSCHAFTEN
DER
ALKALISCHEN
RHASE
AUS
RETIKULOZYTEN
78
4.7.1.
AKTIVIERUNG
UND
HEMMUNG
DURCH
EINWERTIGE
KATIONEN
78
4.7.2.
EINFLUSS
VON
MG
++
IONEN
79
4.7.3.
SPEZIFITAET
DER
ALKALISCHEN
RHASE
81
4.8.
DER
MECHANISMUS
DER
SPALTUNG
DER
RRXIS
84
4.9.
ZUR
PROBLEMATIK
DER
INTRAZELLULAEREN
REGULATION
DER
AKTIVITAET
DER
ALKALISCHEN
REAESE
87
4.9.1.
DIE
BEDEUTUNG
DER
EIN
UND
ZWEIWERTIGEN
KATIONEN
87
4.9.2.
METABOLISCHE
FAKTOREN
S
DIE
DEN
ABBAU
DER
RLS
BEEINFLUSSEN
KOENNEN
90
4.9.3.
ALKALISCHE
RHASE-AKTIVITAET
IN
DER
ZELLREIFUNG
91
5
YY
ZUSAMMENFASSUNG
93
6.
LITERATURVERZEICHNIS
95
7.
ABBILDUNGEN
118
8
TABELLEN
151
9
SCHEMATA
175 |
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