Luteolin verursacht globale Veränderungen im Transkriptom von Mikroglia und führt zu einem anti-inflammatorischen, neuroprotektiven Phänotyp:
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2013
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6
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG
1.1 WELTWEITE BEDEUTUNG VON NEURODEGENERATIVEN ERKRANKUNGEN 8
1.2 DIE ROLLE VON MIKROGLIA BEI NEURODEGENERATIVEN ERKRANKUNGEN 8
1.3 BEKANNTE EFFEKTE VON LUTEOLIN AUF MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN 9
1.4 STUDIENZIELE 10
2 MATERIAL UND METHODEN
2.1 REAGENZIEN 11
2.2 TIERE 11
2.3 ZELLKULTUR
2.3.1 BV-2-ZELLLINIE 11
2.3.2 MIKROGLIA AUS MAEUSEGEHIRN 12
2.3.3 661W-PHOTOREZEPTORZELLLINIE 12
2.4 PHALLOIDIN-FAERBUNG 12
2.5 STICKSTOFFMONOXID-MESSUNG 13
2.6 APOPTOSE-UNTERSUCHUNG 14
2.7 RNA-ISALIERUNG UND REVERSE TRANSKRIPTION 14
2.8 DNA-MICROARRAY-ANALYSE 14
2.9 ANALYSE DER MICROARRAY-DATEN 15
2.10 QUANTITATIVE REAL-TIME RT-PCR 15
2.11 GELELEKTROPHORESE UND WESTERN BLOTS 19
2.12 SOFTWARE 20
3 ERGEBNISSE
3.1 EFFEKT VON LUTEOLIN AUF VIER AUSGEWAEHLTE PRO-INFLAMMATORISCHE MARKER
21
3.2 GLOBALE VERAENDERUNGEN DER TRANSKRIPTION IN MIKROGLIA DURCH LUTEOLIN.
22
3.3 REGULATION WICHTIGER IMMUNREGULATORISCHER SIGNALWEGE UND VERAENDERUNG
DES TRANSKRIPTORISCHEN PHAENOTYPS VON MIKROGLIA DURCH LUTEOLIN 23
3.4 VALIDIERUNG DER MICROARRAY-DATEN MITTELS QRT-PCR
3.4.1 AUSWAHL DER ZU VALIDIERENDEN GENE 26
3.4.2 INDUKTION ANTI-OXIDATIVER SIGNALWEGE DURCH LUTEOLIN 27
3.4.3 INDUKTION ANTI-INFLAMMATORISCHER SIGNALWEGE UND PHAGOZYTOSE DURCH
LUTEOLIN... 28
3.4.4 VERMINDERUNG DER PRO-INFLAMMATORISCHEN AKTIVIERUNG UND DER
AKUTEPHASE-REAKTION DURCH LUTEOLIN 30
3.4.5 INHIBITION PRO-APOPTOTISCHER SIGNALWEGE UND VERMINDERUNG VON GENEN
DER DERAMIFIZIERUNG DURCH LUTEOLIN 34
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IMAGE 2
7
3.5 REDUKTION DER MENGE AN ENZYMATISCH AKTIVEN SPALTPRODUKTEN DES
KOMPLEMENTFAKTORS B DURCH LUTEOLIN 36
3.6 AENDERUNG DER MORPHOLOGIE IN MIKROGLIA UND INHIBITION DER
NO-SEKRETION
DURCH LUTEOLIN 38
3.7 VERMINDERUNG DER NEUROTOXIZITAET AUF PHOTOREZEPTOREN DURCH LUTEOLIN
40
4 DISKUSSION
4.1 GLOBALE VERAENDERUNG DES TRANSKRIPTOMS VON MIKROGLIA DURCH LUTEOLIN
42
4.2 VERSTAERKTE ANTI-OXIDATIVE WIRKUNG VON LUTEOLIN IN DER BV-2-ZELLLINIE
42
4.3 ERHOEHUNG DER PHAGOZYTOSEAKTIVITAET VON MIKROGLIA DURCH LUTEOLIN 43
4.4 ENTFACHUNG ANTI-INFLAMMATORISCHER WIRKUNG VON LUTEOLIN AUCH UEBER
NFKBUNABHAENGIGE SIGNALWEGE 43
4.5 SENSIBILISIERUNG PRIMAERER MIKROGLIA GEGENUEBER APOPTOSE DURCH
LUTEOLIN 44
4.6 INDUKTION MORPHOLOGISCHER VERAENDERUNGEN IN MIKROGLIA DURCH LUTEOLIN
44
4.7 PROTEKTION VON PHOTOREZEPTORZELLEN VOR LPS-INDUZIERTER
MIKROGLIA-TOXIZITAET
DURCH LUTEOLIN 45
5 ZUSAMMENFASSUNG 46
6 LITERATURVERZEICHNIS 47
7 ANHANG
7.1 PUBLIKATION 55
7.2 DANKSAGUNG 56
7.3 LEBENSLAUF 57
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