Untersuchungen zur Differenzierung equiner, adipogener, mesenchymaler Stammzellen zu Tenozyten:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Giessen
DVG Service
2013
|
| Ausgabe: | 1. Aufl. |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 155 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 9783863451622 |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 9
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 1 3
1. EINLEITUNG 1 5
1.1. VERLETZUNGEN D E R S E H N E N BEIM PFERD 1 5
1.2. AULBAU EINER S E H N E 17
1.3. SEHNENHEILUNG 1 9
1.4. STAMMZELLEN 2 0
1.5. GROWTH A N D DIFFERENTIATION FACTORS (GDFS) 5 , 6 UND 7 2 2
2. LITERATURUEBERSICHT UND ZIELSETZUNG DER ARBEIT 2 3
2.1. LITERATURUEBERSICHT 2 3
2.2. ZIELSETZUNG 2 5
3. MATERIAL UND METHODEN 2 7
3.1. ZELLKULTUR 2 7
3.1.1. ISOLATION D E R STAMMZELLEN A U S FETTGEWEBE 2 7
3.1.2. KULTIVIERUNG D E R ZELLEN 2 8
3.1.3. VERSUCHSZELLGRUPPEN 3 0
3.2. STAMMZELLNACHWEIS 3 0
3.2.1. CHONDROGENE DIFFERENZIERUNG 3 0
3.2.2. O S T E O G E N E DIFFERENZIERUNG 3 2
3.2.3. ADIPOGENE DIFFERENZIERUNG 3 3
3.2.4. NACHWEIS VON STAMMZELLMARKERN 3 4
5
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IMAGE 2
3.3. T E N O G E N E DIFFERENZIERUNG IM PELLET MIT GDF5, GDF6 UND GDF7 3
4
3.3.1. REKONSTITUTION VON GDF5, GDF6 UND GDF7 3 5
3.3.2. DIFFERENZIERUNGSMEDIUM 3 6
3.3.3. ANFERTIGEN D E R PELLETS 3 7
3.3.4. KULTIVIERUNGSSCHEMA 3 7
3.4. KOLLAGENGEL 3 8
3.5. VITALITAETSUNTERSUCHUNGEN D E R ZELLEN IM KOLLAGENGEL 3 8
3.5.1. AUSWANDERUNGSVERSUCH 3 8
3.5.2. PROZENTZAHL D E R LEBENDEN ZELLEN 3 8
3.5.3. ENTWICKLUNG D E R GESAMTZELLZAHL 3 9
3.6. T E N O G E N E DIFFERENZIERUNG IM KOLLAGENGEL MIT GDF5, GDF6 UND
MECHANISCHER
STIMULATION 3 9
3.6.1. DEHNUNGSAPPARATUR 4 0
3.6.2. BEFESTIGUNG D E S GELS 4 1
3.6.3. DIFFERENZIERUNGSMEDIUM 4 2
3.6.4. VERSUCHSABLAUF 4 2
3.7. HISTOLOGISCHE FAERBUNGEN 4 5
3.7.1. HAEMATOXILIN-EOSIN-FAERBUNG A N KRYOSTATSCHNITTEN 4 5
3.7.2. HAEMATOXILIN-EOSIN-FAERBUNG A N PARAFFINSCHNITTEN 4 5
3.7.3. HAEMATOXILIN-EOSIN-FAERBUNG A N ZELLEN IM WELL 4 6
3.7.4. ALCIANBLAU-FAERBUNG A N PARAFFINSCHNITTEN 4 6
3.7.5. OIL-RED-O-FAERBUNG A N ZELLEN IM WELL 4 7
3.7.6. VON-KOSSA-FAERBUNG A N ZELLEN IM WELL 4 8
3.7.7. TRICHROMFAERBUNG NACH C A S O N A N PARAFFINSCHNITTEN 4 9
3.7.8. FAERBUNG NACH PASINI MODIFIZIERT NACH WALTER A N PARAFFINSCHNITTEN
5 0
3.8. IMMUNHISTOCHEMIE 5 1
3.9. ELEKTRONENMIKROSKOPIE 5 5
3.9.1. FIXIERUNG 5 5
6
IMAGE 3
3.9.2. EINBETTUNG 5 6
3.9.3. SEMIDUENNSCHNITTE 5 6
3.9.4. ULTRADUENNSCHNITTE & ELEKTRONENMIKROSKOPIE 5 7
3.10. UNTERSUCHUNGEN A U F MRNA-EBENE 5 7
3.10.1. GEWINNUNG VON COPYDNA 5 7
3.10.2. POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR - POLYMERASE CHAIN REACTION) 6 2
3.11. REAL-TIME P C R 6 4
3.12. STATISTISCHE AUSWERTUNGEN 6 8
4. ERGEBNISSE 6 9
4.1. STAMMZELLNACHWEIS 6 9
4.1.1. PLASTIKADHAERENZ UND MORPHOLOGIE 6 9
4.1.2. PLURIPOTENZ 7 0
4.1.3. NACHWEIS VON STAMMZELLMARKERN 7 5
4.2. T E N O G E N E DIFFERENZIERUNG IN D E R PELLETKULTUR 7 6
4.2.1. HE-FAERBUNG 7 6
4.2.2. IMMUNHISTOCHEMIE KOLLAGEN I UND KOLLAGEN III 7 8
4.2.3. ULTRASTRUKTURELLE BETRACHTUNG MIT HILFE D E S
ELEKTRONENMIKROSKOPS 7 9
4.2.4. RT-PCR FUER TENOMODULIN UND KOLLAGEN II 81
4.2.5. QUANTITATIVE REAL-TIME P C R 81
4.3. TENOGENE DIFFERENZIERUNG IM KOLLAGENGEL 8 3
4.3.1. VITALITAETSUNTERSUCHUNG D E R ZELLEN IM GEL 8 3
4.3.2. HE-FAERBUNG D E R KOLLAGENGELE 8 6
4.3.3. FAERBUNGEN NACH C A S O N UND PASINI 8 8
4.3.4. IMMUNHISTOCHEMIE MIT ANTIKOERPER FUER KOLLAGEN III 9 3
4.3.5. ULTRASTRUKTURELLE BETRACHTUNG MIT D E M ELEKTRONENMIKROSKOP 9 5
4.3.6. RT-PCR FUER TENOMODULIN UND KOLLAGEN II 9 7
4.3.7. QUANTITATIVE REAL-TIME P C R 9 7
7
IMAGE 4
4.4. PELLETKULTUR - KOLLAGENGELKULTUR: WERTE D E R Q P C R IM VERGLEICH
9 9
5. DISKUSSION 101
5.1. KRITIK D E R METHODE 101
5.2. DISKUSSION D E R ERGEBNISSE 107
5.2.1. NACHWEIS D E S STAMMZELLCHARAKTERS 107
5.2.2. T E N O G E N E DIFFERENZIERUNG IN EINER PELLETKULTUR 108
5.2.3. T E N O G E N E DIFFERENZIERUNG IN EINER KOLLAGENGELMATRIX 111
5.3. AUSBLICK 114
6. ZUSAMMENFASSUNG 116
7. SUMMARY 120
8. LITERATURVERZEICHNIS 1 2 3
9. ANHANG 1 3 4
9.1. UEBERSICHT D E R VERWENDETEN PRIMER 1 3 4
9.2. DATEN D E R REALTIME PCR- TABELLARISCH 1 3 5
9.3. GEBRAUCHS- UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 139
9.3.1. GEBRAUCHSMATERIALIEN 139
9.3.2. CHEMIKALIEN 140
9.3.3. VERBRAUCHSMATERIALIEN 146
9.4. GERAETE 1 4 8
9.5. SOFTWARE UND INTERNET 1 5 3
10. DANKSAGUNG 154
11. ERKLAERUNG 1 5 5
8
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