Untersuchungen zur pathophysiologischen Bedeutung muskarinerger Acetylcholinrezeptoren in Dystonie-Modellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
Mensch und Buch Verl.
2013
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| Online-Zugang: | kostenfrei Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Nebentitel: Examinations on the pathophysiological role of muscarinic acetylcholine receptors in models of dystonia |
| Beschreibung: | V, 270 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALT
I. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS I
1. EINLEITUNG 1
2. LITERATURUEBERSICHT 4
2.1. DIE BASALGANGLIEN: PHYSIOLOGISCHE FUNKTIONEN UND
PATHOPHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG FUER DIE DYSTONIE 4
2.1.1. NEUROANATOMIE DER BASALGANGLIEN UND IHRE BEDEUTUNG FUER DIE
MOTORIK 4
2.1.2. NERVENZELLEN DES STRIATUMS 7
2.1.2.1. STRIATALE PROJEKTIONSNEURONE (MSNS) 7
2.1.2.2. STRIATALE INTERNEURONE 8
2.2. DAS CHOLINERGE NEUROTRANSMITTERSYSTEM 10
2.2.1. PHYSIOLOGISCHE UND PATHOPHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG VON ACETYLCHOLIN
10
2.2.2. DAS CHOLINERGE SYSTEM INNERHALB DER BASALGANGLIEN 13
2.2.3. ACETYLCHOLINREZEPTOREN 15
2.2.3.1. NIKOTINERGE ACH-REZEPTOREN 15
2.2.3.2. MUSKARINERGE ACH-REZEPTOREN 16
2.2.4. ALLOSTERISCHE MODULATION 20
2.3. DYSTOENIEN 22
2.3.1. DEFINITION UND BEDEUTUNG 22
2.3.2. EINTEILUNG UND GENETIK DER DYSTONIE . .23
2.3.2.1. DIE EARLY-ONSET-TORSIONSDYSTONIE (TD) 27
2.3.3. PATHOPHYSIOLOGIE PRIMAERER DYSTOENIEN 29
2.3.3.1. BEDEUTUNG DES TORSINA FUER DIE EARLY-ONSET-TD 31
2.3.4. THERAPIE DER PRIMAEREN DYSTOENIEN 33
2.3.4.1. MEDIKAMENTOESE THERAPIEN 33
2.3.4.2. OPERATIVE THERAPIEN 35
2.4. TIERMODELLE FUER PRIMAERE DYSTOENIEN 36
2.4.1. PHAENOTYPISCHE TIERMODELLE 37
2.4.1.1. DER DF Z-HAMSTER 38
2.4.1.1.1. KLINISCHES ERSCHEINUNGSBILD 39
2.4.1.1.2. BEFUNDE ZUR NEUROPATHOLOGIE SOWIE ZUR NEURONALEN AKTIVITAET
BEI
DER DF Z-MUTANTE 40
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
2.4.1.1.3. NEUROCHEMISCHE UND NEUROPHARMAKOLOGISCHE BEFUNDE BEIM DF-
HAMSTER 42
2.4.2. AETIOLOGISCHE TIERMODELLE: DAS DYT1-MAUSMODELL 44
2.5. FRAGESTELLUNG DER VORLIEGENDEN ARBEIT 50
2.5.1. ZIELSTELLUNG UND ARBEITSHYPOTHESE 50
2.5.2. UNTERSUCHUNGEN IM CFF^-HAMSTER 51
2.5.2.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATIONEN VON MACHR 51
2.5.2.2. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN VON MACHR 55
2.5.3. UNTERSUCHUNG IN DER DYT1-MAUS 55
2.5.3.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATIONEN VON MACHR 56
2.5.3.2. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNG VON STRIATALEN CHOLINERGEN
INTERNEURONEN UND WESTERNBLOT-ANALYSEN ZUR EXPRESSION DER
CHOLINACETYLTRANSFERASE IN VERSCHIEDENEN GEHIRNSTRUKTUREN 57
3. MATERIAL UND METHODEN 60
3.1. MATERIAL 60
3.1.1. VERSUCHSTIERE 60
3.1.1.1. CAE^-HAMSTERMUTANTE 60
3.1.1.2. DYT1-MAUSMODELL 60
3.1.2. HALTUNG UND FUETTERUNG 61
3.1.2.1. DF^-HAMSTER 61
3.1.2.2. DYT1-MAUS 61
3.1.2.3. VERSUCHSTIERE POST OPERATIONEM 61
3.1.3. VERWENDETE SUBSTANZEN UND GERAETE 62
3.2. METHODEN 64
3.2.1. DF Z-HAMSTER 64
3.2.1.1. INDUKTION UND BEURTEILUNG DER PAROXYSMALEN DYSTONIE 64
3.2.1.2. SYSTEMISCHE PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION VON MACHR 68
3.2.1.2.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE INTRAPERITONEALE APPLIKATION 68
3.2.1.2.2. CHRONISCHER VERSUCH UEBER EINEN ZEITRAUM VON 21 TAGEN 68
3.2.1.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON STOFFEN MIT WIRKUNG AUF MACHR 69
3.2.1.3.1. STEREOTAKTISCHE IMPLANTATION DER FUEHRUNGSKANUELEN 69
3.2.1.3.2. MIKROINJEKTIONSTECHNIK 71
3.2.1.3.3. PERFUSION UND HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN ZUR BESTIMMUNG DER
LOKALISATION DER FUEHRUNGSKANUELEN 72
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.1.4. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE ANALYSE DER MACHR-SUBTYPEN M1 UND
M2/M4 74
3.2.2. DYT1-MAUS 75
3.2.2.1. GENOTYPISIERUNG 75
3.2.2.2. UNTERSUCHUNGEN ZUR VITALITAET UND MOTORIK 76
3.2.2.3. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION VON MACHR IM DYT1-MAUSMODELL 81
3.2.2.3.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE INTRAPERITONEALE APPLIKATION 82
3.2.2.3.2. CHRONISCHER VERSUCH UEBER EINEN ZEITRAUM VON 21 TAGEN 83
3.2.2.4. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN 84
3.2.2.4.1. STEREOTAKTISCHE IMPLANTATION DER FUEHRUNGSKANUELEN 84
3.2.2.4.2. MIKROINJEKTIONSTECHNIK 84
3.2.2.4.3. PERFUSION UND HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN ZUR BESTIMMUNG DER
LOKALISATION DER FUEHRUNGSKANUELEN 84
3.2.2.5. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNG STRIATALER CHOLINERGER
INTERNEURONE
BEI DYT1-MAEUSEN 85
3.2.2.6. WESTERNBLOT-ANALYSE DER CHOLINACETYLTRANSFERASE 88
3.3. STATISTISCHE VERSUCHSAUSWERTUNG 92
3.3.1. UNTERSUCHUNGEN IM CTF^-HAMSTER 92
3.3.1.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATIONEN BEIM DF Z-HAMSTER 92
3.3.1.2. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN IM DF
Z-HAMSTERMODELL 93
3.3.2. UNTERSUCHUNGEN IM DYT1-MAUSMODELL 93
3.3.2.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATIONEN IM DYT1-MAUSMODELL 93
3.3.2.2. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 94
4. ERGEBNISSE 95
4.1. CFT^-HAMSTER 95
4.1.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION VON MACHR IM CFF^-HAMSTER 95
4.1.1.1. SYSTEMISCH AKUTER VERSUCH 96
4.1.1.1.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON TROPICAMID IN
KOMBINATION
MIT TRIHEXYPHENIDYL 97
4.1.1.1.2. EINMALIGE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PIRENZEPIN 98
4.1.1.2. SYSTEMISCH CHRONISCHER VERSUCH UEBER EINEN ZEITRAUM VON 21 TAGEN
100
4.1.1.2.1. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON TRIHEXYPHENIDYL 100
4.1.1.2.2. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON TROPICAMID UND
TRIHEXYPHENIDYL 102
4.1.1.2.3. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PIRENZEPIN 105
IMAGE 4
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.1.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN 107
4.1.1.3.1. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON TRIHEXYPHENIDYL 107
4.1.1.3.2. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON TROPICAMID UND TRIHEXYPHENIDYL
108
4.1.1.3.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON VU0152100 109
4.1.2. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN 112
4.2. DYT1-MAUS 115
4.2.1. GENOTYPISIERUNG 115
4.2.2. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION DES CHOLINERGEN SYSTEMS 115
4.2.2.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PILOCARPIN 116
4.2.2.2. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PILOCARPIN UEBER EINEN
ZEITRAUM
VON 21 TAGEN 123
4.2.2.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON PILOCARPIN 129
4.2.3. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNG STRIATALER CHOLINERGER
INTERNEURONE IN
DYT1-MAEUSEN 132
4.2.4. WESTERNBLOT-ANALYSE DER CHOLINACETYLTRANSFERASE 139
5. DISKUSSION 141
5.1. ASPEKTE ZUR METHODIK 141
5.1.1. UNTERSUCHUNGEN IM CFF^-HAMSTER 141
5.1.1.1. INDUKTION UND BEURTEILUNG DER BEWEGUNGSSTOERUNGEN BEIM DF
J!Z-HAMSTER...141
5.1.1.2. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION UEBER EINEN ZEITRAUM VON 21
TAGEN 142
5.1.1.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN BEIM DF^-HAMSTER 142
5.1.1.4. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN 144
5.1.2. UNTERSUCHUNGEN IN DER DYT1-MAUS 145
5.1.2.1. GENOTYPISIERUNG 145
5.1.2.2. UNTERSUCHUNGSMETHODEN ZUR BEURTEILUNG DER VITALITAET UND MOTORIK
VON
DYT1-MAEUSEN 146
5.1.2.3. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATIONEN 149
5.1.2.4. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNG STRIATALER CHOLINERGER
INTERNEURONE
BEI DYT1-MAEUSEN 153
5.1.2.5. WESTERNBLOT-ANALYSE DER CHOLINACETYLTRANFERASE 154
5.2. ERGEBNISSE 156
5.2.1. DF -HAMSTER 156
5.2.1.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION VON MACHR IM CTF^-HAMSTER 156
5.2.1.1.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE APPLIKATION DER MACHR-ANTAGONISTEN
TROPICAMID UND TRIHEXYPHENIDYL 156
IMAGE 5
INHALTSVERZEICHNIS
5.2.1.1.2. SYSTEMISCHE APPLIKATIONEN VON MACHR-ANTAGONISTEN UEBER EINEN
ZEITRAUM VON 21 TAGEN 158
5.2.1.1.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON MACHR-ANTAGONISTEN 160
5.2.1.1.4. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN DES POSITIVEN ALLOSTERISCHEN
MODULATORS
VU0152100 162
5.2.1.1.5. AKUTE UND CHRONISCHE SYSTEMISCHE APPLIKATIONEN VON PIRENZEPIN
....163
5.2.1.2. REZEPTORAUTORADIOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN 164
5.2.2. DYT1-MAUS 166
5.2.2.1. PHARMAKOLOGISCHE MANIPULATION DES CHOLINERGEN SYSTEMS 166
5.2.2.1.1. EINMALIGE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PILOCARPIN 166
5.2.2.1.2. TAEGLICHE SYSTEMISCHE APPLIKATION VON PILOCARPIN UEBER EINEN
ZEITRAUM VON 21 TAGEN 168
5.2.2.1.3. STRIATALE MIKROINJEKTIONEN VON PILOCARPIN 169
5.2.2.2. IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN STRIATALER CHOLINERGER
INTERNEURONE IN DYT1-MAEUSEN 172
5.2.2.3. WESTERNBLOT-ANALYSE DER CHOLINACETYLTRANSFERASE 174
5.3. SCHLUSSBETRACHTUNGEN 175
6. ZUSAMMENFASSUNG 178
7. SUMMARY 180
8. LITERATURVERZEICHNIS 182
9. TABELLARISCHER ANHANG 221
PUBLIKATIONSLISTE 267
DANKSAGUNG 268
SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 270
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