Charakterisierung von Polyelektrolytkapseln hinsichtlich materialtechnischer und zellbiologischer Eigenschaften und Anwendung dieser für die Analyse der Mikroumgebung verkapselter T-Lymphozyten:
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IMAGE 1
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1 VERKAPSELUNG VON SAEUGERZELLEN 1
1.2 AKTUELLE ENTWICKLUNG DES TISSUE ENGINEERING 2
1.3 ZIELSETZUNGEN DIESER ARBEIT 3
2. CHARAKTERISIERUNG DER POLYELEKTROLYTKAPSELN BEZUEGLICH IHRER
MATERIALTECHNISCHEN EIGENSCHAFTEN. 7
2.1 EINLEITUNG 7
2.1.1 DIE POLYELEKTROLYTKAPSELN 7
2.1.2 DIE CHARAKTERISIERUNG DER POLYELEKTROLYTKAPSELN 8
2.2 MATERIAL UND METHODEN 10
2.2.1 HERSTELLUNG DER POLYELEKTROLYTKAPSELN 10
2.2.2 STABILITAETSMESSUNGEN 10
2.2.3 PERMEABILITAETSMESSUNGEN 11
2.2.4 GROESSE UND QUELLVERHALTEN DER KAPSELN 11
2.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION 12
2.3.1 STABILITAET DER POLYELEKTROLYTKAPSELN 12
2.3.2 PERMEABILITAET DER POLYELEKTROLYTKAPSELN 13
2.3.3 QUELLVERHALTEN DER POLYELEKTROLYTKAPSELN 14
2.4 FAZIT UND AUSBLICK 19
3. CHARAKTERISIERUNG DER POLYELEKTROLYTKAPSELN HINSICHTLICH IHRER
ZELLBIOLOGISCHEN EIGENSCHAFTEN . 20
3.1 EINLEITUNG 20
3.1.1 DIE ANALYSE DER ZELLDICHTEN IN DEN KAPSELN 20
3.1.2 DIE KULTIVIERUNG VERKAPSELTER JURKAT T-ZELLEN 21
3.1.3 DIE VERTIEFENDE ANALYSE VERKAPSELTER ZELLEN 23
3.2 MATERIAL UND METHODEN 25
3.2.1 TOXITIZITAETSTESTS 25
3.2.2 METHODEN DER ZELLDICHTEBESTIMMUNG 25
3.2.3 KAPSELHERSTELLUNG UND KULTIVIERUNG VON JURKAT T-ZELLEN 26
3.2.4 DIE ANALYSE VERKAPSELTER ZELLEN 29
3.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION 32
3.3.1 EINFLUSS DES KAPSELMATERIALS AUF DIE JURKAT T-ZELLEN 32
II
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IMAGE 2
3.3.2 DIE ZELLDICHTE- UND VIABILITAETSBESTIMMUNG VERKAPSELTER ZELLEN 34
3.3.3 KULTIVIERUNG DER JURKAT T-ZELLEN 4 0
3.3.4 VERTIEFENDE ANALYSE DER VERKAPSELTEN JURKAT T-ZEILEN 4 8
3.4 FAZIT UND AUSBLICK 61
4. ANALYSE DER MIKROUMGEBUNG VERKAPSELTER HUMANER PRIMAERER T LYMPHOZYTEN
HINSICHTLICH DER
ENTWICKLUNG EINES ARTIFIZIELLEN LYMPHKNOTENS 63
4.1 EINLEITUNG 6 3
4.1.1 AUFBAU EINES LYMPHKNOTENS 63
4.1.2 DIE ANGEBORENE UND DIE ADAPTIVE IMMUNANTWORT 64
4.1.3 DIE AKTIVIERUNG DER T-LYMPHOZYTEN 66
4.1.4 AKTUELLE FORSCHUNGEN AN ARTIFIZIELLEN LYMPHKNOTEN 67
4.2 MATERIAL UND METHODEN 6 9
4.2.1 ISOLIERUNG VON LYMPHOZYTEN AUS GESUNDEN SPENDERN 69
4.2.2 KULTIVIERUNG DER LYMPHOZYTEN UNVERKAPSELT UND VERKAPSELT 6 9
4.2.3 BESTIMMUNG DER ZELLDICHTE UND VIABILITAET UNVERKAPSELT UND
VERKAPSELT 69
4.2.4 ANALYSE DER OBERFLAECHENMARKER MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 70
4.2.5 BESTIMMUNG DER KONZENTRATIONEN DER ZYTOKINE IL-2, IFN-Y UND IL-4
MITTELS ELISA 70
4.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION 72
4.3.1 KINETIK DER PHA-AKTIVIERUNG UND ERMITTLUNG DES OPTIMALEN
VERKAPSELUNGSZEITPUNKTES. 72
4.3.2 EINFLUSS DES KAPSELMATERIALS UND DES VERKAPSELUNGSPROZESSES AUF
T-LYMPHOZYTEN 80
4.3.3 WACHSTUM VERKAPSELTER HUMANER PRIMAEREN T-LYMPHOZYTEN 84
4.3.4 VERKAPSELUNG VON AKTIVIERUNGSSUBSTANZEN ZUSAMMEN MIT T-LYMPHOZYTEN
89
4.3.5 PROLIFERATION HUMANER PRIMAERER T-LYMPHOZYTEN IN ALGINATKAPSELN 99
4.3.6 AKTIVIERUNG ISOLIERTER CD3* ZELLEN 103
4.4 FAZIT UND AUSBLICK 106
5. GESAMTFAZIT UND AUSBLICK 109
6. ANHANG I
ANHANG I - ETABLIERUNGEN I
1. ETABLIERUNG DER OBERFLAECHENMARKERANALYSE VERKAPSELTER ZELLEN I
2. ETABLIERUNG DER ZELLZYKLUSANALYSE VERKAPSELTER ZELLEN IV
3. GENAUIGKEIT DER ELISA IN ANWESENHEIT DES KAPSELMATERIALS V
4. OPTIMIERUNG DER STIMULIERUNG VIII
III
IMAGE 3
ANHANG II - DIAGRAMME XIV
ANHANG III - VERWENDETE MATERIALIEN XX
ABBILDUNGSVERZEICHNIS XXV
TABELLENVERZEICHNIS XXXII
LITERATURVERZEICHNIS XXXIV
I V |
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