Zytogenetische Veränderungen in unterschiedlichen Geweben von Patienten mit Rheumatoider Arthritis, Osteoarthrose und anderen entzündlichen Gelenkerkrankungen:
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS VII
TABELLEN VERZEICHNIS X
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XI
ZUSAMMENFASSUNG XIII
1 EINLEITUNG 1
1.1 DER FORMENKREIS DER RHEUMATISCHEN ERKRANKUNGEN 1
1.1.1 DIE RHEUMATOIDE ARTHRITIS 1
1.1.2 DIE OSTEOARTHROSE 8
1.1.3 ANDERE ENTZUENDLICHE GELENKERKRANKUNGEN 11
1.2 ZYTOGENETIK UND MOLEKULARE ZYTOGENETIK 12
1.2.1 DEFINITIONEN 12
1.2.2 PRINZIP DER FLUORESZENZ IN SITU HYBRIDISIERUNG (FISH) 12
1.2.3 DIE STRUKTUR DER CHROMOSOMEN 14
1.2.4 CHROMOSOMENABERRATIONEN 14
2 ZIELSTELLUNG 18
3 PATIENTEN, MATERIAL UND METHODEN 19
3.1 LABORCHEMIKALIEN 19
3.1.1 VERWENDETE REAGENZIEN FUER DIE HYBRIDISIERUNG 19
3.1.2 VERWENDETE REAGENZIEN FUER DIE DENATURIERUNG 19
3.1.3 VERWENDETE REAGENZIEN FUER DIE BEHANDLUNG DER SONDEN-DNA 19
3.1.4 VERWENDETE S ONDEN 19
3.1.5 VERWENDETE REAGENZIEN FUER DIE DETEKTION DER SONDEN 20
3.2 GERAETE UND MATERIALIEN 21
3.3 PATIENTEN, PATIENTENDATEN UND GEWEBEPROBEN 21
3.3.1 PATIENTEN, OPERATIONSINDIKATION UND KOMORBIDITAETEN 21
3.3.2 DIE ISOLIERUNG SYNOVIALER ZELLEN - DER KOLLAGENASEVERDAU (CV) 22
3.3.3 REINIGUNG DER SYNOVIALEN ZELLEN MITTELS ANTI-CD14 GEKOPPELTER
MAGNETOBEADS - DIE NEGATIVFRAKTION 22
3.3.4 DIE HAUTFIBROBLASTEN (HF) DER GESUNDEN KONTROLLGRUPPE 23
3.3.5 ZYTOGENETISCHE UNTERSUCHUNGEN AM PATIENTEN IM INSTITUT FUER
HUMANGENETIK.... 24 3.4 METHODEN DER FLUORESZENZ IN SITU HYBRIDISIERUNG
(FISH) 24
3.4.1 DIE PROBENGEWINNUNG 24
3.4.2 DIE ANALYSE NUMERISCHER CHROMOSOMENABERRATIONEN 24
3.4.3 DIE RNASE-VORBEHANDLUNG 24
3.4.4 DER PEPSINVERDAU 25
3.4.5 DIE DENATURIERUNG 25
3.4.6 DIE VORBEREITUNG UND BEHANDLUNG DER SONDEN-DNA 25
3.4.7 AUFTRAGEN UND BEARBEITUNG DER SONDEN-DNA 26
3.4.8 DIE AUSWERTUNG 27
3.5 DIE STATISTISCHE AUSWERTUNG 27
4 ERGEBNISSE 28
4.1 DIE GESUNDE KONTROLLGRUPPE 28
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IMAGE 2
4.1.1 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI PATIENTEN MIT
GELENKTRAUMA
UND NORMALEN PROBANDEN 28
4.1.2 GRENZWERT-FESTLEGUNG FUER NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN
(SYNOVIALE ZELLEN, SFB UND SYNOVIALE MO) 28 4.1.3 BEGRENZTE ANZAHL VON
NUMERISCHEN CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI PATIENTEN MIT GELENKTRAUMA UND
IN NORMALEN GELENKEN 29
4.2 RA PATIENTEN 32
4.2.1 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI RA PATIENTEN 32
4.2.2 NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI RA PATIENTEN 33
4.2.3 QUANTITATIVER VERGLEICH DER MITTELWERTE VON MONOSOMIEN UND
POLYSOMIEN FUER AUSGEWAEHLTE CHROMOSOMEN IN UNTERSCHIEDLICHEN
ZELLPOPULATIONEN BEI RA PATIENTEN 38
4.3 OA PATIENTEN 4 0
4.3.1 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI OA PATIENTEN 40
4.3.2 NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI OA PATIENTEN 40
4.3.3 QUANTITATIVER VERGLEICH DER MITTELWERTE VON MONOSOMIEN UND
POLYSOMIEN FUER AUSGEWAEHLTE CHROMOSOMEN BEI OA PATIENTEN 46
4.3.4 DIREKTER VERGLEICH ZWISCHEN NUMERISCHEN CHROMOSOMENABERRATIONEN IN
DER SYNOVIALMEMBRAN VON RA, OA UND GELENKTRAUMAPATIENTEN/NORMALEN ...48
4.4 ANDERE ENTZUENDLICHE GELENKERKRANKUNGEN 51
4.4.1 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN IN ANDEREN ENTZUENDLICHEN
GELENKERKRANKUNGEN 51
4.4.2 NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN IN ANDEREN ENTZUENDLICHEN
GELENKERKRANKUNGEN 51
4.5 ABERRATIONEN DER GESCHLECHTSCHROMOSOMEN BEI RA UND OA PATIENTEN 52
4.6 KORRELATIONEN ZWISCHEN DEN ZYTOGENETISCHEN ERGEBNISSEN UND
KLINISCHEN PARAMETERN 54
4.6.1 EINFLUSS DES GESCHLECHTS DER R A PATIENTEN 54
4.6.2 EINFLUSS DES GESCHLECHTS DER OA PATIENTEN 55
4.6.3 EINFLUSS DER MTX-EINNAHME DER R A PATIENTEN 57
4.6.4 EINFLUSS DES ALTERS DER RA UND OA PATIENTEN 59
4.6.5 EINFLUSS DER RA ERKRANKUNGSDAUER 62
4.6.6 EINFLUSS DER OA ERKRANKUNGSDAUER 63
4.6.7 EINFLUSS DER ENTZUENDUNGSAKTIVITAET (ESR/CRP) BEI DEN RA UND OA
PATIENTEN 65
5 DISKUSSION 67
5.1 DIE STRUKTURELLEN CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI RA UND OA PATIENTEN 67
5.1.1 GIBT ES IN CHRONISCH-ENTZUENDLICHEN ERKRANKUNGEN WIE DER RA
STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN? 67
5.1.2 SIND DIE STRUKTURELLEN CHROMOSOMENABERRATIONEN SPEZIFISCH FUER RA
PATIENTEN? 68
5.2 DIE NUMERISCHEN CHROMOSOMENABERRATIONEN BEI RA UND OA PATIENTEN 69
5.2.1 GIBT ES IN CHRONISCH-ENTZUENDLICHEN ERKRANKUNGEN WIE DER R A
NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN? 69
5.2.2 SIND DIE NUMERISCHEN CHROMOSOMENABERRATIONEN SPEZIFISCH FUER DIE RA
PATIENTEN? 69
5.2.3 ZEIGEN DIE RESULTATE EINE SPEZIFITAET FUER DAS CHROMOSOM 7? 70
5.2.4 KOENNTE DIE TRISOMIE/POLYSOMIE 7 FUNKTIONELLE KONSEQUENZEN HABEN?
71
IMAGE 3
5.3 EINFLUSS VON KLINISCHEN PARAMETERN DER PATIENTEN AUF DIE NUMERISCHEN
CHROMOSOMENABERRATIONEN 71
5.3.1 HAT DAS GESCHLECHT DER PATIENTEN EINEN EINFLUSS AUF DIE
ABERRATIONEN? 71 5.3.2 HAT DAS ALTER DER PATIENTEN EINEN EINFLUSS AUF
DIE ABERRATIONEN? 73
5.3.3 HAT DIE DAUER DER ERKRANKUNG EINFLUSS AUF DIE ABERRATIONEN? 73
5.3.4 HAT DIE HOEHE DER SYSTEMISCHEN ENTZUENDUNGSAKTIVITAET (CRP) EINEN
EINFLUSS AUF DIE ABERRATIONEN? 74
5.4 EINFLUSS DER METHOTREXAT THERAPIE AUF DIE NUMERISCHEN CHROMOSOMEN
ABERRATIONEN BEI RA PATIENTEN 74
5.4.1 WEISEN PATIENTEN MIT EINER MTX-THERAPIE HOEHERE ODER NIEDRIGERE
NUMERISCHE ABERRATIONEN AUF? 74
5.5 BEITRAG VERSCHIEDENER ZELLPOPULATIONEN ZU DEN
CHROMOSOMENABERRATIONEN IN DER ENTZUENDETEN SYNOVIALMEMBRAN 75
5.5.1 WELCHE ZELLEN TRAGEN AM STAERKSTEN ZU DEN IN DER SYNOVIALMEMBRAN
VORHANDENEN POLYSOMIEN BEI? 75
5.5.2 WELCHE ROLLE SPIELEN DIE SYNOVIALEN MAKROPHAGEN (MO)? 76
5.5.3 LOKALE VERSUS SYSTEMISCHE URSACHE DER ABERRATIONEN? 76
6 SCHLUSSFOLGERUNGEN UND AUSBLICK 78
7 LITERATUR- UND QUELLEN VERZEICHNIS 79
8 ANHANG 90
8.1 KLINISCHE DATEN, LABORPARAMETER UND BEFUNDE 90
8.1.1 KLINISCHE DATEN UND LABORPARAMETER DER UNTERSUCHTEN R A PATIENTEN
90
8.1.2 KLINISCHE DATEN UND LABORPARAMETER DER UNTERSUCHTEN OA PATIENTEN
92 8.1.3 ZYTOGENETISCHE BEFUNDE DER RA PATIENTEN 94
8.1.4 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN IN PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN, HF, SYNOVIALEN ZELLEN UND SFB VON RA PATIENTEN 96
8.1.5 ZYTOGENETISCHE BEFUNDE DER OA PATIENTEN 97
8.1.6 STRUKTURELLE CHROMOSOMENABERRATIONEN IN PERIPHEREN
BLUTLYMPHOZYTEN, HF, SYNOVIALEN ZELLEN UND SFB VON OA PATIENTEN 99
8.1.7 FISH-BEFUNDE DER RA PATIENTEN BEI DEN SFB UND MO 101
8.1.8 FISH-BEFUNDE DER OA PATIENTEN BEI DEN SFB UND MO 107
8.1.9 FISH-BEFUNDE DER KONTROLLEN/GT PATIENTEN BEI DEN SFB UND MO 114
8.1.10 FISH-BEFUNDE DER AE PATIENTEN BEI DEN SFB UND M O 115
8.2 LEBENSLAUF 116
8.3 DANKSAGUNG 117
8.4 EHRENWOERTLICHE ERKLAERUNG 118
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