Eosinophile Granulozyten als Träger von intravaskulärem tissue factor (TF): Bedeutung bei Gerinnungsprozessen und Signaltransduktion
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INHALT
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 6
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 8
TABELLEN 8
I. TISSUE FACTOR (TF) - BEDEUTUNG IN DER BLUTGERINNUNG UND DARUEBER
HINAUS 9
1. GERINNUNGSFORSCHUNG IN DEN LETZTEN 2000 JAHREN 9
2. VOM GEN ZUM PROTEIN 11
3. TF UND EMBRYOGENESE 12
4. VERTEILUNG VON TF IM GEWEBE 13
5. TF ALS STARTERPROTEIN DER GERINNUNG 14
6. TF-ENCRYPTION : 16
7. TF - GERINNUNGSUNABHAENGIGE FUNKTIONEN 16
A. TF-ABHAENGIGE SIGNALTRANSDUKTION 16
B. TF UND ZELLMIGRATION 17
C. METASTASIERUNG, TUMORWACHSTUM UND ANGIOGENESE 18
D. ENTZUENDUNGSPROZESSE 19
II. CHARAKTERISIERUNG EOSINOPHILER GRANULOZYTEN 20
1. MORPHOLOGIE 20
2. VORKOMMEN 21
3. ENTWICKLUNG ;..22
4. FUNKTION 23
A. ZYTOTOXISCHE PROTEINE IN DEN SPEZIFISCHEN GRANULA 23
B. ANTIGEN-PRAESENTATION 24
C. MASTZELL-AKTIVIERUNG 24
D. PARASITAERE ERKRANKUNGEN 25
E. ASTHMA BRONCHIALE 25
F. HYPEREOSINOPHILES SYNDROM (HES) = 26
FRAGESTELLUNG 28
III. MATERIAL/METHODEN 29
1.- SPENDER 29
2. BLUT- UND ZELLPRAEPARATION 29
A. BLUTENTNAHME 29
B. EOSINOPHILEN-ISOLATION AUS VOLLBLUT 29
C. BESTIMMUNG DER ZELLZAHL UND VIABILITAET 31
D. BESTIMMUNG DER REINHEIT DER ZELLSUSPENSION 32
E. MONOZYTEN- UND LYMPHOZYTEN-ISOLATION 32
F. LPS-STIMULATION VON MONOZYTEN 32
G. THROMBOZYTEN-ISOLATION 33
3. BESTIMMUNG VON EOSINOPHIL CATIONIC PROTEIN (ECP) 33
4. ELEKTRONENMIKROSKOPIE 34
A. PRAEPARATION UND EINBETTUNG DER ZELLEN 35
B. IMMUNOLABELLING DER ULTRADUENNSCHNITTE 36
5. DOUBLE SANDWICH ELISA 36
6. FLOWZYTOMETRIE MIT STIMULIERTEN EOSINOPHILEN 37
7. FAKTOR XA-BILDUNG 39
8. REAL TIME PCR 40
9. THROMBELASTOGRAPHIE 42
10. TRANSMIGRATIONSKAMMER 44
11. MATERIALIEN/PUFFER 47
3
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IV. ERGEBNISSE 50
1. NACHWEIS VON TF IN HAEMATOPOETISCHEN VORLAEUFERZELLEN IM KNOCHENMARK 50
2. EXPRESSION VON TF IN REIFEN EOSINOPHILEN IM PERIPHEREN BLUT 54
3. AKTIVIERUNG VON ISOLIERTEN EOSINOPHILEN DURCH GMCSF/PAF 57
4. AKTIVIERUNG DER TF-SYNTHESE IN ISOLIERTEN EOSINOPHILEN DURCH
STIMULATION MIT GMCSF/PAF 58
5. TF-PRAESENTATION AUF DER OBERFLAECHE VON ISOLIERTEN EOSINOPHILEN 60
6. FUNKTIONELLE AKTIVITAET DES EOSINOPHILEN-TF 64
7. ANTI-TF HEMMT DIE TRANSMIGRATION VON ISOLIERTEN EOSINOPHILEN DURCH
DAS ENDOTHEL 66 V. DISKUSSION 70
1. INTRAVASKULAERER TF 70
2. URSPRUNG DES EOSINOPHILEN-TF - DE NOVO SYNTHESE? 72
3. PRAESENTATION VON EOSINOPHILEN-TF NACH AKTIVIERUNG 73
4. TF AUF EOSINOPHILEN- PROKOAGULATORISCHE AKTIVITAET 74
5. TF AUF EOSINOPHILEN - TRANSMIGRATION 75
6. TF AUF EOSINOPHILEN - POTENTIELLE BEDEUTUNG BEI
EOSINOPHILEN-ASSOZIIERTEN KRANKHEITEN 77
A. AUTOIMMUNERKRANKUNGEN DER HAUT 77
B. ASTHMA BRONCHIALE 79
C. IDIOPATHISCHES HYPEREOSINOPHILES SYNDROM (HES) 80
D. ATHEROSKLEROSE - KORONARE HERZKRANKHEIT 81
7. AUSBLICK 83
VI. ZUSAMMENFASSUNG 84
LITERATURVERZEICHNIS 85
DANKSAGUNG 101
4
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