Zell- und Gewebekultur: allgemeine Grundlagen und spezielle Anwendungen
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| Vorheriger Titel: | Lindl, Toni Zell- und Gewebekultur |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin [u.a.]
Springer Spektrum
2013
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Titel: Zell- und Gewebekultur
Autor: Gstraunthaler, Gerhard
Jahr: 2013
Inhaltsverzeichnis
I Allgemeine Grundlagen der Zell-und 6 Zellkulturmedien 69
Gewebekultur 1 6.1 Zusammensetzung der Medien 72
6.2 Kurze Beschreibung der gebräuchlichsten
1 Das Zellkulturlabor: Räumliche und Kulturmedien 80
apparative Voraussetzungen 3 6.3 Herstellung gebrauchsfertiger Medien 83
1.1 Der Reinigungsbereich 3 Literatur 86
1.2 DerVorbereitungs-und Verarbeitungsbereich 3
1.3 Der Sterilbereich 4 7 Serumfreie Zellkultur 89
Literatur 12 7.1 Grundmedien 90
7.2 Zusätze zu serumfreien Medien 90
2 Steriltechnik - Kontaminationen 13 7.3 Modularer Aufbau serumfreier Medien 90
2.1 Der Sterilbereich 14 7.4 Übergang von serumhaltigen zu serumfreien
2.2 Laborreinigung 14 Medien 92
2.3 Hygiene 15 7.5 Serumfreie und proteinfreie Kulturmedien 95
2.4 "Aseptische" Arbeitstechnik 15 7.6 Zusammenfassung: allgemeine Grundsätze
2.5 Sterilisationsverfahren 17 in der Herstellung und Verwendung von Zell-
2.6 Antibiotika (Verwendung von Antibiotika in der kulturmedien 95
Zellkultur) 25 Literatur 96
2.7 Mycoplasmen 27
2.8 Kreuzkontaminationen 37 8 Physiologische Zellkulturparameter 99
Literatur 41 8.1 Osmolarität 99
8.2 Temperatur 99
3 Sicherheit in der Zellkultur 43 8.3 Oxygenierung 100
3.1 Sicherheitsvorschriften 43 8.4 pH-Wert und Pufferung 100
3.2 Entsorgung 46 Literatur 102
3.3 Generelle Probleme 47
Literatur 47 9 Reinstwasser für Zell- und Gewebe-
kulturen 103
9.1 Verfahren der Aufbereitung, Vorbehandlung 104
II Die Zelle und ihre Umgebung 49 9.2 Reinstwasseraufbereitungssysteme 104
9.3 Lagerung von Reinstwasser 105
4 Zellbiologische Grundlagen der Zell-und 9.4 Wasser für Reinigungszwecke 106
Gewebekultur 51 Literatur 106
Literatur 52
5 Kulturgefäße und ihre Behandlung 53 III Routinemethoden zur allgemeinen
5.1 Züchtung von Zellen auf Glas 53 Handhabung kultivierter Zellen 107
5.2 Züchtung von Zellen auf Plastikmaterial 54
5.3 Züchtung von Zellen auf anderen Materialien 58 10 Mediumwechsel und Fütterungszyklen 109
5.4 Spezielle Kulturgefäße 58 10.1 Mediumwechsel bei Monolayerkulturen 109
5.5 Reinigung und Vorbehandlung von 10.2 Mediumwechsel bei Suspensionskulturen 111
Glaswaren 61 Literatur 112
5.6 Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Polylysin
oder mit Komponenten der extrazellulären 11 Subkultivierung/Passagieren 113
Matrix zur Modifizierung der Oberflächeneigen- 11.1 Subkultivierung von Monolayerkulturen 113
Schäften 63 11.2 Subkultivierung von Suspensionskulturen 119
Literatur 67 Literatur 119
VIII Inhaltsverzeichnis
12 Bestimmung allgemeiner Wachstums- 18 Kultivierung spezieller Zelllinien 177
parameter 121 18.1 Mammaliazelllinien 177
12.1 Mikroskopische Betrachtung der Kulturen 121 18.2 Kaltblütige Vertebraten 188
12.2 Bestimmung der Zellzahl (und Zellmasse) 121 18.3 Invertebraten 188
12.3 Bestimmung allgemeiner Stoffwechsel- 18.4 Insektenzellen für die biotechnologische
parameter 129 Produktion rekombinanter Proteine (Sf9-Zellen
12.4 Vitalitätstests 129 aus Spodoptera frugiperda) 189
Literatur 134 Literatur 191
13 Einfrieren, Lagerung und Versand von 19 Spezielle zellbiologische Methoden in der
Zellen 137 Zellkultur 195
13.1 Einfrieren von Zellen 137 19.1 Transfektion 195
13.2 Lagerung der Zellen 139 19.2 Klonieren 200
13.3 Auftauen von Zellen 140 19.3 Zellfusion, Hybridomatechnik 202
13.4 Versand von Zellen 141 19.4 Zellsynchronisation 209
13.5 Probleme mit Zellen 141 19.5 Cytometrie/Cell Sorting 212
Literatur 142 19.6 Versuche zur /n-w'fro-Toxizität 218
19.7 Migrationsassays 228
14 Qualitätskontrolle und Cell Banking 143 19.8 Chromosomenpräparation 231
14.1 Qualitätskontrolle 143 Literatur 232
14.2 Cell Banking 144
Literatur 144 20 Organkulturen 237
20.1 Präparation eines Säugerdünndarms als
15 Standardisierung in der Zellkultur Beispiel für eine Organpräparation in der
(Good Cell Culture Practice) 147 Pharmakologie 239
Literatur 148 20.2 Präparation eines peripheren Nerven (oberes
Halsganglion) zur Messung der neuronalen
Übertragung (Neurotransmission) 240
IV Spezielle Methoden und 20.3 Leberschnitte in vitro 240
Anwendungen 149 Literatur 242
16 Allgemeine Aspekte der Primärkultur 151 21 Stammzellen und Tissue Engineering 243
16.1 Anlegen einer Primärkultur 151 21.1 Adulte Stammzellen 244
16.2 Etablierung einer Zelllinie, Zellalterung und 21.2 Embryonaler-Stammzell-Test (EST)
Seneszenz 154 (Spezies: Maus) 248
16.3 Apoptose in der Zellkultur 157 21.3 Tissue Engineering und dreidimensionale
16.4 Transformation und Immortalisierung 157 Zellkultur 256
Literatur 161 Literatur 259
17 Spezielle Primärkulturen 163 22 Zellkultur im großen Maßstab,
17.1 Kultivierung von Herzmuskelzellen des Automatisierung 263
Hühnchens 163 22.1 Monolayerkulturen für große Zellmengen 263
17.2 Kultivierung von Herzmuskelzellen aus 22.2 Suspensionskultur für große Zellmengen 268
neonatalen Rattenherzen 164 22.3 Automatisierung in der Zellkultur 271
17.3 Primärkulturen aus frischen Hautproben Literatur 272
(Biopsien) menschlichen Ursprungs 164
17.4 Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut
mittels Dichtegradientenzentrifugation 165 V Pflanzenzellkultur 273
17.5 Primärkulturen aus Mäusecerebellum
(Kleinhirn) 166 23 Pflanzenzeil-und Gewebekultur 275
17.6 Primärkulturen von Hepatocyten 168 23.1 Herstellung von Kulturmedien 275
17.7 Isolierung und Primärkultur von 23.2 Kalluskulturen 279
Endothelzellen 170 23.3 Suspensionskulturen 281
17.8 Gewinnung einer Zellkultur aus soliden 23.4 Isolierung von Protoplasten aus Pflanzenzeil-
Humantumoren 172 kulturen 282
17.9 Gewinnung von Keratinocyten 174 23.5 Antherenkultur 285
Literatur 176 23.6 Embryonenkultur 287
Inhaltsverzeichnis IX
23.7 Einfrieren und Lagerung von Pflanzenzeil- B.4 Zeitschriften 320
kulturen 287 B.5 Intemetinformationen zur Cytometrie 320
Literatur 288 B.6 Institutionen und Firmen, die Zellkulturkurse
anbieten 320
B.7 Zellbanken und Institutionen, die eine
VI Glossar und Anhang 291 Authentifizierung humaner Zelllinien mittels
STR-Analyse anbieten (Abschn. 2.8) 320
A Glossar (Kleines Zell- und Gewebekultur- B.8 Wissenschaftliche Gesellschaften für Zell-
lexikon) 293 kultur 321
Literatur 309 B.9 Übersichtswerke zur Beschaffung von Geräten,
Labormaterial und Reagenzien 321
B Anhang 311
B.1 Was kann die Ursache von schlechtem C Lieferfirmen und Hersteller 323
Zellwachstum sein? 311
B.2 Berechnungen in der Zellkultur 312 Index 331
B.3 Nachschlagewerke und Handbücher der
Zell-und Gewebekultur 319 Methoden und Anwendungen 339
ZELL- UND GEWEBEKULTUR
/ GSTRAUNTHALER, GERHARD
: 2013
ABSTRACT / INHALTSTEXT
DIESES LEHR- UND METHODENBUCH SOLL STUDENTEN DER BIOLOGIE, MEDIZIN,
PHARMAZIE ODER BIOTECHNOLOGIE WIE AUCH WISSENSCHAFTLERN UND TECHNISCHEN
ASSISTENTEN EINEN UMFASSENDEN EINBLICK IN DIE ZELL- UND GEWEBEKULTUR
VERMITTELN. DIE THEORETISCHEN GRUNDLAGEN WURDEN VERSTAERKT
HERAUSGEARBEITET UND RELEVANTE GESETZESVORSCHRIFTEN AKTUALISIERT.
PRAKTISCHE TIPPS UND TRICKS IN EINER LABOR- UND LESERFREUNDLICHEN
AUFMACHUNG DIENEN DAZU, DIE TAEGLICHE ROUTINE IM ZELLKULTURLABOR ZU
ERLEICHTERN. ES SIND VOR ALLEM DIE LEICHT NACHVOLLZIEHBAREN
"MAN-NEHME"-VORSCHRIFTEN, DIE DEN PRAKTISCHEN WERT DES BUCHES AUSMACHEN
UND ZU WEITERFUEHRENDEN EXPERIMENTELLEN ANSAETZEN ANREGEN. EXEMPLARISCH
WERDEN DIE WICHTIGSTEN GRUNDOPERATIONEN IN DER ZELLKULTUR BEHANDELT,
SODASS SICH AUCH ANFAENGER BEI DER KULTIVIERUNG TIERISCHER UND
PFLANZLICHER ZELLEN GUT MITHILFE DES BUCHES EINARBEITEN UND INFORMIEREN
KOENNEN.DER INFO-ANHANG ENTHAELT STOECHIOMETRISCHE RECHENBEISPIELE, EIN
HILFREICHES GLOSSAR, WEITERFUEHRENDE LITERATURHINWEISE UND ADRESSEN VON
LIEFERFIRMEN MIT INTERNETADRESSEN. DIE 7. AUFLAGE WURDE VOLLSTAENDIG
UEBERARBEITET, ERWEITERT UND NEU ILLUSTRIERT. DAS BUCH ERSCHEINT NUNMEHR
IN VOELLIG NEUEM LAYOUT IN FARBE. BEIBEHALTEN WURDE DIE BEWAEHRTE
GRUNDSTRUKTUR DIESES LABOR-"KLASSIKERS", WELCHE IN 6 UEBERKAPITELN
ZUSAMMENGEFASST IST: ALLGEMEINE GRUNDLAGEN DER ZELL- UND GEWEBEKULTUR
DIE ZELLE UND IHRE UMGEBUNG ROUTINEMETHODEN ZUR ALLGEMEINEN HANDHABUNG
KULTIVIERTER ZELLEN SPEZIELLE METHODEN UND ANWENDUNGEN
PFLANZENZELLKULTUR GLOSSAR UND ANHANG DIE UMFANGREICHEN
LITERATURHINWEISE AM ENDE EINES JEDEN KAPITELS WURDEN AUF DEN LETZTEN
STAND GEBRACHT. NEU HINZUGEKOMMEN ZU DEN ABSCHNITTEN UEBER
„QUALITAETSKONTROLLE IN DER ZELL- UND GEWEBEKULTUR" UND
„STANDARDISIERUNG VON ZELLKULTUREN" SIND DIE KAPITEL
„AUTHENTIFIZIERUNG HUMANER ZELLLINIEN MITTELS DNA-PROFILING" UND
„SERUMFREIE ZELLKULTUR".ERWEITERT UND AKTUALISIERT WURDEN AUCH DIE
NACHWEISMETHODEN FUER MYCOPLASMEN. BIS HEUTE STELLEN
KREUZKONTAMINATIONEN, FALSCH IDENTIFIZIERTE ZELLLINIEN UND
VERUNREINIGUNGEN MIT MYCOPLASMEN DIE GROESSTEN HERAUSFORDERUNGEN IN DER
MODERNEN ZELL- UND GEWEBEKULTUR DAR. DEN AUTOREN IST ES DESHALB WICHTIG,
EINE „GOOD CELL CULTURE PRACTICE" ZU PROPAGIEREN UND DIE NOTWENDIGKEIT
EINER STAENDIGEN QUALITAETSKONTROLLE UND EINES EINHERGEHENDEN
QUALITAETSMANAGEMENTS BEWUSST ZU MACHEN. UEBER DIE AUTOREN:
UNIV.-PROF. DR. GERHARD GSTRAUNTHALER, GEB. 1953 IN LANDECK/TIROL.
1972–1979 STUDIUM DER MIKROBIOLOGIE UND BIOCHEMIE AN DER UNIVERSITAET
INNSBRUCK. 1987 HABILITATION FUER PHYSIOLOGIE MIT BES. BERUECKSICHTIGUNG
DER ZELLPHYSIOLOGIE, 1994 TITULARPROFESSOR AM INSTITUT FUER PHYSIOLOGIE
DER MEDIZINISCHEN UNIVERSITAET INNSBRUCK. 1984/85 FORSCHUNGSAUFENTHALTE
AN DEN NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, BETHESDA, MD. UND 1995 AN DER
COLORADO STATE UNIVERSITY.EXTERNER LEKTOR AM INSTITUT FUER MIKROBIOLOGIE
DER UNIVERSITAET INNSBRUCK UND AN DER FACHHOCHSCHULE MANAGEMENT CENTER
INNSBRUCK (MCI). SPEZIALGEBIETE: ZELLPHYSIOLOGIE, EPITHELIALE ZELL- UND
GEWEBEKULTUR, NIERENBIOCHEMIE, ERSATZMETHODEN ZU TIERVERSUCHEN. PROF.
DR. TONI LINDL, STUDIUM DER CHEMIE UND BIOLOGIE AN DER TH MUENCHEN UND
AN DER UNIVERSITAET FREIBURG. UNIV.-ASSISTENT AN DER UNIV. KONSTANZ UND
AN DER UNIVERSITAET BONN. 1981 GRUENDUNG DES PRIVATEN INSTITUTS FUER
ANGEWANDTE ZELLKULTUR IN MUENCHEN (BMFT- U. BMBW-PROJEKTE,
ZELLKULTURGRUNDKURSE). 1990 BERUFUNG AN DIE FACHHOCHSCHULE
WEIHENSTEPHAN, 1995 FORSCHUNGSAUFENTHALT AM MASSACHUSETTS INSTITUTE OF
TECHNOLOGY (MIT), CAMBRIDGE, MASS., USA.
DIESES SCHRIFTSTUECK WURDE MASCHINELL ERZEUGT. |
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