Untersuchungen zur Chitin-induzierten Aktivierung dendritischer Zellen und Makrophagen und deren Auswirkung auf CD4+-T-Zellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS IMMUNSYSTEM 1
1.2 REGULATION DER T-ZELLANTWORT 2
1.2.1 REGULATION DER T H-ZELLPOLARISIERUNG 4
1.2.1.1 EL- 12-ZYTOKINFAMILIE 6
1.2.2 REGULATION DER T H-ZELLPROLIFERATION 7
1.2.2.1IL-10 7
1.2.2.2KOSTIMULATION UND B7-FAMILIE 7
1.3 MUSTERERKENNUNGSREZEPTOREN UND WICHTIGE SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE 10
1.4 ANTIGEN-PRAESENTIERENDE ZELLEN 12
1.4.1 UNTERSCHIEDLICHE DIFFERENZIERUNGSTYPEN VON MAKROPHAGEN 13
1.5 BISHERIGE ERKENNTNISSE UEBER CHITIN UND CHITINASEN 15
1.6 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 22
2 MATERIAL UND METHODEN 23
2.1 MATERIAL 23
2.1.1 GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIAL 23
2.1.2 REAGENZIEL UND CHEMIKALIEN 26
2.1.3 PUFFERLOESUNGEN UND ZELLKULTURMEDIEN 29
2.1.4 ANTIKOERPER 30
2.1.1 SYNTHETISCHE OLIGONUKLEOTIDE (PRIMER) 32
2.1.2 MAUSSTAEMME UND ZELLLINIEN 33
2.2 METHODEN 35
2.2.1 AUFBEREITUNG VON CHITINPULVER UND GLASKUEGELCHEN 35
2.2.2 ORGANENTNAHME, ZELLKULTUREN UND IMMUNBIOLOGISCHE METHODEN 35 2.2.3
HERSTELLEN ANTIGEN-PRAESENTIERENDER ZELLEN AUS
KNOCHENMARKSVORLAEUFERZELLEN...38 2.2.4 GEWINNEN VON MAKROPHAGEN EX VIVO
MITTELS PERITONEALLAVAGE 39 2.2.5 ANALYSE VON MAKROPHAGEN AUS DER MILZ
39
2.2.6 STIMULATION VON ANTIGEN-PRAESENTIERENDEN ZELLEN UND KOKULTUREN 40
2.2.7 BESTIMMUNG DES EINFLUSSES AUF LEUKOZYTEN DES RESPIRATIONSTRAKTES
40 2.2.7.1 ADOPTIVER TRANSFER UND OVALBUMINSTIMULATION 40
2.2.8 IMMUNFLUORESZENZ UND DURCHFLUSSZYTOMETRIE 41
2.2.8.1 OBERFLAECHENFAERBUNG 42
2.2.8.2INTRAZELLULAERFAERBUNG 42
2.2.8.3 CFSE-BASIERTE BESTIMMUNG DER T-ZELLPROLIFERATION 43
2.2.9 BESTIMMUNG DES GENEXPRESSIONSPROFILS MITTELS PCR 45
2.2.10 STATISTISCHE ANALYSE 48
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IMAGE 2
3 ERGEBNISSE 49
3.1 MAESSIGE LYMPHOZYTENAKTIVIERUNG DURCH CHITIN 49
3.2 REGULIERUNG DER TN-ZELLPOLARISIERUNG DURCH CHITIN 51
3.2.1 VERAENDERUNG DER IL-4- UND IFN--Y-PRODUKTION DURCH CHITIN 51 3.2.2
PRODUKTION VON ZYTOKINEN DER IL-12-FAMILIE DURCH DZ 53
3.3 REGULIERUNG DER TH-ZELLPROLIFERATION DURCH CHITIN 54
3.3.1 HEMMUNG DER TN-ZELLEXPANSION DURCH CHITIN IN VIVO 54
3.3.2 HEMMUNG DER TH-ZELLPROLIFERATION IN VITRO 56
3.3.3 HEMMUNG DER T-ZELLPROLIFERATION DURCH MAKROPHAGEN 58
3.3.4 REGULIERUNG VON B7-H1 DURCH CHITIN 60
3.3.4.1 AUSWIRKUNG AUF KNOCHENMARKSMAKROPHAGEN 60
3.3.4.2AUSWIRKUNG AUF MAKROPHAGEN DER PERITONEALHOEHLE 63
3.3.4.3 AUSWIRKUNG AUF MAKROPHAGEN DER MILZ 64
3.3.5 KEINE HEMMUNG DER T-ZELLPROLIFERATION DURCH VON MAKROPHAGEN
PRODUZIERTE LOESLICHE FAKTOREN 65
3.3.6 HEMMUNG DER T-ZELLPROLIFERATION DURCH B7-H1-INDUKTION 66 3.3.7
DIFFERENZIERUNG DER MAKROPHAGEN 68
3.3.8 MOEGLICHE SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE 69
3.3.9 AUSSCHLUSS VON LPS-VERUNREINIGUNGEN 71
3.3.10 HEMMUNG DER T-ZELLPROLIFERATION DURCH DZ 72
3.4 INDUKTION VON CHITINASEN UND CHITINASE-AEHNLICHEN MOLEKUELEN 75
4 DISKUSSION 76
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 88
TABELLENVERZEICHNIS 89
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 90
LITERATURVERZEICHNIS 96
DANKSAGUNG 110
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