Haftung und Differenzierung von osteogenen Zellen und Laminin-5 in vitro:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2012
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| Beschreibung: | 93 S. Ill., graph. Darst. 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS 1
2 EINLEITUNG II 4
2.1 ENDOPROTHESEN 4
2.1.1 LOCKERUNG VON ENDOPROTHESEN 5
2.1.2 DIE OBERFLAECHEN VON ENDOPROTHESEN 6
2.2 OSTEOBLASTEN 7
2.2.1 AUFBAU DES KNOCHENS 7
2.2.2 DIE REGULATION DES KNOCHENSTOFFWECHSELS 9
2.3 ADULTE MESENCHYMALE STAMMZELLEN (MSC) 10
2.3.1 EIGENSCHAFTEN UND LOKALISATION DER MSC 10
2.3.2 MINIMALKRITERIEN DER MSC 11
2.3.3 NISCHEN DER MESENCHYMALEN STAMMZELLEN 12
2.4 PROTEINE DER EXTRAZELLULAEREN MATRIX 13
2.4.1 KOLLAGENE 13
2.4.2 LAMININE 14
2.4.2.1 LAMININ-111/LM-1 15
2.4.2.2 LAMININ-332/LM-5 15
2.5 ZIEL DER DISSERTATION 16
3 MATERIAL UND METHODIK 18
3.1 ISOLATION UND KULTIVIERUNG VON MSC AUS DEM KNOCHENMARK 18
3.1.1 KULTIVIERUNGSMEDIUM FUER MSC UND MEDIUMWECHSEL 20
3.1.2 PASSAGIEREN VON MSC 21
3.1.3 KULTIVIERUNG VON MSC IN PROTEINBESCHICHTETEN ZELLKULTURFLASCHEN 21
3.1.4 KULTIVIERUNG VON MSC AUF EINER PROTEINBESCHICHTETEN 96-WELL PLATTE
23
3.1.5 KULTIVIERUNG DER MSC AUF EINER PROTEINBESCHICHTETEN 6-WELL PLATTE
24
3.2 ISOLATION UND KULTIVIERUNG VON OSTEOBLASTEN AUS DEM HUEFTKOPF 24
3.2.1 KULTIVIERUNGSMEDIUM FUER OSTEOBLASTEN UND MEDIENWECHSEL 27
3.2.2 PASSAGIEREN VON OSTEOBLASTEN -..28
1
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
3.3 ZELLBIOLOGISCHE ASSAYS 28
3.3.1 MTT-ASSAY 28
3.3.2 BRDU-ASSAY 28
3.4 ZELLHADHAESIONSVERSUCH/ATTACHMENT ASSAY 29
3.5 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNG DER MSC 30 ^
3.5.1 DIFFERENZIERUNGSBEDINGUNGEN 31
3.5.2 NACHWEIS DER OSTEOGENEN DIFFERENZIERUNG MITTELS VON KOSSA FAERBUNG
31
3.6 ANALYSE DER EXPRESSION OSTEOGENER MARKERGENE 32
3.6.1 ISOLATION VON RNA 32
3.6.2 CDNA-SYNTHESE 33
3.6.3 QUANTITATIVE REAL TIME PCR (LIGHT CYCLER ) 33
4 ERGEBNISSE 35
4.1 TECHNISCHE HILFSMITTEL ZUR AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE 35
4.2 ZELLKULTUR DER MSC 35
4.3 ZELLKULTUR DER OSTEOBLASTEN 39
4.4 HAFTUNG DER MSC UND OSTEOBLASTEN AUF PROTEINEN DER EXTRAZELLULAEREN
MATRIX 41
4.5 VITALITAET DER MSC SOWIE OSTEOBLASTEN IM MTT-ASSAY 45
4.6 PROLIFERATIONSRATE DER MSC UND OSTEOBLASTEN IM BRDU-ASSAY 47
4.7 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNG DER MSC AUF PROTEINEN DER EXTRAZELLULAEREN
MATRIX 51
4.8 EINFLUSS EXTRAZELLULAERER MATRIX-PROTEINE AUF DIE EXPRESSION
OSTEOGENER
MARKERGENE IN MSC 54
5 DISKUSSION 57
5.1 ZELLKULTUR DER MSC 57
5.2 HAFTUNG DER MSC UND OSTEOBLASTEN AUF PROTEINEN DER EXTRAZELLULAEREN
MATRIX 58
5.3 OSTEOGENE DIFFERENZIERUNGSFAEHIGKEIT DER MSC AUF LAMININ-5, LAMLNIN-1
UND
KOLLAGEN 1 60
2
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
5.4 BEEINFLUSSUNG DER IN VITRO EXPANSION DER MSC DURCH UNTERSCHIEDLICHE
STAMMZELLMEDLEN 63
5.5 WIRKUNG VON LAMLNLN-5, KOLLAGEN I UND LAMLNLN-1 AUT DIE METABOLISCHE
AKTIVITAET
UND PROLIFERATION DER MSC SOWIE OSTEOBLASTEN 64
5.6 SCHLUSSFOLGERUNG AUS DER ARBELT 66
6 ZUSAMMENFASSUNG 68
LITERATURVERZEICHNIS 70
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 80
TABELLENVERZEICHNIS 84
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 86
MATERIAL UND METHODIK 89
DANKSAGUNG 90
LEBENSLAUF 91
ERKLAERUNG 93
3
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