Immunhistochemische Untersuchung des oralen amelanotischen malignen Melanoms des Hundes.:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München
Verl. Dr. Hut
2013
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
| Schriftenreihe: | Tiermedizin
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IMAGE 1
INHALTSVERZEICHNIS I
INHALTSVERZEICHNIS SEITE
1. EINLEITUNG 1
2. LITERATURUEBERSICHT 3
2.1 DAS PIGMENT MELANIN 3
2.1.1 ARTEN VON MELANIN 3
2.1.1.1 EUMELANIN UND PHEOMELANIN 3
2.1.1.2 NEUROMELANIN 4
2.1.1.3 MELANIN IM FETTGEWEBE 4
2.1.2 MELANOGENESE 4
2.1.3 WEITERGABE VON MELANOSOMEN AN KERATINOZYTEN 10
2.1.4 FUNKTION DES MELANINS 13
2.2 DER MELANOZYT 15
2.2.1 DIE LICHTMIKROSKOPISCHE UND ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
MORPHOLOGIE DES EPIDERMALEN MELANOZYTEN 15
2.2.2 LOKALISATIONEN UND FUNKTION DER MELANOZYTEN IM KOERPER 21
2.2.3 EMBRYOGENESE 31
2.3 MELANOZYTAERE NEOPLASIEN DES MENSCHEN 33
2.3.1 UEBERSICHT DER EINTEILUNG DER KUTANEN BENIGNEN MELANOZY- TAEREN
NEOPLASIEN DES MENSCHEN 33
2.3.1.1 DIE ERSTE GRUPPE: GEWOEHNLICHE MELANOZYTAERE
NAEVI UND SONDERFORMEN 34
2.3.1.2 DIE ZWEITE GRUPPE: ATYPISCHER/DYSPLASTISCHER
MELANOZYTAERER NAEVUS 39
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IMAGE 2
II INHALTSVERZEICHNIS
2.3.1.3 DIE DRITTE GRUPPE: KONGENITALER NAEVUS 41
2.3.2 KLASSISCHE EINTEILUNG DER KUTANEN MALIGNEN MELANOME
DES MENSCHEN 42
2.3.2.1 SUPERFIZIELL SPREITENDES MELANOM (SSM) 42
2.3.2.2 LENTIGO MALIGNA MELANOMA (LMM) 43
2.3.2.3 NODULAERES MALIGNES MELANOM (NMM) 43
2.3.2.4 AKRAL LENTIGINOESES MELANOM (ALM) 44
2.3.3 EXTRAKUTANE MELANOME DES MENSCHEN 45
2.3.4 BEURTEILUNG DER MALIGNITAET 46
2.3.5 ZELLVARIANTEN 47
2.4 MELANOZYTAERE NEOPLASIEN DES HUNDES 49
2.4.1 ALLGEMEINES 49
2.4.2 ORALE MELANOME DES HUNDES 51
2.4.3 KLASSIFIZIERUNG DER MELANOZYTAEREN NEOPLASIEN DES HUNDES 52
2.4.3.1 BENIGNE MELANOZYTAERE TUMORE 52
2.4.3.1.1 LENTIGO 52
2.4.3.1.2 MELANOZYTOM 53
2.4.3.2 MALIGNE MELANOME DES HUNDES 55
2.4.3.2.1 EPITHELOIDE MELANOME 56
2.4.3.2.2 SPINDELZELLIGE MELANOME 56
2.4.3.2.3 GEMISCHTER TYP 56
2.4.3.2.4 DENDRITSCHE FORM 57
2.4.3.2.5 BALLONZELLEN MELANOM 57
2.4.3.2.6 SIEGELRINGZELLENMELANOM 57
2.4.3.2.7 ADENOMATOESE/PAPILLAERE ZELLEN 58
2.4.3.2.8 KNORPELARTIGE UND/ODER OSTEOIDE
FORMATION 58
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS III
2.5 DIFFERENTIALDIAGNOSEN FUER DAS MALIGNE MELANOMS DES HUNDES 58
2.6 DIAGNOSEMOEGLICHKEITEN 60
2.6.1 ENZYMNACHWEISE 60
2.6.2 NACHWEIS VON GLYKOGEN 60
2.6.3 HISTOCHEMISCHE NACHWEISMETHODEN FIIR MELANIN ODER
ANDERE PIGMENTE 61
2.6.3.1 FONTANA-MASSON-FAERBUNG 61
2.6.3.2 SCHMORLS TECHNIK ZUM NACHWEIS FUER
REDUZIERENDE SUBSTANZEN 61
2.6.4 IMMUNZYTOCHEMIE 61
2.6.5 NACHWEIS VON GENETISCHEN ABNORMALITAETEN 62
2.6.5.1 COMPARATIVE GENOMIC HYBRIDIZATION (CGH) 62
2.6.5.2 FLUORESCENCE IN SITU HYBRIDZATION (FISH) 63
2.6.6 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 64
2.6.7 IMMUNHISTOCHEMIE 65
2.6.7.1 GRUNDPRINZIP 65
2.6.7.1.1 ANTIGENE 65
2.6.7.1.2 ANTIKOERPER 66
2.6.7.1.3 ANTIKOERPER-ANTIGEN BINDUNG 67
2.6.7.2 DETEKTIONSSYSTEME 68
2.6.7.2.1 DIREKTES DETEKTIONSSYSTEM 68
2.6.7.2.2 INDIREKTES DETEKTIONSSYSTEM 69
2.6.7.2.3 MEHRSCHRITTVERFAHREN 69
2.6.7.2.3.1 LOESLICHE ENZYMIMMUNKOMPLEX METHODEN 69
2.6.7.2.3.2 AVIDIN-BIOTIN METHODEN 71
IMAGE 4
IV INHALTSVERZEICHNIS
2.6.7.3 INDIKATORMOLEKUELE UND CHROMOGENE 72
2.6.7.4 GEGENFARBUNG 73
2.6.7.5 PROBLEME DER IMMUNHISTOCHEMIE 73
2.6.7.5.1 HINTERGRUNDFARBUNG 73
2.6.7.5.2 KREUZREAKTIONEN 74
2.6.7.5.3 ENDOGENE PEROXIDASEAKTIVITAET 74
2.6.8 IMMUNHISTOCHEMIE AM MENSCHLICHEN MELANOM 75
2.6.8.1 ERSTE HAUPTGRUPPE: MELANOZYTAERE
DIFFERENZIERUNGSMARKER 75
2.6.8.1.1 SLOO-PROTEINFAMILIE 75
2.6.8.1.2 HMB45 77
2.6.8.1.3 MELANA/M ART -1 79
2.6.8.1.4 ANTI-TYROSINASE 80
2.6.8.1.5 MITF 81
2.6.8.1.6 NKI/C3 82
2.6.8.1.7 MEL-L/KLON R24 82
2.6.8.1.8 PNL2 83
2.6.8.2 ZWEITE HAUPTGRUPPE: MELANOM PROGRESSIONSMARKER 84
2.6.9 IMMUNHISTOCHEMIE BEIM KANINEN MELANOM 86
2.6.9.1 MELANA 88
2.6.9.2 S100 89
2.6.9.3 HMB45 90
3. MATERIAL UND METHODEN 93
3.1 UNTERSUCHUNGSMATERIAL
3.1.1 UNTERSUCHUNGSMATERIAL FUER DIE IMMUNHISTOCHEMIE
93
93
IMAGE 5
INHALTSVERZEICHNIS V
3.1.1.1 MELANOME MIT EINEM AMELANOTISCHEN TEIL
BEREICH VOM HUND 93
3.1.1.2 ANDERE DIFFERENTIALDIAGNOSTISCH RELEVANTE
TUMORE 96
3.1.1.3 TUMORE MIT DER DIFFERENTIALDIAGNOSE
"AMELANOTISCHES MELANOM" VOM HUND 98
3.1.1.4 NORMALES GEWEBE VOM HUND, DAS GETESTET
WURDE, UM KREUZREAKTIONEN AUSZUSCHLIESSEN 100
3.1.1.5 POSITIVKONTROLLEN 100
3.1.2 UNTERSUCHUNGSMATERIAL FUER DIE ELEKTRONENMIKROSKOPIE 101
3.2 FIXATION 102
3.2.1 FIXATION FUER DIE PARAFFINEINBETTUNG 102
3.2.2 FIXATION FUER DIE EPOXIDHARZEINBETTUNG 102
3.3 EINBETTUNG 103
3.3.1 PARAFFINEINBETTUNG 103
3.3.2 EPOXIDHARZEINBETTUNG 104
3.4 ANFERTIGEN DER GEWEBESCHNITTE 105
3.4.1 HERSTELLUNG DER PARAFFINSCHNITTE 105
3.4.2 HERSTELLUNG DER PARAFFINSCHNITTE FUER DIE IMMUNHISTOCHEMIE 106
3.4.3 HERSTELLUNG VON SEMI- UND ULTRADUENNSCHNITTEN FUER DIE
ELEKTRONENMIKROSKOPIE 106
3.5 UEBERSICHTSFAERBUNGEN 108
3.5.1 HAEMATOXYLIN / EOSIN (H.E.)-FAERBUNG AM PARAFFINSCHNITT 108
IMAGE 6
IV INHALTSVERZEICHNIS
3.5.2 GIEMSA-FAERBUNG AM PARAFFINSCHNITT 109
3.6 IMMUNHISTOCHEMIE 110
3.6.1 ALLGEMEINES 110
3.6.1.1 UNTERDRUECKUNG DER UNSPEZIFISCHEN HINTER
GRUNDREAKTIONEN 110
3.6.1.2 HEMMUNG DER ENDOGENEN PEROXIDASE 111
3.6.1.3 DEMASKIERUNG DES ANTIGENS 111
3.6.2 IMMUNHISTOCHEMIE MIT HMB45 111
3.6.2.1 VERWENDETE ANTIKOERPER, PUFFERLOESUNGEN, FAERBUNGEN UND CHROMOGENE
111
3.6.2.2 BESCHREIBUNG DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN PRO
TOKOLLE FUER HMB45 112
3.6.3 IMMUNHISTOCHEMIE MIT MELANA 122
3.6.3.1 VERWENDETE ANTIKOERPER, PUFFERLOESUNGEN,
FAERBUNGEN UND CHROMOGENE 122
3.6.3.2 BESCHREIBUNG DES IMMUNHISTOCHEMISCHEN PRO
TOKOLLS FUER MELANA 122
3.6.4 IMMUNHISTOCHEMIE MIT S100 125
3.6.4.1 VERWENDETE ANTIKOERPER, PUFFERLOESUNGEN,
FAERBUNGEN UND CHROMOGENE 125
3.6.4.2 BESCHREIBUNG DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN PRO
TOKOLLE FUER S100 126
3.6.5 KONTROLLEN 128
3.6.5.1 NEGATIVKONTROLLEN 128
3.6.5.2 POSITIVKONTROLLEN 129
IMAGE 7
INHALTSVERZEICHNIS VII
3.6.6 VERWENDETE PUFFERLOESUNGEN 129
3.6.7 CHROMOGENE 130
3.6.8 FAERBUNGEN 131
4. ERGEBNISSE 133
4.1 IMMUNHISTOCHEMIE HMB45 136
4.1.1 NEGATIVKONTROLLEN MIT HMB45 142
4.2 IMMUNHISTOCHEMIE MIT MELANA 143
4.2.1 NEGATIVKONTROLLEN MIT MELANA 156
4.3 IMMUNHISTOCHEMIE MIT S100 156
4.3.1 NEGATIVKONTROLLEN MIT S100 157
4.4 ABSCHLIESSENDE BEURTEILUNG DER IMMUNHISTOCHEMIE 158
4.5 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 158
4.5.1 BEURTEILUNG DER MELANOME MIT EINEM AMELANOTISCHEN
TEILBEREICH 158
4.5.1.1 PRAEPARAT E 579/09 158
4.5.1.2 PRAEPARAT E 1739/09 158
4.5.2 BEURTEILUNG DER RUNDZELLIGEN NEOPLASIE E 2137/09 160
IMAGE 8
VIII INHALTSVERZEICHNIS
5. DISKUSSION 161
5.1 IMMUNHISTOCHEMIE 161
5.1.1 HMB45 158 161
5.1.2 MELANA 167
5.1.3 S100 169
5.2 ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG 170
6. ZUSAMMENFASSUNG 173
7. SUMMARY 175
8. LITERATURVERZEICHNIS 177
9. HERSTELLERVERZEICHNIS 205
9.1 CHEMIKALIEN UND SONSTIGE MATERIALIEN 205
9.2 GERAETE 207
10. ANHANG 209 |
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