In vitro-Evaluation von rekombinanten E.coli Shigatoxoiden als Impfstoffkandidaten für Rinder:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2012
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | III, 127 S. |
| ISBN: | 9783835959170 |
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IMAGE 1
I I N H A L T
I INHALT
I INHALT I
II A B K UE R Z U N G S V E R Z E I C H N I S 1
III EINLEITUNG 4
IV LITERATURUEBERSICHT 6
1 SHIGATOXIN 6
1.1 V E R B R E I T U N G U N D P A T H O G E N I T AE T S H I G A T O X
I N - B I L D E N D E R E S C H E R I C H I A C O L I 6
1.2 S T R U K T U R D E S T O X I N S 8
1.3 S T X - R E Z E P T O R E N 9
1.4 M E C H A N I S M E N D E R S T X - W I R K U N G A U F Z E L L E N
U N D Z E L L U L AE R E R E A K T I O N E N 9
1.5 W I R K U N G M U T A G E N I S I E R T E R S H I G A T O X I N E 12
1.6 B E D E U T U N G D E S S T X F UE R D I E P A T H O G E N E S E E H
E C - B E D I N G T E R E R K R A N K U N G E N 13
1.7 S T X - W I R K U N G A U F Z E L L E N D E S I M M U N S Y S T E M
S 14
1.8 V E R L A U F E I N E R I N F E K T I O N M I T S T E C B E I M R I
N D 16
2 OPTIONEN ZUR BEHANDLUNG UND PRAEVENTION EHEC-BEDINGTER ERKRANKUNGEN 16
2.1 B E H A N D L U N G E H E C - I N F I Z I E R T E R M E N S C H E N
16
2.2 S U B U N I T - V A K Z I N E U N D T O X O I D - V A K Z I N E 18
2.3 K A N D I D A T E N A N T I G E N E F UE R E I N E I M P F U N G Z U
R V E R R I N G E R U N G D E R S T E C - A U S S C H E I D U N G B E I
M R I N D 19
3 ZIEL DIESER ARBEIT 23
V MATERIAL U N D M E T H O D E N 2 4
I. I A M P L I F I K A T I O N D E R S T X L - U N D
,S7;*:2-GENSEQUENZEN 2 4
1.2 K L O N I E R U N G D E R A M P L I F I Z I E R T E N T O X I N G E
N E 2 7
1.3 S E Q U E N Z I E R U N G 2 9
L .4 M U T A G E N I S I E R U N G D E R K L O N I E R T E N T O X I N G
E N E 2 9
1.5 A G A R O S E G E L E L E K T R O P H O R E S E 31
1.6 E X P R E S S I O N D E R M U T I E R T E N T O X I N G E N E 31
1.7 D E T O X I - G E I * E N D O T O X I N R E M O V I N G G E L 3 2
2 VEROZELL-ZYTOTOXIZITAETSTEST " 33
2.1 Z E L L L I N I E 3 3
2.2 D U R C H F U H R U N G 3 3
2.3 A U S W E R T U N G 3 4
I
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IMAGE 2
I I N H A L T
3 ELISA 3 8
3.1 D U R C H F U H R U N G D E S S T X - E L I S A 3 8
3 . 2 D U R C H F UE H R U N G D E S K O M P E T I T I V E N E L I S A 3
8
4 BERECHNUNG DER S T A M M L OE S U N G DER TOXINPRAEPARATIONEN 3 9
5 MONONUKLEAERE ZELLEN AUS D E M PERIPHEREM BLUT ( P B M C ) 4 0
5.1 I S O L A T I O N 4 0
5.2 I N K U B A T I O N M I T D E N T O X I N P R AE P A R A T I O N E N
4 1
5.3 I M M U N D E K O R A T I O N 4 1
5 . 4 A N A L Y S E S T R A T E G I E I M D U R C H F L U S S Z Y T O M
E T E R 4 3
6 LLEALE INTRAEPITHELIALE LYMPHOZYTEN (ILEL) 4 5
6.1 I S O L A T I O N 4 5
6 . 2 I M M U N D E K O R A T I O N U N D A N A L Y S E I M D U R C H F
L U S S Z Y T O M E T E R 4 6
6.3 I N K U B A T I O N M I T D E N T O X I N P R AE P A R A T I O N E N
4 7
6 . 4 Z E L L E R N T E F UE R R N A - G E W I N N U N G 4 7
6 . 5 R N A - G E W I N N U N G 4 7
7 MAKROPHAGEN 5 6
7.1 I S O L A T I O N D E R P E R I P H E R E N M O N O N U K L E AE R E
N Z E L L F R A K T I O N 5 6
7.2 G E N E R I E R U N G E I N E R M A K R O P H A G E N K U L T U R 5
7
7.3 I N K U B A T I O N M I T D E N T O X I N P R AE P A R A T I O N E N
5 8
7 . 4 I M M U N D E K O R A T I O N 5 8
7.5 A N A L Y S E S T R A T E G I E I M D U R C H F L U S S Z Y T O M E
T E R 5 8
7 . 6 R N A - G E W I N N U N G 5 9
8 STATISTISCHE AUSWERTUNG 6 0
V I ERGEBNISSE 61
1 HERSTELLUNG DER MUTAGENISIERTEN S T X L - UND S*2-GENE 61
2 HERSTELLUNG VON TOXINPRAEPARATIONEN ALS STAMMLOESUNGEN 61
2.1 Z Y T O T O X I Z I T AE T D E R A U S D E N S T X - T R A N S F O R
M A N T E N G E W O N N E N E N F R A K T I O N E N 6 2
2 . 2 E I G E N S C H A F T E N D E R T O X I N P R AE P A R A T I O N E
N 6 4
3 W I R K U N G DES RSTXWR U N D DES RSTX MU, A U F BOVINE P B M C 6 5
3.1 V I T A L I T AE T 6 7
3 . 2 A N T E I L U N D V I T A L I T AE T V O N P B M C - S U B P O P U
L A T I O N E N 6 8
3.3 S T X - R E Z E P T O R G B 3 / C D 7 7 7 1
4 W I R K U N G VON RSTXWI UND RSTX MU, A U F BOVINE I L E L 75
II
IMAGE 3
I
5 WIRKUNG VON RSTXWR UND RSTX MUT A U F BOVINE MAKROPHAGEN 7 6
5.1 VITALITAET 7 6
5.2 O B E R F L AE C H E N M A R K E R 7 7
5.3 T R A N S K R I P T I O N S R A T E V O N V E R S C H I E D E N E N
Z Y T O K I N E N / C H E M O K I N E N 8 0
6 UEBERPRUEFUNG DER ANTIGENITAET VON RSTXWR UND RSTX MUT 8 2
V I I D I S K U S S I O N 8 3
1.1 H E R S T E L L U N G D E R T O X I N E U N D T O X O I D E 8 3
1.2 W I R K U N G D E R T O X I N E U N D T O X O I D E A U F P B M C 8
5
1.3 W I R K U N G D E R T O X I N E U N D T O X O I D E A U F I N T R A
E P I T H E L I A L E L Y M P H O Z Y T E N D E S I L E U M S 8 9
1.4 W I R K U N G D E R T O X I N E U N D T O X O I D E A U F M A K R O
P H A G E N 9 0
1.5 A N T I G E N I T AE T U N D I M M U N O G E N I T AE T D E R T O X I
N E U N D T O X O I D E 9 2
1.6 M OE G L I C H E R E I N S A T Z D E R S H I G A T O X O I D E FUER I
M P F U N G E N IN R I N D E R B E S T AE N D E N 9 3
1.7 S C H L U S S F O L G E R U N G 9 7
VIII Z U S A M M E N F A S S U N G 9 8
I X S U M M A R Y 9 9
X LITERATURVERZEICHNIS 1 0 0
XI A N H A N G 112
1 UEBERSICHT UEBER BLUTSPENDERTIERE 112
2 UEBERSICHT UEBER VERWENDETE SEREN 112
3 UEBERSICHT UEBER VERWENDETE GERAETE, CHEMIKALIEN UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN 113
4 VERWENDETE PUFFER UND MEDIEN 119
4.1 P U F F E R , L OE S U N G E N U N D M E D I E N FUER Z E L L K U L T
U R T E C H N I K E N 119
4.2 P U F F E R F UE R D E N E L I S A 122
4 . 3 P U F F E R U N D L OE S U N G E N FUER P C R S 123
X I I ABBILDUNGSVERZEICHNIS 124
1 ABBILDUNGEN 124
2 TABELLEN 125
XIII D A N K S A G U N G 127
III |
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