Immunphänotypisierung von allogener und autofetaler Amnionmembran: Etablierung eines porcinen in-vivo-Modells
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DECKUNG VON GAUMENSPALTEN MIT FREMDMATERIAL 2
1.2 AMNIONMEMBRAN 3
1.2.1 HUMANE AMNIONMEMBRAN IM ALTERTUEMLICHEN VOLKSGLAUBEN 4
1.2.2 MIKROSKOPISCHE ANATOMIE 6
1.2.3 THERAPEUTISCH RELEVANTE EIGENSCHAFTEN 8
1.2.4 KONSERVIERUNG UND AUFBEREITUNG 11
1.2.5 BISHERIGE MEDIZINISCHE VERWENDUNG 12
2 PROBLEMSTELLUNG 14
3 MATERIAL UND METHODEN 16
3.1 TIERMODELL 16
3.1.1 SECTIO CAESAREA 17
3.1.2 REINIGUNG UND DESINFEKTION DES MUTTERTIERES 17
3.1.3 DURCHFUEHRUNG DER SECTIO CAESAREA UND GEWINNUNG DES AMNIONS 18
3.1.4 AUFBEREITUNG DES AMNIONS 19
3.2 TRANSPLANTATION FRISCHER AMNIONMEMBRANEN 20
3.2.1 MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 22
3.2.1.1 ISOLATION VON RNA UND PROTEINEN 22
3.2.1.2 QUANTITATIVE REAL-TIME RT-PCR 2 4
3.2.1.3 WESTERN BLOT 29
3.2.1.4 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 31
3.2.2 HISTOLOGISCHE ANALYSE 36
3.3 STATISTISCHE METHODEN 37
4 ERGEBNISSE 38
4.1 QUANTITATIVE REAL-TIME RT-PC R 38
4.2 WESTERN BLOT 4 4
4.3 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 4 7
4.4 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG 53
IV
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
5 DISKUSSION 61
5.1 DISKUSSION DES TIERMODELLS 61
5.2 DISKUSSION DER IMMUNOLOGISCHEN CHARAKTERISIERUNG 63
6 AUSBLICK 70
7 ZUSAMMENFASSUNG 71
8 LITERATURVERZEICHNIS 72
9 ANHANG 85
9.1 MESSWERTE RT-PCR 85
9.1.1 18S RRNA 85
9.1.2 IL-1B 91
9.1.3 TNF-A 97
9.1.4 CD3 103
9.1.5 CD4 109
9.1.6 CD8A 115
9.1.7 CD8B 121
9.2 MESSWERTE WESTERN BLOT 127
9.2.1 IL-1B 127
9.2.2 TNF-A 129
9.3 MESSWERTE DURCHFLUSSZYTOMETRIE 131
10 DANKSAGUNG 134
11 LEBENSLAUF 136
V
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