Wirkung elektromagnetischer Strahlung im blauen Bereich auf Fibroblasten und physiologische Parameter der Wundheilung:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2011
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adam_text | INHALT
ABKUERZUNGEN
........................................................................................................................................
IX
1
EINLEITUNG
....................................................................................................................................
1
1.1
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
DER
WUNDHEILUNG
..............................................................................
1
1.1.1
HAEMOSTASE
UND
ENTZUENDUNGSPHASE
......................................................................................
3
1.1.2
PROLIFERATIONSPHASE
...............................................................................................................
4
1.1.3
REPARATIONSPHASE
..................................................................................................................
5
1.2
FIBROBLASTEN,
MYOFIBROBLASTEN
UND
WUNDKONTRAKTION
..........................................................
6
1.2.1
MYOFIBROBLASTEN
-
DEFINITION,
URSPRUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
.......................................
6
1.2.2
DIFFERENZIERUNG
UND
EINFLUSSFAKTOREN
.................................................................................
8
1.2.3
MECHANISMEN
DER
WUNDKONTRAKTION
DURCH
MYOFIBROBLASTEN
...........................................
10
1.3
HYPERTROPHE
NARBEN
UND
KELOIDE
...........................................................................................
11
1.3.1
KLINIK
UND
MORPHOLOGISCHE
CHARAKTERISTIKA
......................................................................
11
1.3.2
HISTOLOGIE
UND
PATHOPHYSIOLOGIE
........................................................................................
12
1.3.3
THERAPIE
UND
NEUE
BEHANDLUNGSANSAETZE
............................................................................
14
1.4
LICHT
.............................................................................................................................................
16
1.4.1
ELEKTROMAGNETISCHE
STRAHLUNG
............................................................................................
16
1.4.2
UV-STRAHLUNG
......................................................................................................................
18
1.4.3
REAKTIVE
SAUERSTOFFSPEZIES
UND
SINGULAERER
SAUERSTOFF
......................................................
19
1.4.4
STICKSTOFFMONOXID
..............................................................................................................
20
1.4.5
WIRKUNG
VON
BLAUEM
LICHT
AUF
DIE
HAUT
...........................................................................
21
1.4.6
ANWENDUNG
VON
SICHTBAREM
LICHT
IN
DER
MEDIZIN
............................................................
25
2
FRAGESTELLUNG
.......................................................................................................................
28
3
MATERIAL
UND
METHODEN
..................................................................................................
29
3.1
MATERIAL
.......................................................................................................................................
29
3.2
ZELLKULTURTECHNIK
.......................................................................................................................
37
3.2.1
ISOLIERUNG
VON
FIBROBLASTEN
...............................................................................................
37
3.2.2
ZELLEN
PASSAGIEREN
..............................................................................................................
38
3.2.3
EINFRIEREN
UND
AUFLAUEN
VON
ZELLEN
..................................................................................
38
3.2.4
ERSTELLUNG
EINES
ZELLPOOLS
..................................................................................................
39
3.2.5
KULTIVIERUNG
DER
FIBROBLASTEN
............................................................................................
39
3.3
DURCHFUEHRUNG
DER
BESTRAHLUNG
...............................................................................................
40
3.4
ZYTOTOXIZITAET
DER
BESTRAHLUNG
................................................................................................
41
3.4.1
PRINZIP
DER
NEUTRALROTFAERBUNG
..........................................................................................
41
3.4.2
EINFACHER
TOXIZITAETSTEST
.....................................................................................................
41
3.4.3
BESTRAHLUNG
UND
BEHANDLUNG
MIT
WASSERSTOFFPEROXID
.....................................................
42
3.5
WACHSTUM
DER
FIBROBLASTEN
WAEHREND
TAEGLICHER
BESTRAHLUNG
.............................................
43
3.5.1
ZELLPROLIFERATIONSMESSUNG
MIT
DEM
ALAMARBLUE-ASSAY
...............................................
43
3.5.2
BESTRAHLUNG
UND
FAERBUNG
MIT
...........................................................................................
44
VI
3.6
EINFLUSS
DER
BESTRAHLUNG
AUF
DIE
AUSSCHUETTUNG
VON
ENTZUENDUNGSPARAMETERN
................
44
3.6.1
ENTZUENDUNGSINDUKTION,
BESTRAHLUNG
UND
PROBENENTNAHME
..............................................
44
3.6.2
PRINZIP
DES
ELISA
..............................................................................................................
45
3.6.3
DURCHFUEHRUNG
DES
R&D
DUOSET
ELISA
FUER
IL
1
UND
IL-8
.............................................
46
3.7
MESSUNG
DER
KOLLAGENPRODUKTION
NACH
BESTRAHLUNG
............................................................47
3.7.1
VORBEHANDLUNG
MIT
ASKORBAT
UND
TGF-SS
.........................................................................
47
3.7.2
DURCHFUEHRUNG
DES
KOLLAGEN-ASSAY
....................................................................................
48
3.8
IMMUNZYTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
DIFFERENZIERUNG
ZU
MYOFIBROBLASTEN
...............
49
3.8.1
BESTRAHLUNG
UND
BEHANDLUNG
MIT
TGF-SS
..........................................................................
49
3.8.2
NACHWEIS
VON
A-SMA
MITTELS
IMMUNZYTOCHEMIE
............................................................
49
3.8.3
FAERBEMETHODE
.......................................................................................................................
50
3.9
MESSUNG
DER
A-SMA-EXPRESSION
MITTELS
................................................................................
51
3.9.1
BESTRAHLUNG
UND
BEHANDLUNG
MIT
TGF-SS
...........................................................................
51
3.9.2
PROTEINGEWINNUNG
UND
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
........................................
51
3.9.3
PRINZIP
DER
WESTERN-BLOT-ANALYSE
.....................................................................................
52
3.9.4
DURCHFUEHRUNG
DER
WESTERN-BLOT-ANALYSE
UND
DER
IMMUNDETEKTION
................................
53
3.10
KULTIVIERUNG
DER
FIBROBLASTEN
IN
KOLLAGENGELEN
....................................................................
55
3.10.1
HERSTELLUNG
DER
KOLLAGENGELE
............................................................................................
55
3.10.2
BESTRAHLUNG
UND
BEHANDLUNG
MIT
TGF-SS
.........................................................................
56
3.10.3
MESSUNG
DER
GELKONTRAKTION
.............................................................................................
56
3.11
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.....................................................................
57
4
ERGEBNISSE
..................................................................................................................................
58
4.1
TOXISCHE
WIRKUNG
DER
BESTRAHLUNG
AUF
FIBROBLASTEN
...........................................................
58
4.2
EINFLUSS
DER
BESTRAHLUNG
AUF
DIE
TOXIZITAET
VON
WASSERSTOFFPEROXID
...................................
60
4.3
BEEINFLUSSUNG
DES
WACHSTUMS
VON
FIBROBLASTEN
DURCH
BESTRAHLUNG
.................................
61
4.4
IL-1
UND
IL-8-EXPRESSION
WAEHREND
TAEGLICHER
BESTRAHLUNG
.................................................
63
4.5
KOLLAGENPRODUKTION
NACH
BESTRAHLUNG
...................................................................................
65
4.6
EINFLUSS
DER
BESTRAHLUNG
AUF
DIE
DIFFERENZIERUNG
ZU
MYOFIBROBLASTEN
...........................
67
4.7
WIRKUNG
DER
BESTRAHLUNG
AUF
DAS
KONTRAKTIONSGEL-ASSAY
...................................................
73
5
DISKUSSION
..................................................................................................................................
76
5.1
VERAENDERUNG
VON
ZELLULAEREN
PARAMETERN
DURCH
BESTRAHLUNG
MIT
BLAUEM
LICHT
..............
76
5.1.1
TOXIZITAET
...............................................................................................................................
76
5.1.2
WACHSTUMSHEMMUNG
..........................................................................................................
79
5.1.3
ENTZUENDUNGSANTWORT
............................................................................................................
80
5.1.4
KOLLAGENPRODUKTION
.............................................................................................................
83
5.1.5
DIFFERENZIERUNG
ZU
MYOFIBROBLASTEN
..................................................................................
84
5.1.6
KONTRAKTILITAET
........................................................................................................................
86
5.2
DISKUSSION
DER
METHODE
.............................................................................................................
89
5.3
THERAPIEANSAETZE
UND
AUSBLICK
..................................................................................................
89
6
ZUSAMMENFASSUNG
................................................................................................................
93
VII
7
LITERATUR
...................................................................................................................................
95
DANKSAGUNG
..........................................................................................................................................
102
ERKLAERUNG
ZUR
DATENAUFBEWAHRUNG
...............................................................................
104
CURRICULUM
VITAE
.............................................................................................................................
105
|
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