Wege zur Th17-Zelldifferenzierung in vitro: = Pathways to Th17-T-Cell Differentiation in vitro
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2012
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INHALT 6
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 9
1.1 ORGANISATION DES IMMUNSYSTEMS 9
1.2 DAS ANGEBORENE IMMUNSYSTEM, DIE FRUEHE PHASE DER IMMUNREAKTION 10
1.2.1 ZELLEN DES ANGEBORENEN IMMUNSYSTEMS 10
1.2.2 DAS PRINZIP DER MUSTERERKENNUNG 10
1.2.3 MYD88-ABHAENGIGER UND MYD88-UNABHAENGIGER SIGNALWEG 13
1.2.4 TLR AUF T-ZELLEN 15
1.3 T-ZELLDIFFERENZIERUNG IM RAHMEN DES SPEZIFISCHEN IMMUNSYSTEMS 15
1.3.1 TH-ZELL-SUBTYPEN 16
1.3.2 ZYTOKINE ZUR DIFFERENZIERUNG VON TH17-ZELLEN 17
1.3.2.1 DIE POSITIVE REGULATION DER TH17-LMMUNANTWORT 18
1.3.2.2 DIE NEGATIVE REGULATION DER TH17-LMMUNANTWORT 19
1.3.2.3 EINFLUSS VON ERREGERN UND DEREN METABOLITEN
AUF DIE TH17-LMMUNANTWORT 19
1.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 20
2 MATERIAL UND METHODEN 21
2.1 MATERIAL 21
2.1.1 VERSUCHSTIERE 21
2.1.2 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 21
2.1.3 PUFFER UND LOESUNGEN 22
2.1.4 KITS 22
2.1.5 ENZYME 22
2.1.6 ANTIKOERPER/KONJUGATE 23
2.1.7 OLIGONUKLEOTIDE 23
2.1.8 VERBRAUCHSMATERIALIEN UND GERAETE 24
2.2 METHODEN 25
2.2.1 ISOLATION VON LYMPHKNOTENZELLEN 25
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IMAGE 2
INHALT 7
2.2.2 BESTIMMUNG DER LEBEND-ZELLZAHL 25
2.2.3 IN VITRO-ZELLKULTUR 25
2.2.4 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 26
2.2.5 INTRAZELLULAERE FAERBUNGEN 27
2.2.6 RNA-PRAEPARATION 27
2.2.7 HERSTELLUNG VON CDNA 28
2.2.8 QUALITATIVE PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) 29
2.2.9 AGAROSE GELELEKTROPHORESE 30
2.2.10 QUANTITATIVE REAL-TIME PCR (RT-PCR) 30
2.2.11 MATHEMATISCHE GRUNDLAGEN ZUR RELATIVEN QUANTIFIZIERUNG 31
2.2.12 MULTIPLEX ZYTOKIN ANALYSE 32
3 ERGEBNISSE 33
3.1 DIE ROLLE VON IL-7 UND IL-2 33
3.1.1 MESSUNGEN DER ZYTOKINPRODUKTION NACH IN VITRO-STIMULATION
MIT IL-7 UND IL-2 33
3.1.2 INDUKTION VON IL-17-PRODUKTION IN CD4-POSITIVEN ZELLEN 35
3.1.2.1 DIE ROLLE VON IL-7 UND IL-2 35
3.1.2.2 STIMULATION MIT LPS 38
3.1.3 INDUKTION VON IL-17-PRODUKTION IN CD4-NEGATIVEN ZELLEN 40
3.1.3.1 ROLLE VON IL-7 UND IL-2 40
3.1.3.2 STIMULATION MIT LPS 42
3.1.4 ZYTOKINPRODUKTION CD4-POSITIVER UND CD4-NEGATIVE
ZELLEN IM UEBERBLICK 44
3.2 INDUKTION DER IL-17-EXPRESSION DURCH STIMULATION MIT
DEN TLR-LIGANDEN LPS, ZYMOSAN UND PAM3CYS 48
4 DISKUSSION 51
4.1 DIE AUSWIRKUNG VON IL-7 AUF DIE TH17-ANTWORT 51
4.2 IL-2 53
IMAGE 3
INHALT 8
4.3 STIMULATION VON IL-17-PRODUKTION DURCH TLR 54
4.4 INDUKTION DER IL-17-PRODUKTION IM VERLAUF EINER INFEKTION UND
WAEHREND EINER CHRONISCHEN ENTZUENDUNG 56
4.5 IMPLIKATION DIESER ARBEIT FUER THERAPIEANSAETZE 58
5 ZUSAMMENFASSUNG 60
6 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 62
7 TABELLENVERZEICHNIS 62
8 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 63
9 LITERATURVERZEICHNIS 65
10 DANKSAGUNG 74
11 LEBENSLAUF 75
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