Untersuchungen zur Bedeutung neutrophiler Granulozyten bei der posttraumatischen Dysregulation des Tryptophanmetabolismus:
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2012
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 6
1.1. EINFUEHRUNG IN DIE THEMATIK 6
1.2. POLYTRAUMA - DEFINITION UND EPIDEMIOLOGIE 7
1.3. SIRS, SEPSIS UND ORGANVERSAGEN 7
1.4. IMMUNDYSREGULATION NACH MEHRFACHVERLETZUNG 9
1.5. NEUTROPHILE GRANULOZYTEN 11
1.6. TRYPTOPHANSTOFFWECHSEL NACH SCHWEREM TRAUMA 12
1.7. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 14
2. PATIENTEN, MATERIAL UND METHODEN 1 6
2.1. PATIENTEN 16
2.1.1. PATIENTENKOLLEKTIV 16
2.1.2. TRAUMA- UND INTENSIV-SCORES 17
2.2. MATERIAL 18
2.2.1. CHEMIKALIEN 18
2.2.2. LOESUNGEN UND PUFFER 20
2.2.3. ZELLKULTURMEDIEN UND MEDIEN 22
2.2.4. TESTANSAETZE 22
2.2.5. OLIGONUKLEOTIDE 23
2.2.6. ANTIKOERPER 24
2.2.7. ZYTOKINE 24
2.2.8. ENZYME 24
2.3. METHODEN 25
2.3.1. BLUTENTNAHME 25
2.3.2. ISOLATION POLYMORPHKERNIGER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN (PMN) AUS
VOLLBLUT 25
2.3.3. SERUM UND PLASMA 26
2.3.4. BESTIMMUNG VON ZYTOKINEN, PMN-ELASTASE UND MYELOPEROXIDASE (MPO)
MITTELS ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) 27
2.3.5. HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC) 28
2.3.6. BESTIMMUNG FREI ZIRKULIERENDER DESOXYRIBONUKLEINSAEURE (CF-DNA)
29
2.3.7. RIBONUKLEINSAEURE (RNA) - ISOLATION MITTELS TRIZOL 30
2.3.8. BESTIMMUNG DER RNA-KONZENTRATION 31
2.3.9. REVERSE TRANSKRIPTION 32
2.3.10. POLYMERASE-CHAIN-REACTION (PCR) 32
2.3.11. DESOXYRIBONUKLEINSAEURE (DNA)-GELELEKTROPHORESE 33
2.3.12. PROTEINISOLATION UND KONZENTRATIONSBESTIMMUNG 34
2.3.13. PROTEINELEKTROPHORESE 34
2.3.14. WESTERN BLOT 36
2.3.15. IMMUNMARKIERUNG 37
4
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IMAGE 2
2.3.16. INDOLAMIN 2,3-DIOXYGENASE (IDO) - AKTIVITAETSMESSUNG 38
2.4. STATISTIK 39
3. ERGEBNISSE 4 0
3.1. PATIENTENCHARAKTERISTIKA 40
3.1.1. KLINISCHE DATEN 40
3.1.2. UNFALLMECHANISMUS UND VERLETZUNGSMUSTER 43
3.1.3. INTENSIV-SCORES 44
3.2. IMMUNREAKTION NACH POLYTRAUMA 46
3.2.1. LEUKOZYTEN 46
3.2.2. ENTZUENDUNGSMEDIATOREN 47
3.2.3. NEUTROPHILEN-AKTIVITAET 50
3.3. TRYPTOPHAN UND KYNURENIN BEI SCHWERVERLETZTEN PATIENTEN 52
3.4. EXPRESSION VON INDOLAMIN 2,3-DIOXYGENASE IN NEUTROPHILEN 54
3.4.1. GENEXPRESSION 54
3.4.2 PROTEINEXPRESSION 56
3.5. ENZYMAKTIVITAETSTEST 57
4. DISKUSSION 5 9
4.1.PATIENTE N 59
4.2. IMMUNREAKTION UND TRAUMA 61
4.2.1. ZYTOKINE 62
4.2.2. NEUTROPHILEN-AKTIVITAET 64
4.3. TRYPTOPHANKATABOLISMUS NACH TRAUMA 65
4.4. INDOLAMIN 2,3-DIOXYGENASE-EXPRESSION NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 68
4.5. AUSBLICK 69
5. ZUSAMMENFASSUNG 7 0
6. LITERATURVERZEICHNIS 7 2
7. ANHANG 8 9
7.1. PUBLIKATION 89
7.2. ABKUERZUNGEN 90
7.3. DANKSAGUNG 92
7.4. EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 93
7.5. LEBENSLAUF 94
5
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