Holdings: Elektrogene Mechanismen der Permeation kurzkettiger Fettsäuren über das Pansenepithel

Elektrogene Mechanismen der Permeation kurzkettiger Fettsäuren über das Pansenepithel:

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Main Author:	Rackwitz, Reiko 1976- (Author)
Format:	Thesis Electronic Software eBook
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Subjects:	Hochschulschrift
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adam_text	INHALT ABKUERZUNGEN................................................................................................................................................ 1 1 EINLEITUNG ............................................................................................................................ 3 2 LITERATURUEBERSICHT ...................................................................................................... 5 2.1 A LLGEMEINE B EDEUTUNG KURZKETTIGER F ETTSAEUREN FUER DEN W IEDERKAEUER ................................. 5 2.2 E LEKTRONEUTRALE M ECHANISMEN DER SCFA-R ESORPTION ................................................................ 6 2.2.1 PARAZELLULAERE PERMEATION ..................................................................................................................... 6 2.2.2. TRANSZELLULAERE PERMEATION UNDISSOZIIERTER KURZKETTIGER FETTSAEUREN .................................................. 6 2.2.3. ELEKTRONEUTRALE MECHANISMEN DER APIKALEN AUFNAHME DISSOZIIERTER SCFA ................................ 10 2.2.4. KATABOLISMUS KURZKETTIGER FETTSAEUREN IM PANSENEPITHEL ................................................................. 11 2.2.5 ELEKTRONEUTRALE MECHANISMEN DER BASOLATERALEN AUSSCHLEUSUNG KURZKETTIGER FETTSAEUREN .......... 14 2.3 E LEKTROGENE M ECHANISMEN DER SCFA -P ERMEATION ........................................................................... 15 2.3.1 KANDIDATEN FUER EINE KANALVERMITTELTE ELEKTROGENE SCFA-LEITFAEHIGKEIT ........................................... 17 2.3.1.1 CFTR ..................................................................................................................................................................... 17 2.3.1.2 DIE CLC-FAMILIE .................................................................................................................................................. 19 2.3.1.3 MAXI-ANIONENKANAELE .......................................................................................................................................... 20 2.4 F RAGESTELLUNGEN DER VORLIEGENDEN A RBEIT ........................................................................................... 21 3 MATERIAL UND METHODEN .......................................................................................... 23 3.1 T IERE ......................................................................................................................................................................... 23 3.2 G EWINNUNG DER E PITHELIEN ............................................................. 23 3.3 I NKUBATION IN DER U SSING -K AMMER ............................................................................................................... 23 3.3.1 ALLGEMEINER ABLAUF ............................................................................................................................. 23 3.3.2 PUFFERLOESUNGEN ................................................................................................................................... 25 3.4 E LEKTROPHYSIOLOGISCHE P ARAMETER ...........................................................................................................26 3.4.1 OPEN-CIRCUIT ........................................................................................................................................ 26 3.4.2 TRANS EPITHELIALE GEWEBELEITFAEHIGKEIT G T ............................................................................................ 26 3.4.3 GRUPPIERUNG DER EPITHELIEN ............................................................................................................... 27 3.4.4 SHORT-CIRCUIT ........................................................................................................................................ 27 3.4.5 KLEMMEN DER PD T AUF 40 MV ........................................................................................................... 27 3.4.6 ERHOEHUNG DER ACETAT UND NITRATKONZENTRATION ................................................................................ 28 3.4.7 SUBSTANZEN ZUR MODIFIKATION DER ANIONENPERMEATION ...................................................................... 28 3.5 F LUX VON A CETAT UEBER DAS P ANSENEPITHEL ................................................................................................. 31 3.6 A UFNAHME VON A CETAT IN DAS E PITHEL (U PTAKE ) ...................................................................................... 33 3.6.1 ALLGEMEINER ABLAUF DER UPTAKE-STUDIEN ............................................................................................ 35 3.6.2 SCINTILLATIONSZAEHLUNG ......................................................................................................................... 36 3.6.3 PROTEINBESTIMMUNG ............................................................................................................................ 36 3.6.4 BERECHNUNG DER AUFNAHME VON ACETAT .............................................................................................. 37 3.7 A USWERTUNG UND S TATISTIK ............................................................................................................................. 37 3.8 . I MMUNHISTOCHEMIE ................................................................................................................................. 39 4 ERGEBNISSE .......................................................................................................................... 42 4.1 F LUXE VON A CETAT UEBER DAS P ANSENEPITHEI ............................................................................................... 42 4.1.1 EINFLUSS PD T AUF DIE UNIDIREKTIONALEN FLUXRATEN VON ACETAT ........................................................... 42 4.1.2 EINFLUSS DER ACETATKONZENTRATION AUF DIE FLUXRATEN ....................................................................... 45 4.2 A UFNAHME VON A CETAT IN DAS P ANSENEPITHEL (U PTAKE ) ....................................................................... 46 4.2.1 EINFLUSS VON NITRAT UND PD T AUF DIE APIKALE ACETATAUFNAHME ........................................................ 47 4.2.2 EINFLUSS DER HEMMSTOFFE DIDS UND NPPB AUF DIE APIKALE ACETATAUFNAHME ............................... 48 4.2.3 ZEITABHAENGIGKEIT DER ACETATAUFNAHME ..............................................................................................49 4.2.4 APIKALE UND BASOLATERALE ACETATAUFNAHME NACH DEPOLARISATION DER GEGENSEITE ............................. 50 4.2.5 EINFLUSS VON DIDS AUF DEN UPTAKE VON ACETAT NACH DEPOLARISATION DER GEGENSEITE ...................... 52 4.3 E LEKTROPHYSIOLOGISCHE M ESSUNGEN ........................................................................................................... 53 4.3.1 EINFLUSS EINER ZUGABE VON ACETAT UND NITRAT AUF I SC UND G T ............................................................ 53 4.3.2 EINFLUSS VON OUABAIN AUF ACETAT UND NITRATINDUZIERTE AENDERUNGEN VON G T UND I SC ...................... 57 4.3.3 EINFLUSS VON FORSKOLIN SOWIE EINER KOMBINATION VON FORSKOLIN UND OUABAIN AUF DIE ACETAT UND NITRATINDUZIERTEN AENDERUNGEN VON I SC UND G T ............................................................................................. 61 4.3.4 EINFLUSS VON NPPB AUF DIE ACETAT ODER NITRATINDUZIERTEN AENDERUNGEN VON I SC UND G T ................... 65 4.3.5 EINFLUSS VON PROTAMIN UND ZN 2 ^ AUF DIE ACETAT ODER NITRATINDUZIERTEN AENDERUNGEN VON I SC UND G T 68 4.3.6 EINFLUSS VON DIDS AUF I SC UND G T UNTER SHORT-CIRCUIT-BEDINGUNGEN ................................................ 71 4.3.7 EINFLUSS VON DIDS BEI VARIIERTER ELEKTRISCHER TRIEBKRAFT .................................................................. 75 4.4 . I MMUNHISTOCHEMIE ................................................................................................................................. 78 4.4.1. LOKALISATION DES CLC2 ...................................................................................................................... 78 4.4.2. LOKALISATION DES CFTR ...................................................................................................................... 79 4.5 Z USAMMENFASSUNG DER E RGEBNISSE ............................................................................................................... 80 5 DISKUSSION ............................................................................................................................ 82 5.1 G IBT ES EINE ELEKTROGENE K OMPONENTE DES SCFA-T RANSPORTES AM INTAKTEN P ANSENEPITHEL ? 5.1.1 DER ACETATFLUX WIRD DURCH DIE ELEKTRISCHE TRIEBKRAFT BEEINFLUSST ..................................................... 83 5.1.2 DIE AUFNAHME VON ACETAT IN DAS EPITHEL (UPTAKE) WIRD DURCH DIE ELEKTRISCHE TRIEBKRAFT NICHT BEEINFLUSST .................................................................................................................................................... 84 5.1.3 DIE ZUGABE VON SCFA FUEHRT ZUR AENDERUNG DER ELEKTROPHYSIOLOGISCHEN PARAMETER ........................ 85 5.2 K OENNTE DIE E LEKTROGENITAET AUCH AUF ANDERE I ONEN ALS A CETAT ZURUECKGEFUEHRT WERDEN ? 85 5.3 K ANN EINE PARAZELLULAERE A CETAT -P ERMEATION AUSGESCHLOSSEN WERDEN ? ................................. 87 5.3.1 ACETAT UEBERWINDET DAS PANSENEPITHEL TRANSZELLULAER ........................................................................... 87 5.3.2 DIE PERMEATION VON NITRAT HAT EINE PARAZELLULAERE KOMPONENTE ....................................................... 89 5.4 W ELCHER M ECHANISMUS LIEGT DER ELEKTROGENEN A CETATPERMEATION ZU G RUNDE ? ................ 90 5.5 WO IM E PITHEL IST DIE L EITFAEHIGKEIT LOKALISIERT ? ......................................................................... 92 5.5.1 SCHLUSSFOLGERUNGEN AUS DER WIRKUNG VON OUABAIN .......................................................................... 93 5.5.2 SCHLUSSFOLGERUNGEN AUS DER FORSKOLINWIRKUNG ................................................................................. 94 5.5.3 SCHLUSSFOLGERUNGEN AUS DEM EINFLUSS VON DIDS .............................................................................. 95 5.5.4 ANDERE ABLEITUNGEN DER LOKALISATION ................................................................................................ 96 5.6 B ASOLATERALER SCFA-T RANSPORT ................................................................................................................ 97 5.7 K ANDITATEN -P ROTEINE FUER DIE BEOBACHTETE A CETATLEITFAEHIGKEIT ............................................ 98 5.7.1 CFTR ................................................................................................................................................... 98 5.7.2 CLC2 ................................................................................................................................................. 100 5.7.3 MAXI-ANIONENKANAELE ...................................................................................................................... 100 5.7.4 OUTWARDLY-RECTIFYING-CHLORIDE-CHANNELS (ORCC) .......................................................................... 101 5.8 P HYSIOLOGISCHE B EDEUTUNG EINER APIKALEN SCFA-L EITFAEHIGKEIT AM P ANSENEPITHEL ........ 102 6 ZUSAMMENFASSUNG ....................................................................................................... 103 7 SUMMARY .............................................................................................................................. 106 8 LITERATURVERZEICHNIS ............................................................................................. 109 ANHANG ............................................................................................................................................................ 125 SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG ........................................................................................................... 126 LEBENSLAUF ................................................................................................................................................... 127 PUBLIKATIONEN............................................................................................................................................ 128 DANKE ............................................................................................................................................................... 130
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