Gezielte molekulare Therapie des Mantelzell-Lymphoms: In-vitro-Wirksamkeit von mTOR-Inhibitor RAD001 und PNP-Inhibitor Forodesin+dGUO in Mono- und Kombinationstherapie
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINFUEHRUNG 1
1.1. DAS MANTELZELL-LYMPHOM 1
1 . 1 . 2 MORPHOLOGIE UND IMMUNPHAENOTYPISIERUNG 2
1 . 1 . 3 ZYTOGENETIK UND MOLEKULARGENETIK 3
1 . 1 . 4 THERAPIEVERFAHREN 4
1 . 2 MAMMALIAN TARGET OF RAPAMYCIN ( M T O R ) 5
1.2.1 MTOR-LNHIBITOREN 7
1 . 2 . 1 . 1 WIRKUNGSPUNKTE UND FUNKTIONSWEISE 7
1 . 2 . 1 . 2 DER MTOR-LNHIBITOR R A D 0 0 1 8
1 . 3 DER PNP-INHIBITOR FORODESIN 8
2 ZIEL DIESER ARBEIT 10
3 MATERIALIEN DER ARBEIT 11
3.1 ZELLLINIEN-KLASSIFIZIERUNG 1 1
3 . 2 INHIBITOREN UND ZYTOSTATIKA 1 2
3 . 3 LOESUNGEN UND PUFFER 1 2
3 . 4 HILFSMITTEL UND GERATE 1 3
3 . 5 SOFTWARE UND E D V 1 3
4 METHODEN DER ARBEIT 14
4.1 ZELLKULTURARBEITEN 1 4
4 . 2 DERTRYPANBLAU-AUSSCHLUSS-TEST 1 4
4 . 3 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYSEN 1 5
4 . 3 . 1 FUNKTIONSWEISE DES DURCHFLUSSZYTOMETERS ( F A C S GERAET) 1 5
4 . 3 . 2 ZELLZYKLUSANALYSE MIT PROPIDIUMIODID-FAERBUNG 1 5
4 . 3 . 3 FACS-ANALYSE DER APOPTOSE MIT ANNEXIN V - P E - UND
7-AAD-FAERBUNG 1 6
4 . 4 BERECHNUNG DER FRACTION OF PRODUCT 1 7
4 . 5 STATISTISCHE AUSWERTUNGEN 1 8
5 ERGEBNISSE 19
5.1 PROLIFERATIONSHEMMUNG DURCH DEN MTOR-INHIBITOR R A D 0 0 1 1 9
5 . 2 INDUKTION EINES ZELLZYKLUSARRESTS VON MCL-ZELLLINIEN DURCH R A D 0
0 1 2 2
5 . 3 APOPTOSEVERHALTEN VON M C L - UND T - A L L ZELLLINIEN NACH DER
BEHANDLUNG MIT R A D 0 0 1 . . 2 3
5 . 4 KOMBINATION VON R A D 0 0 1 MIT KONVENTIONELLER CHEMOTHERAPIE UND
MOLEKULAREN ANSAETZEN 2 5
5 . 4 . 1 KOMBINATION VON R A D 0 0 1 UND CYTARABIN 2 6
5 . 4 . 2 KOMBINATION VON F I A D 0 0 1 UND BENDAMUSTIN 2 6
5 . 4 . 3 KOMBINATION VON R A D 0 0 1 UND FLUDARABIN 2 7
5 . 4 . 4 KOMBINATION VON R A D 0 0 1 UND BORTEZOMIB 2 8
5 . 4 . 5 KOMBINATION VON R A D 0 0 1 UND ENZASTAURIN 2 8
5 . 5 AUSWIRKUNG AUF DEN ZELLZYKLUS UND APOPTOSE DURCH R A D 0 0 1 IN
KOMBINATION MIT
BENDAMUSTIN, BORTEZOMIB UND FLUDARABIN 2 9
5 . 5 . 1 ZELLZYKLUSANALYSE 2 9
5 . 5 . 2 APOPTOSEANALYSE 3 1
5 . 6 PROLIFERATIONSHEMMUNG DURCH DEN PNP-INHIBITOR FORODESIN+DGUO 3 2
5 . 7 AUSWIRKUNG AUF DEN ZELLZYKLUS DURCH FORODESIN+DGUO 3 3
5 . 8 APOPTOSEVERHALTEN VON M C L - UND T-ALL-ZELLLINIEN NACH DER
BEHANDLUNG MIT
FORODESIN+DGUO 3 4
5 . 9 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO MIT KONVENTIONELLER CHEMOTHERAPIE
UND MOLEKULAREN
ANSATZEN 3 5
5 . 9 . 1 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND CYTARABIN 3 6
5 . 9 . 2 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND BENDAMUSTIN 3 6
5 . 9 . 3 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND FLUDARABIN 3 7
5 . 9 . 4 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND BORTEZOMIB 3 8
5 . 9 . 5 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND ENZASTAURIN 3 8
5 . 9 . 6 KOMBINATION VON FORODESIN+DGUO UND R A D 0 0 1 3 9
I
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IMAGE 2
6 DISKUSSION 40
6.1 WIRKUNG VON R A D 0 0 1 AUF HUMANE MANTELZELL-LYMPHOM-ZELLLINIEN 4 0
6 . 2 WIRKUNG VON FORODESIN+DGUO AUF HUMANE
MANTELZELL-LYMPHOM-ZELLLINIEN 4 5
7 ZUSAMMENFASSUNG 50
8 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 53
9 LITERATURVERZEICHNIS 55
10 DANKSAGUNG 62
II
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