Die Expression humoraler und zellulärer Immunreaktionen bei Drohnenlarven und adulten Drohnen der Honigbiene (Apis mellifera):
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1 DIE HONIGBIENE, EIN EUSOZIALES INSEKT 1
1.2 KRANKHEITEN UND PATHOGENE DER HONIGBIENE 5
1.2.1 VARROA DESTRUCTOR 5
1.2.2 BIENENVIREN 6
1.2.3 BAKTERIELLE PATHOGENE DER HONIGBIENE 6
1.2.4 NOSEMA 7
1.2.5 DIE KALKBRUT - EINE PILZERKRANKUNG DER HONIGBIENE 8
1.3 DAS IMMUNSYSTEM DER HONIGBIENE 9
1.3.1 DAS HUMORALE IMMUNSYSTEM 10
1.3.2 DAS PROPHENOLOXIDASE AKTIVIERENDE SYSTEM ;. 10
1.3.3 DAS ZELLULAERE IMMUNSYSTEM 11
1.4 WESPEN 12
1.5 WILDBIENEN-SOLITAERBIENEN 14
1.5 HUMMELN 16
1.6 AUFGABENSTELLUNG DER ARBEIT 17
2. MATERIALIEN 18
2.1 VERWENDETE BIENEN UND ANDERE HYMENOPTEREN 18
2.2 BAKTERIENSTAEMME UND MEDIEN FUER DIE BAKTERIENKULTUR 18
2.3 CHEMIKALIENLISTE 19
2.4 PUFFER UND MOLEKULARE LAENGENSTANDARDS 2 1
2.5 GERAETE UND SONSTIGE MATERIALIEN 22
2.6 ANTIKOERPER 25
3. METHODEN 26
3.1 IN VITRO AUFZUCHT VON BIENENLARVEN 26
3.2 INJEKTION IMMUNSTIMULIERENDER SUBSTANZEN BEI LARVEN,
ARBEITERINNEN UND DROHNEN 27
3.2.1 VORBEREITEN VON BAKTERIEN FUER DIE INFEKTION 27
3.2.2 DIE INJEKTION IMMUNSTIMULIERENDER SUBSTANZEN 27
3.3 DIE ENTNAHME VON HAEMOLYMPHE BEI LARVEN, ARBEITERINNEN UND DROHNEN
29
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IMAGE 2
3.4 VERSUCHE MIT DROHNENPUPPEN 29
3.5 DIE HALTUNG VON BIENEN WAEHREND EINES VERSUCHES 30
3.6 VERSUCHE MIT HUMMELN, MAUERBIENEN UND WESPEN 3 1
3.6.1 HUMMELN (BOMBUS TERRESTRIS) 3 1
3.6.2 WESPEN (VESPIDAE) 3 1
3.6.3 MAUERBIENEN (OSMIA) 3 1
3.7 DENATURIERENDE POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) 32
3.7.1 DISKONTINUIERLICHE SDS-PAGE 32
3.7.2 DAS LAEMMLI PUFFERSYSTEM (LAEMMLI, 1970) 34
3.7.3 TRICINE-PUFFERSYSTEM (SCHAEGGER UND JAGOW, 1987) 34
3.7.4 FAERBEMETHODEN 35
3.7.4.1 COOMASSIE-BLAU R250-FAERBUNG 35
3.7.4.2 KOLLOIDALE COOMASSIE-BLAU G250 - FAERBUNG 35
3.8 WESTERN BLOT (IMMUNOBLOT) 36
3.8.1 UEBERTRAGEN VON PROTEINEN AUF EINE PVDF-MEMBRAN
(SEMI-DRY WESTERN BLOT) 36
3.8.2 IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS MEMBRANGEBUNDENER PROTEINE
MITTELS ANTIKOERPERFAERBUNG 37
3.8.3 STRIPPING VON WESTERN BLOT MEMBRANEN 38
3.9 HEMMHOFTEST (DURCH AGARDIFFUSION) 38
3.10 ZWEIDIMENSIONALE-GELELEKTROPHORESE 39
3.10.1 DIE ISOELEKTRISCHE FOKUSSIERUNG (ERSTE DIMENSION) 39
3.10.2 AEQUILIBRIERUNG 39
3.10.3 ZWEITE DIMENSION (SDS-PAGE) 40
3.10.4 BESTIMMUNG VON PROTEINKONZENTRATIONEN NACH BRADFORD (1976) 4 1
3.11 NACHWEIS VON NODULI BEI INFIZIERTEN LARVEN UND ADULTEN BIENEN 42
3.11.1 PRAEPARATION VON LARVEN 42
3.11.2 PRAEPARATION VON ADULTEN BIENEN 42
3.12 ABNAHME KOLONIEBILDENDER EINHEITEN NACH EINER BAKTERIELLEN
INFEKTION 43
3.13 DIE INFEKTION MIT NOSEMA 44
II
IMAGE 3
4. ERGEBNISSE 45
4.1 IN VITRO AUFZUCHT VON DROHNENLARVEN 45
4.1.1 ETABLIERUNG DER LARVEN AUF ZU CHT FUER DROHNENLARVEN 45
4.1.2 AUFZUCHT DER DROHNENLARVEN BIS ZUM ADULTEN DROHN 46
4.1.3 WACHSTUMSKURVE VON DROHNENLARVEN WAEHREND DER IN VITRO AUFZUCHT 46
4.1.4 DIE PROTEINZUSAMMENSETZUNG DER HAEMOLYMPHE VON
DROHNENLARVEN WAEHREND DER LARVALENTWICKLUNG 49
4.2 HUMORALE IMMUNREAKTIONEN VON DROHNENLARVEN 52
4.2.1 PROTEINANALYSE DER HAEMOLYMPHE VON DROHNENLARVEN NACH
BAKTERIELLER INFEKTION 52
4.2.2 DIE EXPRESSION ANTIBAKTERIELLER PEPTIDE IN DER HAEMOLYMPHE
VON DROHNENLARVEN NACH INJEKTION UNTERSCHIEDLICHER ELIZITOREN 54
4.2.3 ABNAHME KOLONIEBILDENDER EINHEITEN NACH BAKTERIELLER INFEKTION
IN DER HAEMOLYMPHE VON DROHNENLARVEN 56
4.3 DROHNENPUPPEN: UEBERGANG ZWISCHEN LARVEN UND ADULTEN DROHNEN 57
4.3.1 PROTEINANALYSE DER HAEMOLYMPHE VON DROHNENPUPPEN 57
4.3.2 DIE AUSWIRKUNG EINER E.COLI INFEKTION AUF DROHNENPUPPEN 59
4.4 INFEKTIONSVERSUCHE MIT ADULTEN DROHNEN 63
4.4.1 PROTEINANALYSE DER HAEMOLYMPHE ADULTER NICHT INFIZIERTER DROHNEN
63
4.4.2 ANALYSE DES PROTEINMUSTERS DER HAEMOLYMPHE ADULTER DROHNEN
NACH INFEKTION 66
4.4.3 ABNAHME KOLONIEBILDENDER EINHEITEN NACH BAKTERIELLER INFEKTION
BEI ADULTEN DROHNEN 74
4.4.4 VERGLEICH DER HAEMOLYMPHPROTEINE VON LARVEN UND ADULTEN DROHNEN 75
4.5 DIE HUMORALE IMMUNANTWORT VERSCHIEDENER HYMENOPTEREN 78
4.5.1 VERSUCHE MIT DER ERDHUMMEL BOMBUS TERRESTRIS 78
4.5.2 UNTERSUCHUNGEN AN DER SAECHSISCHEN WESPE (DOLICHOVESPULA SAXONICA)
8 1
4.5.3 VERSUCHE MIT DER DEUTSCHEN WESPE VESPULA GERMANICA 82
4.5.4 VERSUCHE MIT MAUERBIENEN (GATTUNG OSMIA) 84
4.5.5 VERGLEICH DER IMMUNANTWORT VON BOMBUS TERRESTRIS, APIS MELLIFERA
UND VESPULA GERMANICA 86
III
IMAGE 4
4.6 NODULATION - T E I L DER ZELLULAEREN IMMUNANTWORT IN DER HONIGBIENE
87
4.6.1 NODULATIONSREAKTIONEN VON LARVEN 87
4.6.2 NODULATIONSREAKTIONEN VON ARBEITERINNEN 89
4.6.3 ABWESENHEIT VON NODULATIONSREAKTIONEN BEI WINTERBIENEN 92
4.6.4 NODULATIONSREAKTIONEN VON ADULTEN DROHNEN 95
4.6.5 VERGLEICH DER NODULATIONSREAKTION VON ARBEITERINNEN UND DROHNEN 98
4.6.6 NODULATIONSREAKTIONEN VON KOENIGINNEN 99
4.7 NOSEMA ALS COFAKTOR BEI EINER BAKTERIELLEN INFEKTION 100
4.8 GLUCOSEKONZENTRATION IN DER HAEMOLYMPHE VON DER HONIGBIENE 102
5. DISKUSSION 103
5.1 STRATEGIEN DER PATHOGENABWEHR BEI HONIGBIENEN 103
5.2 DROHNENLARVEN 104
5.2.1 IN VITRO AUFZUCHT VON DROHNENLARVEN 104
5.2.2 DIE HAEMOLYMPHE NICHT INFIZIERTER LARVEN UND IHRE BESONDERHEITEN
106
5.3 DROHNENLARVEN REAGIEREN MIT STARKER HUMORALER UND
SCHWACHER ZELLUAERER IMMUNANTWORT AUF BAKTERIELLE INFEKTIONEN 107
5.4 DROHNENPUPPEN BESITZEN KEINE IMMUNKOMPETENZ 109
5.5 ADULTE DROHNEN ZEIGEN EINE STARKE HUMORALE UND EINE
STARKE ZELLULAERE IMMUNANTWORT 113
5.5.1 DAS HAEMOLYMPHPROTEINMUSTER ADULTER DROHNEN VARIIERT MIT DEM
ALTER... 113
5.5.2 DIE LEBENSLANGE, STARKE IMMUNANTWORT VON ADULTEN DROHNEN 113
5.6 NODULATION, EINE WICHTIGE KOMPONENTE DER ZELLULAEREN IMMUNANTWORT 116
5.7 ZELLULAERE IMMUNREAKTIONEN ERFOLGEN VOR HUMORALER IMMUNANTWORT 118
5.8 ENTWICKLUNGSSPEZIFISCHE IMMUNKOMPETENZ 121
5.9 DIE IMMUNANTWORT VON ARBEITERINNEN UND DROHNEN DER HONIGBIENE
IM VERGLEICH 122
5.10 HUMMELN BESITZEN EINE AEHNLICHE IMMUNABWEHR WIE HONIGBIENEN 124
5.11 SOZIALE WESPEN UND SOLITAERE WILDBIENEN ZEIGEN
KAUM ODER KEINE HUMORALE IMMUNITAET 125
5.12 OCLP1, EIN ANIMALES PEPTIDTOXIN (APT) MIT ANTIMIKROBIELLEN
EIGENSCHAFTEN 126
5.13 NOSEMA, EINE DARMERKRANKUNG ADULTER BIENEN 128
IV
IMAGE 5
6. ZUSAMMENFASSUNG 129
7. SUMMARY 132
8. LITERATURVERZEICHNIS 135
9. ANHANG 147
9.1 HAEMOLYMPHPROTEINE VON HONIGBIENENDROHNEN 147
9.2 STATISTIK ZUM VERGLEICH DER NODULIGROESSE BEI DER HONIGBIENE 154
9.3 ALIGNMENT VON OCLP 1 PROTEINSEQUENZEN BEI HYMENOPTEREN 155
9.4 IRP42 156
10. PUBLIKATIONEN 157
11. LEBENSLAUF 159
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| spelling | Gätschenberger, Heike 1980- Verfasser (DE-588)102485471X aut Die Expression humoraler und zellulärer Immunreaktionen bei Drohnenlarven und adulten Drohnen der Honigbiene (Apis mellifera) von Heike Gätschenberger Expression of humoral and cellular immune reactions of dronelarvae and adult drones of the honey bee (Apis mellifera) 2012 VIII, 159 Bl. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Zsfassung in dt. und engl. Sprache Würzburg, Univ., Diss., 2012 Biene (DE-588)4025825-7 gnd rswk-swf Drohne (DE-588)4243514-6 gnd rswk-swf Humorale Immunität (DE-588)4160794-6 gnd rswk-swf Zelluläre Immunität (DE-588)4197656-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Humorale Immunität (DE-588)4160794-6 s Zelluläre Immunität (DE-588)4197656-3 s Drohne (DE-588)4243514-6 s Biene (DE-588)4025825-7 s DE-604 Erscheint auch als Online-Ausgabe urn:nbn:de:bvb:20-opus-71960 https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:bvb:20-opus-71960 Resolving-System kostenfrei Volltext DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=025205168&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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