Protumorale Wirkung von Tumor-Nekrose-Faktor Alpha auf pankreatische duktale Adenokarzinom-Zelllinien:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2011
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| Beschreibung: | 72 S. Ill., graph. Darst. 21 cm |
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
................................................................................
5
1
EINLEITUNG
...................................................................................................
8
1.1
DAS
PANKREASKARZINOM
................................................................................
8
1.2
FAKTOREN,
DIE
ZUR
MALIGNITAET
EINES
TUMORS
BEITRAGEN
..................................
9
1.2.1
MATRIXMETALLOPROTEINASEN
(MMP)
......................................................
10
1.2.2
UROKINASE-TYP
PLASMINOGEN
AKTIVATOR
(UPA)....................................
11
1.2.3
LNTERLEUKIN-8
(IL-8)
..............................................................................
11
1.2.4
NUKLEAERER
TRANSKRIPTIONSFAKTOR
KAPPA
B
(NF
K
B)
..............................
12
1.2.5
AKTIVATOR
PROTEIN-1
(AP-1
)
.................................................................
12
1.3
TUMOR
NEKROSE
FAKTOR
(TNF)
.......................................................................
13
1.3.1
DAS
ZYTOKIN
TUMOR
NEKROSE
FAKTOR
ALPHA
(TNFA)
...........................
13
1.3.2
DIE
TUMOR
NEKROSE
FAKTOR-REZEPTOREN
............................................
14
1.3.2.1
SIGNALTRANSDUKTION
VON
TNF-REZEPTORTYP
1
.......................
15
1.3.2.2
SIGNALTRANSDUKTION
VON
TNF-REZEPTOR
TYP
2
.......................
19
1.4
PANKREASKARZINOM
UND
TNFA
........................................................................
20
1.5
FRAGESTELLUNG
..................................................................................................
21
2
MATERIAL
UND
METHODEN
......................................................................
22
2.1
GERAETE
UND
LABORMATERIALIEN
.........................................................................
22
2.2
CHEMIKALIEN,
ZELLKULTURMEDIEN
UND
ZUSAETZE
..................................................
23
2.3
KITS
..................................................................................................................
25
2.4
BIOLOGISCHE
REAGENZIEN:
TNFA,
TNF60,
TNF80,
INFLIXIMAB
UND
ETANERCEPT
.....................................................................................................
26
2.5
ZELLLINIEN
.........................................................................................................
26
2.6
ZELLKULTUR
.........................................................................................................
27
2.6.1
KULTIVIEREN
UND
PASSAGIEREN
DER
ZELLEN
............................................
27
2.6.2
AUSSAAT
DER
ZELLEN
FUER
VERSUCHE
......................................................
27
2.6.3
ZELLZAEHLUNG
........................................................................................
27
2.7
ZELLWACHSTUMSBESTIMMUNG
.........................................................................
28
2.7.1
ERMITTLUNG
DES
ZELLWACHSTUMS
MITTELS
ZELLZAEHLUNG
..........................
28
2.7.2
[
3
H]THYMIDIN-EINBAU
IN
DIE
DNA
ALS
MASS
FUER
PROLIFERATION
...............
28
2.8
BESTIMMUNG
DER
VITALITAET
............................................................................
29
2.8.1
DNA-FRAGMENTIERUNGSUNTERSUCHUNG
(JAM-ASSAY)
..........................
29
2.8.2
KRISTALLVIOLETTFAERBUNG
..........................................................................
30
2.9
UNTERSUCHUNG
DER
INVASIVITAET
VON
TUMORZELLEN
(INVASIONSASSAY)
...............
31
2.10
ENZYME-LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
..........................................
31
2.10.1
PRINZIP
DES
ELISA
..............................................................................
31
2.10.2
UROKINASE-TYP
PLASMINOGEN
AKTIVATOR
(UPA)
UND
INTER
LEUKIN-8
(IL-8)-ELISA
.........................................................................
32
2.10.3
TNFA-ELISA
HOHER
SENSITIVITAET
..........................................................
33
2.11
GELATINE-ZYMOGRAPHIE
...................................................................................
34
2.12
ELECTROPHORETIC
MOBILITY
SHIFT
ASSAY
(EMSA)
................................................
35
2.12.1
PROBENGEWINNUNG
..............................................................................
35
2.12.1.1
GEWINNUNG
NUKLEAERER
EXTRAKTE
..............................................
35
2.12.1.2
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
DER
EXTRAKTE
.............
36
2.12.2
DURCHFUEHRUNG
DES
EMSA
...................................................................
36
2.12.2.1
HERSTELLEN
RADIOAKTIV
MARKIERTER
OLIGONUKLEOTIDE
..................
37
2.12.2.2
INKUBATION
DER
OLIGONUKLEOTIDE
MIT
DEN
PROTEINEXTRAKTEN..
..38
2.12.2.3
GELELEKTROPHORESE
..................................................................
38
2.12.2.4
AUTORADIOGRAPHIE
....................................................................
38
3
ERGEBNISSE
.................................................................................................
40
3.1
EINFLUSS
VON
TNFA
AUF
DAS
WACHSTUM
VON
PDAC-ZELLEN
...........................40
3.2
TNFA
INDUZIERT
DIE
SEZEMIERUNG
VON
UPA,
IL-8
UND
MMP-9
BEI
PDAC-ZELLEN
..................................................................................................
43
3.3
TNFA
STEIGERT
DIE
INVASIVITAET
VON
PDAC-ZELLEN
...........................................
47
3.4
BXPC3-,
COLO357
UND
PANCTUL-ZELLEN
SEZEMIEREN
TNFA
.........................
49
3.5
ETANERCEPT
ODER
INFLIXIMAB
INHIBIEREN
WIRKSAM
TNFA-VERMITTELTE
EFFEKTE...
49
3.6
WACHSTUM
VON
PDAC-ZELLEN
UNTER
INHIBITION
VON
ENDOGENEM
TNFA
.......
50
3.7
HEMMUNG
VON
ENDOGENEM
TNFA
VERMINDERT
DIE
KONSTITUTIVE
SEZEMIERUNG
VON
UPAUND
IL-8
BEI
PDAC-ZELLEN
.......................................
51
3.8
TNFA-LNHIBITOREN
VERAENDERN
NICHT
DIE
INVASIVITAET
VON
PDAC-ZELLEN
IN
VITRO
......................................................................................
53
3.9
AKTIVITAET
VON
NF
K
B
UND
AP-1
UNTER
INHIBITION
VON
ENDOGENEM
TNFA
BEI
PDAC-ZELLEN
............................................................................................
53
4
DISKUSSION
...................................................................................................
55
4.1
WIRKUNG
VON
EXOGENEM
TNFA
AUF
PDAC-ZELLEN
.........................................
55
4.2
WIRKUNG
VON
ENDOGENEM
TNFA
AUF
PDAC-ZELLEN
.......................................
58
4.3
FAZIT
UND
AUSBLICK
.........................................................................................
61
5
ZUSAMMENFASSUNG
..................................................................................64
6
LITERATURVERZEICHNIS
............................................................................
66
DANKSAGUNG
........................................................................................................
71
LEBENSLAUF
..........................................................................................................
72
|
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