Immunhistochemische und molekulargenetische Charakterisierung von Plattenepithelkarzinomen der Harnbalse sowie Urothelkarzinomen mit teils plattenepithelialer Differenzierung:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2011
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
....................................................................................................................
1
1.1
DAS
PLATTENEPITHELKARZINOM/UROTHELKARZINOM
DER
HARNBLASE
MIT
PLATTENEPITHELIALER
DIFFERENZIERUNG
........................................................................
1
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE
................................................................................................
2
1.1.2
AETIOPATHOGENESE
...........................................................................................
4
1.1.3
PATHOLOGIE
.....................................................................................................
8
1.1.4
KLINIK
.............................................................................................................
13
1.1.5
DIAGNOSTIK
.....................................................................................................
13
1.1.6
THERAPIE
......................................................................................................
15
1.1.7
PROGNOSE
UND
PRAEVENTION
............................................................................
16
1.2
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.......................................................................................
17
2
MATERIAL
UND
METHODEN
...........................................................................................
19
2.1
HARNBLASENMAPPING
VON
ZYSTEKTOMIEPRAEPARATEN
..............................................
19
2.1.1
PATIENTENKOLLEKTIV,
ZYSTEKTOMIE,
ZUSCHNITT,
EINBETTUNG
UND
DIAGNOSTIK
....19
2.2
MIKRODISSEKTION
...................................................................................................
21
2.2.1
MATERIALVORBEREITUNG,
ENTPARAFFINIERUNG
UND
FAERBUNG
................................
21
2.2.2
MANUELLE
MIKRODISSEKTION
............................................................................
22
2.3
NUKLEINSAEURE-EXTRAKTION
(DNA-EXTRAKTION)
........................................................
24
2.3.1
GRUNDPRINZIP
DER
DNA-ISOLIERUNG
...............................................................
24
2.3.2
GERAETE,
MATERIAL
UND
LOESUNGEN
...................................................................
25
2.3.3
DURCHFUEHRUNG
(QIAAMP
DNA
MINI-KIT,
QIAAMP
DNA
MICRO-KIT)
.................
25
2.4
DNA-QUANTIFIZIERUNG
MITTELS
NANODROP
ND-1000
..........................................
28
2.4.1.1
GERAETEAUFBAU
UND
GRUNDPRINZIP
.........................................................
28
2.4.1.2
DURCHFUEHRUNG
.......................................................................................
29
2.5
P53-MUTATIONSANALYSE
.......................................................................................
30
2.5.1
STANDARD-PCR
(POLYMERASE
CHAIN
REACTION)
...........................................
30
2.5.1.1
GRUNDPRINZIP
DER
PCR
.........................................................................
30
2.5.1.2
GERAETE
UND
MATERIAL
.............................................................................
32
2.5.1.3
DURCHFUEHRUNG
........................................................................................
32
2.5.2
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
VON
PCR-PRODUKTEN
.....................................
34
2.5.2.1
GRUNDPRINZIP
DER
ELEKTROPHORESE
..........................................................
34
2.5.2.2
GERAETE
UND
LOESUNGEN
...........................................................................
35
2.5.2.3
DURCHFUEHRUNG
........................................................................................
35
2.5.2.4
INTERPRETATION
DER
GELE
..........................................................................
36
2.5.3
PEG-FAELLUNG
ZUR
AUFREINIGUNG
DES
PCR-PRODUKTS
....................................
37
2.5.4 DNA-SEQUENZIERUNG
FUER
P53-MUTATIONSANALYSEN
......................................
38
2.5.4.1
GRUNDPRINZIP
.........................................................................................
38
2.5.4.2
GERAETE
UND
MATERIAL
..............................................................................
39
2.5.4.3
DURCHFUEHRUNG
........................................................................................
40
2.5.4.4 AUFREINIGUNG
DES
PCR-PRODUKTS
..........................................................
41
2.5.5
BASENSEQUENZDETEKTION
MITTELS
ABI
PRISM
TM310
GENETIC
ANALYZER
......
41
2.5.5.1
GRUNDPRINZIP
.........................................................................................
42
2.5.5.2 VORBEHANDLUNG
DER
PROBEN
..................................................................
43
2.5.5.3
AUSWERTUNG
...........................................................................................
43
2.6
KONSTRUKTION
VON
TISSUE
MICRO
ARRAYS
...............................................................
47
2.6.1
GRUNDPRINZIP
...............................................................................................
47
2.6.2
GERAETE
........................................................................................................
47
2.6.3
TMA-AUFBAU
...............................................................................................
47
2.7
IMMUNHISTOCHEMIE
.............................................................................................
49
2.7.1
GRUNDPRINZIP
...............................................................................................
49
2.7.2
DURCHFUEHRUNG
..............................................................................................
55
2.7.3
AUSWERTUNG
UND
INTERPRETATION
..................................................................
57
2.8
HPV-TYPISIERUNG
................................................................................................
58
2.8.1
GRUNDPRINZIP
...............................................................................................
58
2.8.2
MATERIAL
.......................................................................................................
59
2.8.3
DURCHFUEHRUNG
..............................................................................................
59
2.8.4
AUSWERTUNG
UND
INTERPRETATION
..................................................................
62
3
ERGEBNISSE
...............................................................................................................
63
3.1
IMMUNHISTOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
VON
PLATTENEPITHELIALER
DIFFERENZIERUNG
IN
HARNBLASENTUMOREN
...............................................................
63
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DES
PATIENTENKOLLEKTIVS
........................................................
77
3.3
ASSOZIATION
VON
PLATTENEPITHELIALER
DIFFERENZIERUNG
MIT
HPV-LNFEKTIONEN
........
81
3.4
ASSOZIATION
VON
PLATTENEPITHELIALER
DIFFERENZIERUNG
MIT
P53-MUTATIONEN
.........
85
4
DISKUSSION
...............................................................................................................
90
4.1
DISKUSSION
DER
IMMUNHISTOCHEMIE
....................................................................
91
4.2
DISKUSSION
DER
HPV-TYPISIERUNG
.......................................................................
94
4.3
DISKUSSION
DER
MUTATIONSANALYSEN
................................
99
5
ZUSAMMENFASSUNG
................................................................................................
104
6
LITERATURVERZEICHNIS
.............................................................................................
106
7
ANHANG
...................................................................................................................
118
7.1
GERAETE
UND
ZUBEHOER
........................................................................................
118
7.1.1
GERAETE,
MATERIAL
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE
NUKLEINSAEURE-EXTRAKTION
.............
118
7.1.2
GERAETE
UND
MATERIAL
FUER
DIE
PCR
..............................................................
118
7.1.3
GERAETE
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
......................
119
7.1.4
GERAETE
UND
MATERIAL
FUER
DIE
SEQUENZIERUNG
.............................................
120
7.1.5
GERAETE
FUER
TISSUE
MICRO
ARRAYS
................................................................
121
7.1.6
GERAETE,
LOESUNGEN,
ANTIKOERPER
FUER
DIE
IMMUNHISTOCHEMIE
.......................
121
7.1.7
MATERIAL
FUER
DIE
HPV-TYPISIERUNG
.............................................................
124
7.2
PATIENTENKOLLEKTIV
.............................................................................................
126
7.3
DNA-EXTRAKTIONS-ERGEBNISSE
............................................................................
131
7.4
AUSWERTUNGSTABELLE
DER
IMMUNHISTOCHEMIE
....................................................
134
7.5
ERGEBNISTABELLE
HPV-TYPISIERUNG
....................................................................
155
7.6
VERTEILUNG
DER
P53-MUTATIONEN
UND
REFERENZSEQUENZ
....................................
163
7.7
ERGEBNISTABELLE
TP53-MUTATIONEN
....................................................................
166
7.8
MUTATIONSANALYSE
AM
NORMALGEWEBE
ZUM
AUSSCHLUSS
VON
KEIMBAHNMUTATIONEN
........................................................................................
170
7.9
ABBILDUNGS
UND
TABELLENVERZEICHNIS
..............................................................
173
7.9.1
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
..............................................................................
173
7.9.2
TABELLENVERZEICHNIS
..................................................................................
174
|
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