Untersuchungen zum Einfluss des Extrazellulären Adhäsionsproteins von Staphylococcus aureus auf die Thrombozytenfunktion:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2011
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | V, 157 S. graph. Darst. 210 mm x 146 mm, 245 g |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I. EINLEITUNG 1
1.1 PHYSIOLOGIE UND MORPHOLOGIE DER THROMBOZYTEN 1
1.2 THROMBOZYTEN IN DER HAEMOSTASE 3
1.3 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTEN IN DER INFLAMMATION, INFEKTION UND
TUMORMETASTASIERUNG 8
1.3.1 THROMBOZYTEN IN DER INFLAMMATION UND TUMORMETASTASIERUNG 9
1.3.2 THROMBOZYTEN IN DER INFEKTION 11
1.4 STAPHYLOCOCCUS AUREUS 16
1.4.1 ENTSTEHUNG EINER INFEKTIOESEN ENDOKARDITIS DURCH S. AUREUS^ 17
1.4.2 BAKTERIELLE PERSISTENZMECHANISMEN 19
1.5 EXTRACELLULAR ADHERENCE PROTEIN (EAP) 21
1.5.1 MOLEKULARE STRUKTUR VON EAP 22
1.5.2 INTERAKTIONEN VON EAP MIT DEN WIRTSSTRUKTUREN UND MIT DER
OBERFLAECHE VON S. AUREUS 22
1.5.3 EAP ALS ENTZUENDUNGS-UND IMMUNMODULIERENDER FAKTOR 25
1.5.4 EAP INTERFERIERT MIT METASTASEVORGAENGEN UND WUNDHEILUNGS-
MECHANISMEN 27
1.6 FRAGESTELLUNG UND ZIELE DIESER ARBEIT 32
II. MATERIAL UND METHODEN, 35
11.1 GERAETE 35
11.2 CHEMIKALIEN 36
11.2.1 VERWENDETE ANTIKOERPER 36
11.3 PRAEPARATION DER THROMBOZYTEN 37
11.3.1 PLAETTCHENISOLIERUNG DURCH ZENTRIFUGATION 37
11.3.2 BESTIMMUNG DER THROMBOZYTENZAHL/UL BLUT 38
11.3.3 SEPARATION DER THROMBOZYTEN VON PLASMAPROTEINEN
MIT HILFE DER GELFILTRATION. 38
11.3.4 HERSTELLUNG VON PLAETTCHENARMEM PLASMA (PLATELET POOR PLASMA
(PPP)) 39
11.4 AKTIVIERUNG DER THROMBOZYTEN IN VITRO, 39
11.4.1 EAP 39
11.4.2 THROMBIN 40
11.4.3 ADP 41
11.4.4 KOLLAGEN 42
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/1013110706
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
11.5 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 42
11.5.1 OPTISCHE TECHNIK UND SIGNALDETEKTION 42
11.5.2 SIGNALVERARBEITUNG UND SIGNALANALYSE 45
11.6 DETEKTION DER PLAETTCHENAKTIVIERUNG 46
11.6.1 FIBRINOGENBINDUNG 46
II.6.1.A MARKIERUNG VON FIBRINOGEN, FVIIA, FVIII UND FXIII MIT
FLUORESCEINISOTHIOCYANAT 47
11.6.2 AGGREGOMETRIE. 49
11.6.3 SEKRETION DER A-GRANULA 50
11.6.4 EXPRESSION VON CD63 51
11.6.5 EAP-INDUZIERTE FREISETZUNG VON MEPACRIN AUS DEN THROMBOZYTEN 51
11.6.6 EXPRESSION VON CD154 (CD40 LIGAND, CD40L) 52
11.6.7 PROKOAGULANTER ZUSTAND 52
LL.6.7.A NACHWEIS DER PROKOAGULANTEN THROMBOZYTENOBERFLAECHE DURCH
BINDUNG VON ANNEXIN-V-FITC 53
LL.6.7.B NACHWEIS DER PROKOAGULANTEN THROMBOZYTENOBERFLAECHE DURCH
BINDUNG VON FVIIA-FITC 53
II.6.7.C NACHWEIS DER PROKOAGULANTEN THROMBOZYTENOBERFLAECHE DURCH
BINDUNG VON FVIII-FITC 54
LL.6.7.D NACHWEIS DER PROKOAGULANTEN THROMBOZYTENOBERFLAECHE DURCH
BINDUNG VON FXIII-FITC 54
11.6.8 MIKROPARTIKELBILDUNG 54
11.7 EINFLUSS VON ANTIKOAGULANZIEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE
THROMBOZYTENAKTIVIERUNG 55
11.7.1 KOMPLEXBILDNER 55
11.7.2 HIRUDIN 56
11.7.3 MELAGATRAN 56
11.7.4 HEPARINE. 57
11.8 EINFLUSS VON THIOLREAKTIVEN SUBSTANZEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE
THROMBOZYTENAKTIVIERUNG 58
11.8.1 PCMPS UND DTNB 58
11.8.2 GLUTATHION 59
11.8.3 GLIOTOXIN 60
11.8.4 PHENYLARSINOXID 60
11.8.5 BACITRACIN 61
11.9 STATISTISCHE AUSWERTUNG ALLER EXPERIMENTELLEN DATEN 61
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
III. ERGEBNISSE 62
111.1 UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS VON EAP AUF THROMBOZYTEN 62
III.1.1 EAP-INDUZIERTE FIBRINOGENBINDUNG AN HUMANE THROMBOZYTEN 62
HM .2 VERGLEICH DER BINDUNG VON FIBRINOGEN AN HUMANE THROMBOZYTEN
INDUZIERT DURCH EAP, THROMBIN, ADP UND KOLLAGEN 64
III.1.3 AGGREGOMETRIE 67
II 1.1.4 EAP-INDUZIERTE SEKRETION DER A-GRANULA AUS HUMANEN
THROMBOZYTEN... 69
111.1.5 EAP INDUZIERTE SEKRETION DER *DENSE BODIES AUS
HUMANEN THROMBOZYTEN 69
111.1.6 EAP-INDUZIERTE FREISETZUNG VON MEPACRIN AUS
HUMANEN THROMBOZYTEN 70
II 1.1.7 EAP-INDUZIERTE EXPRESSION VON CD40 LIGAND AUF DER OBERFLAECHE
HUMANER THROMBOZYTEN 71
111.1.8 EAP-INDUZIERTE PROKOAGULANTE AKTIVITAET HUMANER THROMBOZYTEN 72
111.1.9 MIKROPARTIKELBILDUNG 73
111.2 EINFLUSS VON ANTIKOAGULANZIEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 74
111.3 EINFLUSS VON THIOLREAKTIVEN SUBSTANZEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE
AKTIVIERUNG
HUMANER THROMBOZYTEN 77
111.3.1 EINFLUSS VON DTNB UND PCMPS AUF DIE EAP-INDUZIERTE AKTIVIERUNG
HUMANER THROMBOZYTEN 77
III.3.1.A EINFLUSS VON DTNB AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 77
III.3.1 .B EINFLUSS VON DTNB AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
ANTI-CD62P-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 78
III.3.1 .C EINFLUSS VON PCMPS AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 79
LLL.3.1.D EINFLUSS VON PCMPS AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
ANTI-CD62P-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 80
111.3.2 EINFLUSS VON GSH AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 81
IM.3.3 EINFLUSS VON GLIOTOXIN AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN. 82
IM.3.4 EINFLUSS VON PAO AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 83
IM.3.5 EINFLUSS VON BACITRACIN AUF DIE EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON
FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 84
IMAGE 4
INHALTSVERZEICHNIS IV
111.4 VERGLEICH DER AGONIST-INDUZIERTEN BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN
THROMBOZYTEN DES MENSCHEN UND ANDERER SAEUGER 85
IM.4.1 AGONIST-INDUZIERTE BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN THROMBOZYTEN
DER RATTE 88
ML.4.2 AGONIST-INDUZIERTE BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN
EQUINE THROMBOZYTEN 89
HL.4.3 AGONIST-INDUZIERTE BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN
BOVINE THROMBOZYTEN 91
ML.4.4 AGONIST-INDUZIERTE BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN
THROMBOZYTEN DES HUNDES 92
IV. DISKUSSION 94
IV. 1 EINFLUSS VON EAP AUF HUMANE THROMBOZYTEN 94
IV.1.1 EAP-INDUZIERTE BINDUNG VON FIBRINOGEN AN HUMANE THROMBOZYTEN 94
IV.1.2 SEKRETION DER A-GRANULA INDUZIERT DURCH EAP 97
IV.1.3 SEKRETION DER *DENSE BODIES INDUZIERT DURCH EAP 99
IV. 1.4 EAP-INDUZIERTE EXPRESSION VON CD40L AUF DER OBERFLAECHE
HUMANER THROMBOZYTEN 101
IV. 1.5 EAP INDUZIERT EINE PROKOAGULANTE OBERFLAECHE AUF
HUMANEN THROMBOZYTEN. 102
IV.1.6 EINFLUSS VERSCHIEDENER ANTIKOAGULANZIEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE
BINDUNG VON FIBRINOGEN-FITC AN HUMANE THROMBOZYTEN 105
IV.1.7 EINFLUSS THIOLREAKTIVER SUBSTANZEN AUF DIE EAP-INDUZIERTE
AKTIVIERUNG HUMANER THROMBOZYTEN 108
IV.2 VERGLEICH DER AGONIST-INDUZIERTEN AKTIVIERUNG VON THROMBOZYTEN
DES MENSCHEN UND ANDERER SAEUGER 115
V. AUSBLICK 121
VI. ZUSAMMENFASSUNG 123
VII. SUMMARY. 127
VIII. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 131
IX. LITERATURVERZEICHNIS 136
IMAGE 5
INHALTSVERZEICHNIS
X. ANHANG 155
X.1 PUBLIKATIONEN 155
X.1.1 VEROEFFENTLICHTE ABSTRACTS 155
X.1.2 MANUSKRIPT IN BEARBEITUNG 155
X.2 DANKSAGUNG 156
X.3 ERKLAERUNG 157
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