Einfluss einer adenoviralen Überexpression des SMAD Inhibitors YB-1 auf die Hypertrophie- und Apoptose-Entwicklung in isolierten adulten Herzmuskelzellen der Ratte:
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| Veröffentlicht: |
Giessen
VVB Laufersweiler
2010
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| adam_text | F INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS I VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN V
1 EINLEITUNG 1 1.1 HYPERTROPHIE 2 1.1.1 PATHOPHYSIOLOGIE DER
HERZHYPERTROPHIE 2 1.1.2 ADRENERG INDUZIERTE HYPERTROPHIE 3 1.1.3
HYPERTROPHIENACHWEIS IN DER ZELLKULTUR 5 1.2 APOPTOSE 5 1.2.1
MECHANISMUS DER APOPTOSE 6 1.2.2 TGFSSI 8 1.2.3 TGFSS/ SMAD-SIGNALKASKADE
8 1.2.4 TGFSS! INDUZIERTE APOPTOSE 10 1.3 Y-BOX-BINDENDES-PROTEIN-1
(YB-1) 11 1.3.1 PROTEINSTRUKTUR VON YB-1 11 1.3.2 BIOLOGISCHE FUNKTION
VON YB-1 12 1.3.3 YB-1 ALS TRANSKRIPTIONSFAKTOR 13 1.3.4 EINFLUSS VON
YB-1 AUF DIE TRANSLATION 14 1.3.5 YB-1, TGFSS UND SMAD 15 1.4
FRAGESTELLUNG 16 2 MATERIAL UND METHODEN 18 2.1 MATERIAL 18 2.1.1 TIERE
18 2.1.2 BAKTERIENSTAMM FUER DIE BAKTERIENKULTUR 18 2.1.3 ZELLSTAMM FUER
DIE VIRUSVERMEHRUNG 18 2.1.4 CHEMIKALIEN UND ENZYME 18 2.1.5 ANTIKOERPER
21 2.1.6 PUFFERUND LOESUNGEN 21 2.1.7 GERAETE UND LABORBEDARF 24 2.2
HERSTELLUNG DER ADENOVIREN 25 2.2.1 ARBEITEN MIT DNA 28 2.2.1.1
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON DNA 28 2.2.1.2 RESTRIKTION DER PLASMID-DNA
28 2.2.1.3 ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG VON DNA-FRAGMENTEN 29 2.2.1.4
ISOLIERUNG VON DNA-FRAGMENTEN AUS AGAROSE-GELEN 29 2.2.1.5
PHENOL-CHLOROFORM-EXTRAKTION VON DNA-FRAGMENTEN 29 2.2.1.6
ALKOHOLFAELLUNG VON DNA 30 BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/1004830386 DIGITALISIERT DURCH INHALTSVERZEICHNIS
2.2.1.7 PHOSPHATASE-BEHANDLUNG LINEARER PLASMID-DNA 30 2.2.1.8 AUFFUELLEN
VON ZURUECKLIEGENDEN 3 -ENDEN 30 2.2.1.9 UEGATION VON DNA-FRAGMENTEN MIT
VEKTOR-DNA 30 2.2.1.10 KLONIERUNG ISOLIERTER DNA-FRAGMENTE 30 2.2.1.11
MINIPRAEPARATION VON PLASMID-DNA 31 2.2.1.12 MAXI-PRAEPARATION VON
PLASMID-DNA 32 2.2.1.13 KLONASEREAKTION 33 2.2.1.14 DNA-SEQUENZIERUNG 34
2.2.2 POLYMERASE-KETTEN-REAKTION 34 2.2.3 KOMPETENTE ZELLEN 35 2.2.3.1
HERSTELLUNG KOMPETENTER ZELLEN 35 2.2.3.2 TRANSFORMATION KOMPETENTER
ZELLEN 36 2.2.4 VERMEHRUNG DER HEK-ZELLEN 36 2.2.5 TRANSFEKTION 37 2.2.6
ANZUCHT DER VIREN AUF HEK-ZELLEN 37 2.2.7 TITERBESTIMMUNG DER VIREN 38
2.3 ISOLIERUNG UND ZELLKULTUR VON VENTRIKULAEREN KARDIOMYOZYTEN 40 2.3.1
VERSUCHSTIERE 40 2.3.2 PRAEPARATION VENTRIKULAERER KARDIOMYOZYTEN AUS
RATTENHERZEN 40 2.3.3 VORINKUBATION DER KULTURSCHALEN FUER DIE
KARDIOMYOZYTEN 41 2.3.4 AUSPLATTIEREN DER KARDIOMYOZYTEN 41 2.3.5
KULTIVIERUNG DER KARDIOMYOZYTEN 41 2.3.6 BEHANDLUNG DER KARDIOMYOZYTEN
41 2.4 NACHWEIS VON RNA 42 2.4.1 ISOLIERUNG VON GESAMT RNA 42 2.4.2
DNASE-BEHANDLUNG 42 2.4.3 BESTIMMUNG DER RNA KONZENTRATION 43 2.4.4
REVERSE TRANSKRIPTION 43 2.4.5 REALTIME-PCR 43 2.4.5.1 VERWENDETE PRIMER
IN DER REALTIME-PCR 45 2.4.5.2 PCR-ANSATZ 45 2.4.5.3 LAUFPROGRAMME DER
REALTIME-PCR 45 2.4.5.4 AUSWERTUNG DER PCR 46 2. INHALTSVERZEICHNIS
2.8.1 APOPTOSESTIMULATION DURCH TGFSSI IN ISOLIERTEN HERZMUSKELZELLEN 56
2.8.2 ANNEXIN-/PROPIDIUMIODID-FAERBUNG APOPTOTISCHER ZELLEN 56 2.8.3 HOE
33258/ PROPIDIUMIODID-FAERBUNG APOPTOTISCHER ZELLEN 57 2.9
COMPUTERPROGRAMME 58 2.10 STATISTIK 59 3 ERGEBNISSE 60 3.1
VIRUSHERSTELLUNG UND TITERBESTIMMUNG VON AD-YB-1 60 3.1.1
TRANSPORTVEKTOR PENTR1A-YB-1 61 3.1.2 EXPRESSIONSVEKTOR PAD-YB-1 67
3.1.3 DAS VIRUS AD-YB-1 69 3.2 VIRUSHERSTELLUNG UND TITERBESTIMMUNG VON
AD-GFP 70 3.2.1 PENTR1A-GFP 70 3.2.2 EXPRESSIONSVEKTOR PAD-GFP 74 3.2.3
DAS VIRUS AD-GFP 77 3.3 NACHWEIS DER FUNKTIONALITAET DER VIREN 78 3.3.1
ANSTIEG DER RELATIVEN YB-1 MRNA EXPRESSION 78 3.3.2 ANSTIEG DER
RELATIVEN YB-1 PROTEINEXPRESSION 80 3.3.3 VERTEILUNG VON YB-1 IN DER
HERZMUSKELZELLE 82 3.4 YB-1 HEMMT DIE PHENYLEPHRIN INDUZIERTE
HYPERTROPHIE 84 3.4.1 YB-1 HEMMT DAS DURCH PE INDUZIERTE GROESSENWACHSTUM
84 3.4.2 YB-1 HEMMT DIE STEIGERUNG DER PROTEINBIOSYNTHESERATE 85 3.5
KEINE BEEINFLUSSUNG VON APOPTOSE UND NEKROSE DURCH DIE VIREN 86 3.6 YB-1
HEMMT DIE TGFSSI INDUZIERTE APOPTOSE 88 3.6.1 HEMMUNG DER FRUEHEN
APOPTOSEVORGAENGE 88 3.6.2 HEMMUNG DER SPAETEN APOPTOSEVORGAENGE 90 3.7
YB-1 HAT KEINEN EINFLUSS AUF DIE PHOSPHORYLIERUNG DER SMAD PROTEINE 91
3.8 YB-1 BEEINFLUSST NICHT DIE EXPRESSION VON SMAD 7 95 4 DISKUSSION 97
4.1 ADENOVIRALE UEBEREXPRESSION VON YB-1 97 4. INHALTSVERZEICHNIS 6
SUMMARY 107 7 LITERATURVERZEICHNIS 108 8 DANKSAGUNG 123 IV
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| spelling | Partsch, Stefan Verfasser (DE-588)140992782 aut Einfluss einer adenoviralen Überexpression des SMAD Inhibitors YB-1 auf die Hypertrophie- und Apoptose-Entwicklung in isolierten adulten Herzmuskelzellen der Ratte eingereicht von Stefan Partsch 1. Aufl. Giessen VVB Laufersweiler 2010 VII, 123 S. Ill., graph. Darst. 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Edition scientifique Zugl.: Gießen, Univ., Diss., 2010 adenoviridae cabt gene expression cabt biotechnology cabt genes cabt molecular genetics cabt rats cabt polymerase chain reaction cabt western blotting cabt diagnostic techniques cabt sds page cabt hypertrophy cabt heart cabt myocardium cabt apoptosis cabt cells cabt Herzhypertrophie (DE-588)4024652-8 gnd rswk-swf Apoptosis (DE-588)4291096-1 gnd rswk-swf Smad-Proteine (DE-588)4840303-9 gnd rswk-swf Inhibitor (DE-588)4027007-5 gnd rswk-swf Adenoviren (DE-588)4141412-3 gnd rswk-swf Überexpression (DE-588)4329200-8 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Herzhypertrophie (DE-588)4024652-8 s Apoptosis (DE-588)4291096-1 s Smad-Proteine (DE-588)4840303-9 s Inhibitor (DE-588)4027007-5 s Überexpression (DE-588)4329200-8 s Adenoviren (DE-588)4141412-3 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=024166698&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Partsch, Stefan Einfluss einer adenoviralen Überexpression des SMAD Inhibitors YB-1 auf die Hypertrophie- und Apoptose-Entwicklung in isolierten adulten Herzmuskelzellen der Ratte adenoviridae cabt gene expression cabt biotechnology cabt genes cabt molecular genetics cabt rats cabt polymerase chain reaction cabt western blotting cabt diagnostic techniques cabt sds page cabt hypertrophy cabt heart cabt myocardium cabt apoptosis cabt cells cabt Herzhypertrophie (DE-588)4024652-8 gnd Apoptosis (DE-588)4291096-1 gnd Smad-Proteine (DE-588)4840303-9 gnd Inhibitor (DE-588)4027007-5 gnd Adenoviren (DE-588)4141412-3 gnd Überexpression (DE-588)4329200-8 gnd |
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