Verfügbarkeit: Albuminurie stört die Kollagenhomöostase der proximalen Tubuluszellen des Opossums

Albuminurie stört die Kollagenhomöostase der proximalen Tubuluszellen des Opossums:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Wohlfarth, Verena 1977- (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	2010
Schlagworte:	Hochschulschrift
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS ................................................................................................... III 1 EINLEITUNG 1 1.1 CHRONISCHE NIERENINSUFFIZIENZ ..................................................................... 1 1.2 ALBUMIN .......................................................................................................... 1 1.2.1 ALBUMINEIGENSCHAFTEN ....................................................................... 1 1.2.2 ALBUMINFILTRATION ................................................................................ 2 1.2.3 ALBUMINENDOZYTOSE ............................................................................. 3 1.2.3.1 NICHT-REZEPTOR VERMITTELTE ENDOZYTOSE (= FLUID PHA SE ENDOCYTOSIS ODER PINOZYTOSE) ....................................... 4 1.2.3.2 REZEPTOR-VERMITTELTE ENDOZYTOSE (= ADSORPTIVE EN DOCYTOSIS, COATED PITS VERMITTELTE ENDOZYTOSE) .... 4 1.2.4 REZEPTOR-VERMITTELTE ALBUMINENDOZYTOSE ........................................ 5 1.2.4.1 MEGALIN ............................................................................... 5 1.2.4.2 CUBILIN ............................................................................... 6 1.2.4.3 PH-ABHAENGIGKEIT DER ALBUMINENDOZYTOSE: BEDEUTUNG DES NHE3 ............................................................................ 9 1.3 PROTEINURIE/ALBUMINURIE ............................................................................ 11 1.3.1 ENTSTEHUNGSORT DER PROTEINURIE ...................................................... 11 1.3.1.1 PRAERENALE PROTEINURIE ......................................................... 11 1.3.1.2 RENALE PROTEINURIE ............................................................ 11 1.3.1.3 GLOMERULAERE PROTEINURIE ................................................... 11 1.3.1.4 TUBULAERE PROTEINURIE ......................................................... 12 1.3.1.5 POSTRENALE PROTEINURIE ...................................................... 12 1.3.2 ALBUMINURIE ALS MARKER DER NIERENFIBROSE ...................................... 13 1.3.3 ALBUMINURIE ALS MOTOR DER NIERENFIBROSE ...................................... 13 1.4 ZIELSETZUNG DER ARBEIT ................................................................................. 14 1.5 VALIDIERTES ZELLKULTURSYSTEM ........................................................................ 14 2 MATERIAL UND METHODEN 16 2.1 ZELLKULTUR ...................................................................................................... 16 2.1.1 MATERIALIEN FUER ZELLKULTUR .............................................................. 16 2.1.2 ZELLLINIEN ............................................................................................ 17 2.1.2.1 OPOSSUM KIDNEY WILDTYP ZELLEN (WILDTYP-OK-ZELLEN) ......................................................................................... 17 2.1.2.2 PORCINE RENAL PROXIMAL TUBULE ZELLEN (LLC-PK1 ZELLEN) ............................................................................. 17 2.1.2.3 IMMORTALIZED HUMAN KIDNEY EPITHELIAL ZELLEN (IHKE1 ZELLEN) ................................................................................ 17 2.1.2.4 MADINE-DARBY CANINE KIDNEY ZELLEN (MDCK-ZELLEN), SUBTYP C11 (C11 KLON) .................................................. 17 2.1.2.5 OPOSSUM KIDNEY NHE3-DEFIZIENTE ZELLEN (OK-NHE3 DEF. ZELLEN) ....................................................................... 18 2.1.3 ZELLKULTUR AM BEISPIEL DER OPOSSUM KIDNEY WILDTYPZELLEN . . 18 2.1.4 EXPERIMENTALMEDIEN/HEMMER ............................ 19 2.2 ERMITTLUNG VON ZELLZAHL UND ZELLGROESSE MITTELS COULTER COUNTER ... 19 2.3 QUANTITATIVE BESTIMMUNG DES PROTEINGEHALTS MITTELS BICINCHONINSAEURE 20 2.4 BESTIMMUNG VON SEZERNIERTEM KOLLAGEN MITTELS KOLLAGENASE-SENSITIVEN PROLININKORPORATIONSASSAY .......................................................................... 21 2.5 BESTIMMUNG VON SEZERNIERTEM KOLLAGEN MITTELS KOLLAGEN-ELISA ... 23 2.6 BESTIMMUNG DER KOLLAGENSYNTHESE MITTELS KOLLAGEN WESTERN BLOT . . 25 2.7 SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG DER GELATINASEAKTIVITAET MITTELS ZYMO GRAPHIE .................................................................................................. 27 2.8 QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER GELATINASEAKTIVITAET MITTELS GELATINA SEASSAY ........................................................................................................... 29 2.9 BESTIMMUNG DER RADIKALBILDUNG MITTELS RADIKALASSAY ............................ 30 2.10 BESTIMMUNG DER AKTIVIERUNG VON SIGNALTRANSDUKTIONSWEGEN MITTELS SEAP-REPORTERGEN-ASSAY ....................................... 31 2.11 STATISTIK ....................................................................................................... 33 3 ERGEBNISSE 34 3.1 ALBUMIN-INDUZIERTE WACHSTUMSVORGAENGE DER PROXIMALEN TUBULUSZEL LEN DES OPOSSUMS ......................................................................................... 34 3.2 EINFLUSS DER PROTEINURIE AUF DIE KOLLAGENHOMOEOSTASE DER OK-ZELLEN . 35 3.2.1 HINTERGRUND: KOLLAGENSYNTHESE UND KOLLAGENDEGRADATION ... 35 3.2.1.1 KOLLAGENSYNTHESE .............................................................. 35 3.2.1.2 KOLLAGENDEGRADATION ........................................................ 37 3.2.2 TGF-31 -INDUZIERTE KOLLAGENSEKRETION DER OK-ZELLEN ................ 38 3.2.3 ALBUMIN-INDUZIERTE KOLLAGENSEKRETION DER OK-ZELLEN ............. 39 3.2.4 ROLLE DER FREIEN FETTSAEUREN BEI DER ALBUMIN-INDUZIERTEN KOL LAGENSEKRETION ................................................................................... 40 3.2.5 BESTIMMUNG PATHOPHYSIOLOGISCH RELEVANTER KOLLAGENTYPEN ... 41 3.2.6 ALBUMIN-INDUZIERTE KOLLAGENSYNTHESE ............................................ 43 3.2.7 ALBUMIN-INDUZIERTER KOLLAGENABBAU ............................................... 44 3.2.7.1 SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG DER KOLLAGENASEAKTI VITAET MITTELS ZYMOGRAPHIE .............................................. 44 3.2.7.2 QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER KOLLAGENASEAKTIVITAET MITTELS GELATINASEASSAY ................................................. 45 3.3 SIGNALTRANSDUKTION DER ALBUMIN-INDUZIERTEN KOLLAGENSEKRETION .... 47 3.3.1 PHARMAKOLOGISCHE HEMMUNG DER ALBUMIN-INDUZIERTEN KOLLA GENSEKRETION ......................................................................... 47 3.3.2 PHARMAKOLOGISCHE HEMMUNG DER WIRKUNG VON ALBUMIN AUF DIE KOLLAGENASEAKTIVITAET ................................................................ 47 3.3.3 ALBUMIN-INDUZIERTE AKTIVIERUNG VON SIGNALTRANSDUKTIONSWEGEN 50 3.3.3.1 NF-KB ................................................................................. 50 3.3.3.2 ACTIVATOR-PROTEIN 1 (AP-1) ............................................ 51 3.3.3.3 REACTIVE OXYGEN SPECIES ALS SECOND MESSENGER ... 51 3.4 ZENTRALE ROLLE DER ALBUMINENDOZYTOSE BEI DER ALBUMIN-INDUZIERTEN KOLLAGENSEKRETION ................................................................................. 54 3.4.1 ALBUMIN-INDUZIERTE KOLLAGENSEKRETION BEI ZELLEN UNTERSCHIED LICHER ENDOZYTOTISCHER AKTIVITAET ..................................................... 54 3.4.2 PHARMAKOLOGISCHE HEMMUNG DER ALBUMINENDOZYTOSE ............ 56 3.4.3 ABHAENGIGKEIT DER ALBUMIN-INDUZIERTEN AKTIVIERUNG VERSCHIE DENER SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE VON DER ALBUMINENDOZYTOSE . . 57 4 DISKUSSION 60 4.1 ZELLKULTURMODELL ............................................................................................. 61 4.2 TGF-SSI ALS PROFIBROTISCHER STIMULUS ........................................................... 61 4.3 ALBUMIN-INDUZIERTE STOERUNG DER KOLLAGENHOMOEOSTASE ............................. 62 4.4 ALBUMIN-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTIONSWEGE ............................................ 64 4.5 NOTWENDIGKEIT DER ALBUMINENDOZYTOSE ..................................................... 67 5 ZUSAMMENFASSUNG 69 LITERATURVERZEICHNIS 71 DANKSAGUNG LEBENSLAUF
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