Die Rolle des MMP-3 bei experimenteller zerebraler Ischämie und Reperfusion im Tiermodell:
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2011
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A.
EINLEITUNG
..........................................................................................................................
1
1.
SCHLAGANFALL
.......................................................................................................................
1
1.1.
URSACHEN
UND
FOLGEN
.................................................................................................
1
2.
MIKROGEFAESSE
......................................................................................................................
2
2.1.
BLUT-HIR-SCHRANKE
.......................................................
2
2.2.
BASALMEMBRAN
..........................................................................................................
3
2.3.
MIKROVASKULAERE
SCHAEDIGUNG
NACH
ISCHAEMIE/REPERFUSION
......................
3
3.
THERAPIE
ANSAETZE
..............................................................................................................
4
3.1.
LYSETHERAPIE
..............................................................................................................
4
3.2.
TNK
..........................................................................................................................
6
3.3.
HYPOTHERMIE
.............................................................................................................
6
3.4.
MMP-INHIBITOREN
......................................................................................................
6
3.5.
MMP
.........................................................................................................................
7
3.6.
TISSUE
INHIBITORS
OF
METALLOPROTEINASES
(TIMPS)
....................................................
10
3.7.
EMMPRIN
...............................................................................................................
10
4.
FRAGESTELLUNG
...................................................................................................................
11
B.
MATERIAL
UND
METHODEN
.....................................................................................................
12
1.
MATERIAL
...........................................................................................................................
12
1.1.
CHEMIKALIEN
.............................................................................................................
12
2.
TIERE
UND
TIERHALTUNG
.....................................................................................................
12
3.
FADENMODELL
BEI
RATTEN,
MCAO
(MEDIAN
CEREBRAL
ARTERY
OCCLUSION
..............................
12
3.1.
WAHL
UND BESCHREIBUNG
DES
MODELLS
......................................................................
12
3.2.
THROMBOLYSE
THERAPIE
MIT
RT-PA
UND
TNK
............................................................
14
3.3.
HYPOTHERMIEBEHANDLUNG
..........................................................................................
15
3.4.
THERAPIE
MIT
DOXYCYCLIN
UND
CALBIOCHEM
MMP-INHIBITOR
....................................
15
4.
INFARKTVOLUMETRIE
............................................................................................................
16
5.
BIOCHEMISCHE
ANALYSEN
..................................................................................................
16
5.1.
GEWEBEEXTRAKTION;
AUFARBEITUNG
DER
PROBEN
..........................................................
16
5.2.
SDS
GEL-ELEKTROPHORESE
........................................................................................
17
5.3.
WESTERN
BLOTS
...........................................................................................................
17
5.4.
ZYMOGRAPHIEN/REVERSE
ZYMOGRAPHIEN
.................................................................
18
5.5.
COOMASIE
FAERBUNG
...................................................................................................
18
6.
AUSWERTUNG
.....................................................................................................................
18
6.1.
PROTEINBESTIMMUNG
..................................................................................................
18
6.2.
DIE
AUSWERTUNG
DER
BIOCHEMISCHEN
DATEN
.............................................................
18
7.
STATISTIK
........................................................................................................................
18
8.
TIERGRUPPEN
.....................................................................................................................
19
C.
ERGEBNISSE
.......................................................................................................................
20
1.
ETABLIERUNG
DES
MMP-3
WESTERNBLOTS
...........................................................................
20
1.1.
LYSEPUFFER
...............................................................................................................
20
1.2.
ANTIKOERPER
...............................................................................................................
20
1.3.
VERSUCH
MIT
VERSCHIEDENEN
BLOCKIERLOESUNGEN
........................................................
21
2.
MMP-3
NACH
ISCHAEMIE
UND
REPERFUSION
(I3R24)
..........................................................
22
2.1.
RATTE
........................................................................................................................
22
2.2.
MAUS
.......................................................................................................................
22
3.
VERSCHIEDENE
ISCHAEMIE
UND
REPERFUSIONSZEITEN
............................................................
23
3.1.
VERSCHIEDENE
ISCHAEMIEZEITEN
BEI
DER
RATTE
............................................................
23
3.2.
VERSCHIEDENE
ISCHAEMIEZEITEN
BEI
DER
MAUS
............................................................
24
3.3.
VERSCHIEDENE
REPERFUSIONSZEITEN
MAUS
.................................................................
24
4.
MMP-3
AKTIVITAET
BEI
THROMBOLYSE
...............................................................................
25
4.1.
RT-PA
IN
VERSCHIEDENEN
KONZENTRATIONEN
...............................................................
25
4.2.
UNTERSCHIEDE
IN
DER
WIRKUNG
AUF
MMP-3
VON
RT-PA
UND
TENEKTEPLASE
(TNK)...
29
5.
MMP-3
AKTIVITAET
UNTER
HYPOTHERMIE
UND
KOMBINIERTER
HYPOTHERMIE
/
RT-PA
THERAPIE
30
6.
EINFLUSS
VON
MMP-INIHIBITOREN
AUFMMP-3
................................................................
30
7.
AUSWIRKUNG
VON
GCNDELETIONEN
DES
MMP
SYSTEMS
(TIMP-1
UND
MMP
-
9)
AUF
MMP-3
.................................................................................................................................
31
D.
DISKUSSION
........................................................................................................................
32
1.1.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DIESER
ARBEIT
.....................................................
32
2.
ROLLE
DER
MMP-3
..........................................................................................................
33
2.1.
ISCHAEMIE/REPERFUSION
..............................................................................................
33
2.2.
ZEITVERLAUF.
..............................................................................................................
34
2.3.
THROMBOLYSE
............................................................................................................
34
2.4.
HYPOTHERMIE
UND
KOMBINATION
MIT
DER
THROMBOLYSE
MIT
RT-PA
............................
35
2.5.
MMP-INHIBITOREN
....................................................................................................
36
2.6.
EINFLUSS
VON
MMP-9
UND
TIMP-1
GENDELETION
AUFMMP-3
..................................
37
3.
AUSBLICK
........................................................................................................................
38
E.
LITERATUR
...........................................................................................................................
41
F.
ANHANG
.............................................................................................................................
51
H.
DANKSAGUNG
.....................................................................................................................
52
|
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