Optimierung der Sauerstoffversorgung in dreidimensionalen Zell-Leitschienen-Konstrukten für das tissue engineering von Knochen:
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2011
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AUS DER CHIRURGISCHEN KLINIK UND POLIKLINIK-INNENSTADT
KLINIKUM DER UNIVERSITAET MUENCHEN
LABOR FUER EXPERIMENTELLE CHIRURGIE UND REGENERATIVE MEDIZIN
DIREKTOR: PROF. DR. MED. WOLF MUTSCHIER
OPTIMIERUNG DER SAUERSTOFFVERSORGUNG IN
DREIDIMENSIONALEN ZELL-LEITSCHIENEN-KONSTRUKTEN FUER DAS TISSUE
ENGINEERING VON KNOCHEN
DISSERTATION
ZUM ERWERB DES DOKTORGRADES DER MEDIZIN
AN DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET
DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET ZU MUENCHEN
VORGELEGT VON
DR. MED. DENT. SVEN OTTO
AUS ZSCHOPAU
2011
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DIGITALISIERT DURCH
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 5
1.1. GRUNDLAGEN 5
1.1.1. ENTSTEHUNG UND EIGENSCHAFTEN KNOECHERNER DEFEKTE 5
1.1.2. THERAPEUTISCHE OPTIONEN ZUR VERSORGUNG KNOECHERNER DEFEKTE 6
1.2. TISSUE ENGINEERING 9
1.2.1. GRUNDLAGEN UND GESCHICHTE DES TISSUE ENGINEERING 9
1.2.2. MOEGLICHKEITEN UND GRENZEN DES TISSUE ENGINEERING 9
1.2.3. DIE ROLLE DES SAUERSTOFFS FUER DAS TISSUE ENGINEERING 11
1.2.4. SAUERSTOFFEINFLUSS AUF ENTWICKLUNG UND HEILUNG VON KNOCHEN 12
1.2.5. DREIDIMENSIONALE ZELLKULTURSYSTEME FUER DAS TISSUE ENGINEERING 12
1.3. AUFGABENSTELLUNG 15
1.3.1. SAUERSTOFFMESSUNG IN DREIDIMENSIONALEN ZELLKULTURSYSTEMEN 15
1.3.2. OPTIMIERUNG DER KULTURBEDINGUNGEN 15
1.3.3. UEBERTRAGUNG DER ERGEBNISSE AUF HUMANE ZELLEN 15
2. MATERIAL UND METHODEN 16
2.1. ZELLKULTUR 16
2.1.1. ZELLKULTUR ALLGEMEIN 16
2.1.2. ZELLPASSAGIERUNG 16
2.1.3. ZELLZAEHLUNG 16
2.1.4. BESIEDLUNG DER LEITSCHIENEN 17
2.1.5. STATISCHE UND DYNAMISCHE ZELLKULTUR 17
2.2. MESSMETHODIK UND AUSWERTUNG DER VERSUCHE 19
2.2.1. SAUERSTOFFMESSUNG 19
2.2.2. AUSWERTUNG DES ZELLUEBERLEBENS MIT HILFE DES LIVE-DEAD-ASSAY 22
2.2.3. AUSWERTUNG DER ZELLAKTIVITAET MIT HILFE DES WST-ASSAY 24
2.2.4. STATISTISCHE AUSWERTUNG 25
3. ERGEBNISSE 26
3.1. ERGEBNISSE UNTER STATISCHEN ZELLKULTURBEDINGUNGEN 26
3.1.1. VORVERSUCHE UNTER STATISCHEN KULTURBEDINGUNGEN 26
3.1.2. VERSUCHE UNTER STATISCHEN BEDINGUNGEN IN DREIDIMENSIONALEN
ZELLKULTURSYSTEMEN 27
3.2. ERGEBNISSE UNTER DYNAMISCHEN ZELLKULTURBEDINGUNGEN 30
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS 4
3.2.1. VERSUCHE UNTER DYNAMISCHEN BEDINGUNGEN MIT STANDARDPERFUSIONS-
GESCHWINDIGKEIT 30
3.2.2. QUANTITATIVE AUSWERTUNG DES ZELLUEBERLEBENS DURCH ZELLZAEHLUNG 32
3.2.3. VERSUCHE UNTER DYNAMISCHEN BEDINGUNGEN MIT GESTEIGERTER
PERFUSIONS- GESCHWINDIGKEIT 33
4. DISKUSSION 38
4.1. STATISCHE ZELLKULTURSYSTEME FUER DAS TISSUE ENGINEERING VAN KNOCHEN
38
4.2. DYNAMISCHE ZELLKULTURSYSTEME FUER DAS TISSUE ENGINEERING VON KNOCHEN
41
4.3. VERSUCHE MIT STEIGERUNG DER PERFUSIONSGESCHWINDIGKEIT 43
5. ZUSAMMENFASSUNG 45
6. LITERATURVERZEICHNIS 48
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 53
DANKSAGUNG 54
LEBENSLAUF 55
PUBLIKATIONEN 58
DRITTMITTELANTRAEGE 66
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