Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe:
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Berlin
Logos-Verl.
2010
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Physical Description: | 123 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 9783832526832 |
Staff View
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV036872518 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 007 | t| | ||
| 008 | 101217s2010 xx ad|| m||| 00||| ger d | ||
| 020 | |a 9783832526832 |9 978-3-8325-2683-2 | ||
| 035 | |a (OCoLC)696638524 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV036872518 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakwb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 049 | |a DE-83 | ||
| 082 | 0 | |a 612.01575 |2 22/ger | |
| 100 | 1 | |a Poplawsky, Gregor |e Verfasser |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe |c vorgelegt von Gregor Poplawsky |
| 264 | 1 | |a Berlin |b Logos-Verl. |c 2010 | |
| 300 | |a 123 S. |b Ill., graph. Darst. | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 502 | |a Zugl.: Berlin, Techn. Univ., Diss., 2010 | ||
| 650 | 0 | 7 | |a Multiproteinkomplex |0 (DE-588)4798068-0 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 650 | 0 | 7 | |a Heterologe Genexpression |0 (DE-588)4342015-1 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 650 | 0 | 7 | |a Saccharomyces cerevisiae |0 (DE-588)4178812-6 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 650 | 0 | 7 | |a Onkoproteine |0 (DE-588)4318742-0 |2 gnd |9 rswk-swf |
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 689 | 0 | 0 | |a Onkoproteine |0 (DE-588)4318742-0 |D s |
| 689 | 0 | 1 | |a Multiproteinkomplex |0 (DE-588)4798068-0 |D s |
| 689 | 0 | 2 | |a Heterologe Genexpression |0 (DE-588)4342015-1 |D s |
| 689 | 0 | 3 | |a Saccharomyces cerevisiae |0 (DE-588)4178812-6 |D s |
| 689 | 0 | |5 DE-604 | |
| 856 | 4 | 2 | |m DNB Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=020788056&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 943 | 1 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-020788056 | |
Record in the Search Index
| _version_ | 1820882720114343936 |
|---|---|
| adam_text |
IMAGE 1
INHALT DISSERTATION GREGOR POPLAWSKY
ABBILDUNGSVERZEICHNIS 9
TABELLENVERZEICHNIS 10
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 11
1. EINLEITUNG 13
1.1. ONKOGENE 14
1.2. GANKYRIN 14
1.2.1. INTERAKTIONEN VON GANKYRIN MIT ZELLZYKLUS-PROTEINEN 15
1.3. MAGE-A4 17
1.4. YEAST-2-HYBRID 17
1.5. AUFREINIGUNG VON PROTEINEN UND PROTEIN-KOMPLEXEN 18
1.5.1. NATIVER ZELLAUFSCHLUSS 18
1.5.2. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE 20
1.5.3. IMMUNPRAEZIPITATION 21
1.5.4. CO-IMMUNPRAEZIPITATION 21
1.5.5. *PULL-DOWN" ASSAY 22
1.5.6. TAGS 22
1.5.6.1. FUSIONS-PROTEIN-TAGS 23
1.5.6.2. AFFINITAETS- BZW. PEPTID-TAGS 24
1.5.6.3. VERSCHIEDENSTE TAGS - EINE UEBERSICHT 24
1.5.6.4. TAP-TAG-SYSTEM 27
1.5.7. CLEAVAGE SITES 29
1.6. LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 29
1.7. GELFILTRATION 30
1.8. PROTEIN-DETEKTION 30
1.9. EXPRESSIONSSYSTEME 30
1.9.1. PLASMID-SYSTEME 33
1.10. ZELLFREIE ALTERNATIVEN 34
1.10.1. ZELLFREIE IN VITRO PROTEIN EXPRESSION 34
1.11. SPINE2-COMPLEXES 35
1.12. ZIELSTELLUNG 35
2. MATERIAL UND METHODEN 37
2.1. STAEMME 37
2.1.1. WILDTYP-HEFEN [SACCHAROMYCES CEREVISIAE) 37
2.1.2. BAKTERIEN [ESCHERICHIA COLI) 37
2.2. CDNA-KONSTRUKTE UND PFLAT-PLASMIDE 38
2.3. SPEZIELLE VERBRAUCHSMATERIALIEN 39
2.3.1. ENZYME 39
2.3.2. DNA- UND PROTEIN-MARKER 39
2.3.3. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE 39
2.3.4. PROTEIN-DETEKTION 40
SEITE 5 VON 123
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/1009216163
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALT DISSERTATION GREGOR POPLAWSKY
2.4. MEDIEN UND LOESUNGEN 40
2.4.1. HEFE-TRANSFORMATION 40
2.4.2. DNA-GELELEKTROPHORESE 41
2.4.3. NI-NTA-AUFREINIGUNG 41
2.4.4. GSH-SEPHAROSE-AUFREINIGUNG 41
2.4.5. PROTEASE-INHIBITOREN 41
2.4.6. SDS-PAGE UND BLOTTING 41
2.5. ANZUCHT VON E. COLI UND HEFE-KULTUREN 42
2.6. GEFRIERKULTUREN 42
2.7. MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 43
2.7.1. PCR 43
2.7.1.1. KOLONIE UND KONTROLL-PCR 43
2.7.1.2. SPHAEROPLASTEN-METHODE 44
2.7.2. DNA-AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 45
2.7.3. GELELUTION 45
2.7.4. DNA-FAELLUNG 45
2.7.5. RESTRIKTION 45
2.7.6. ALKALISCHE PHOSPHATASE-BEHANDLUNG 46
2.7.7. DNA-AUFREINIGUNG 46
2.7.8. LIGATION 46
2.7.9. HEFE-TRANSFORMATION UND HOMOLOGE IN VIVO PLASMID-REKOMBINATION 47
2.7.9.1. KOMPETENTIERUNG DER HEFE-ZELLEN 48
2.7.9.2. TRANSFORMATION 48
2.7.10. FLEXIPRIMER-SYSTEM 48
2.7.11. CRE-LOXP-SYSTEM 49
2.7.12. E. COLI ELEKTROPORATION 50
2.7.13. E. COLI MINIPREP 51
2.7.14. HEFE MINIPREP 51
2.8. METHODEN DER PROTEIN-AUFREINIGUNG 52
2.8.1. GLASPERLENAUFSCHLUSS 56
2.8.2. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE 56
2.8.2.1. NI-NTA-AUFREINIGUNG 57
2.8.2.2. GLUTATHION-SEPHAROSE-AUFREINIGUNG 57
2.8.2.3. TANDEM-AUFREINIGUNG 57
2.8.2.4. *PULL-DOWN"-AUFREINIGUNG 58
2.8.3. TCA-FAELLUNG 58
2.8.4. DIALYSE 58
2.9. GELFILTRATION 59
2.10. METHODEN DER PROTEIN-ANALYSE 60
2.10.1. PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD 60
2.10.2. SDS-PAGE 60
2.10.3. COOMASSIE-FAERBUNG 60
2.10.4. WESTERN-BLOTTING 61
2.10.5. IMMUN-DETEKTION 61
2.10.5.1. HIS 61
SEITE 6 VON 123
IMAGE 3
INHALT DISSERTATION GREGOR POPLAWSKY
2.10.5.2. STREP II 62
2.10.5.3. GST 62
3. ERGEBNISSE 63
3.1. SEQUENZIERUNG DER PFLAT-VEKTOREN 63
3.2. CODON-GEBRAUCH VON GANKYRIN UND MAGE-A4 64
3.3. EXPRESSION UND DETEKTION VON GANKYRIN IN HEFE 65
3.4. IMPLEMENTIERUNG DER IN VIVO REKOMBINATION SOWIE EVALUIERUNG DER
BY-STAEMME 67 3.5. CO-EXPRESSION VON GANKYRIN UND MAGE-A4 IN GRF18 70
3.6. EXPRESSIONSVERGLEICHE VON S.C. AH22URA3PEP4, GRF18, YHH32 UND
AH22URA3 71 3.7. NI-NTA-AUFREINIGUNG UND DETEKTION VON HIS-GETAGGTEM
MAGE-A4 72
3.8. WACHSTUMSKURVEN VON S. CEREVISIAE AH22URA3PEP4-STAEMMEN 74
3.9. CO-EXPRESSION VON GANKYRIN UND MAGE-A4 IN AH22PEP4 75
3.10. PUFFEROPTIMIERUNG 76
3.11. TANDEM-AUFREINIGUNG UEBER NI-NTA- UND GLUTATHION-SEPHAROSE-SAEULEN
77 3.12. TANDEM-AUFREINIGUNG UEBER GLUTATHION-SEPHAROSE- UND
NI-NTA-SAEULEN 78 3.13. *PULL-DOWN" VON HIS-GETAGGTEN UEBER
GSH-SEPHAROSE-GEBUNDENE PROTEINE 80 3.14. DIALYSE VOR
GSH-SEPHAROSE-AUFREINIGUNG 80
3.15. GELFILTRATION 81
4. DISKUSSION 89
4.1. DAS PFLAT-VEKTOR-SYSTEM UND DIE HEFESTAEMME 89
4.2. HIS- UND GST-TAGS 91
4.3. DIE KOMPLEX-PROTEINE 92
4.4. HOMOLOGE REKOMBINATION UND CO-TRANSFORMATION 94
4.5. CODON-GEBRAUCH UND PROTEOLYTISCHER ABBAU 95
4.6. ZELLAUFSCHLUSS 96
4.7. GLUTATHION 98
4.8. SAEULENAUFREINIGUNG UND *PULL-DOWN" 98
4.9. GELFILTRATION 100
4.10. ERKENNTNISSE 102
5. ZUSAMMENFASSUNG 106
6. LITERATURVERZEICHNIS 107
7. ANHANG 115
7.1. STAEMME 115
7.2. PRIMER 117
7.3. PFLATL-4 118
7.4. PROTEIN-SEQUENZEN 120
7.4.1. HIS-GANKYRIN 120
7.4.1. GANKYRIN(HS) 120
7.4.2. GST-GANKYRIN 120
7.4.3. HIS-MAGE-A4 121
7.4.4. MAGE-A4-HIS 121
7.4.5. GST-MAGE-A4 121
7.5. IN VIVO REKOMBINATION NACH EINSATZ DES FLEXI-PRIMER-SYSTEMS 122
7.6. UEBERSICHT DER AM HAEUFIGSTEN VERWENDETEN TAGS 122
SEITE 7 VON 123 |
| any_adam_object | 1 |
| author | Poplawsky, Gregor |
| author_facet | Poplawsky, Gregor |
| author_role | aut |
| author_sort | Poplawsky, Gregor |
| author_variant | g p gp |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV036872518 |
| ctrlnum | (OCoLC)696638524 (DE-599)BVBBV036872518 |
| dewey-full | 612.01575 |
| dewey-hundreds | 600 - Technology (Applied sciences) |
| dewey-ones | 612 - Human physiology |
| dewey-raw | 612.01575 |
| dewey-search | 612.01575 |
| dewey-sort | 3612.01575 |
| dewey-tens | 610 - Medicine and health |
| discipline | Medizin |
| format | Thesis Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>00000nam a2200000 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV036872518</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="007">t|</controlfield><controlfield tag="008">101217s2010 xx ad|| m||| 00||| ger d</controlfield><datafield tag="020" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">9783832526832</subfield><subfield code="9">978-3-8325-2683-2</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)696638524</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV036872518</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakwb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-83</subfield></datafield><datafield tag="082" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">612.01575</subfield><subfield code="2">22/ger</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Poplawsky, Gregor</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe</subfield><subfield code="c">vorgelegt von Gregor Poplawsky</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="a">Berlin</subfield><subfield code="b">Logos-Verl.</subfield><subfield code="c">2010</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">123 S.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst.</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="502" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Zugl.: Berlin, Techn. Univ., Diss., 2010</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Multiproteinkomplex</subfield><subfield code="0">(DE-588)4798068-0</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Heterologe Genexpression</subfield><subfield code="0">(DE-588)4342015-1</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Saccharomyces cerevisiae</subfield><subfield code="0">(DE-588)4178812-6</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1="0" ind2="7"><subfield code="a">Onkoproteine</subfield><subfield code="0">(DE-588)4318742-0</subfield><subfield code="2">gnd</subfield><subfield code="9">rswk-swf</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="0"><subfield code="a">Onkoproteine</subfield><subfield code="0">(DE-588)4318742-0</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="1"><subfield code="a">Multiproteinkomplex</subfield><subfield code="0">(DE-588)4798068-0</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="2"><subfield code="a">Heterologe Genexpression</subfield><subfield code="0">(DE-588)4342015-1</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2="3"><subfield code="a">Saccharomyces cerevisiae</subfield><subfield code="0">(DE-588)4178812-6</subfield><subfield code="D">s</subfield></datafield><datafield tag="689" ind1="0" ind2=" "><subfield code="5">DE-604</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">DNB Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=020788056&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="943" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-020788056</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV036872518 |
| illustrated | Illustrated |
| indexdate | 2025-01-10T17:11:23Z |
| institution | BVB |
| isbn | 9783832526832 |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-020788056 |
| oclc_num | 696638524 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-83 |
| owner_facet | DE-83 |
| physical | 123 S. Ill., graph. Darst. |
| publishDate | 2010 |
| publishDateSearch | 2010 |
| publishDateSort | 2010 |
| publisher | Logos-Verl. |
| record_format | marc |
| spelling | Poplawsky, Gregor Verfasser aut Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe vorgelegt von Gregor Poplawsky Berlin Logos-Verl. 2010 123 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Zugl.: Berlin, Techn. Univ., Diss., 2010 Multiproteinkomplex (DE-588)4798068-0 gnd rswk-swf Heterologe Genexpression (DE-588)4342015-1 gnd rswk-swf Saccharomyces cerevisiae (DE-588)4178812-6 gnd rswk-swf Onkoproteine (DE-588)4318742-0 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Onkoproteine (DE-588)4318742-0 s Multiproteinkomplex (DE-588)4798068-0 s Heterologe Genexpression (DE-588)4342015-1 s Saccharomyces cerevisiae (DE-588)4178812-6 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=020788056&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Poplawsky, Gregor Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe Multiproteinkomplex (DE-588)4798068-0 gnd Heterologe Genexpression (DE-588)4342015-1 gnd Saccharomyces cerevisiae (DE-588)4178812-6 gnd Onkoproteine (DE-588)4318742-0 gnd |
| subject_GND | (DE-588)4798068-0 (DE-588)4342015-1 (DE-588)4178812-6 (DE-588)4318742-0 (DE-588)4113937-9 |
| title | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe |
| title_auth | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe |
| title_exact_search | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe |
| title_full | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe vorgelegt von Gregor Poplawsky |
| title_fullStr | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe vorgelegt von Gregor Poplawsky |
| title_full_unstemmed | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe vorgelegt von Gregor Poplawsky |
| title_short | Evaluierung von Saccharomyces cerevisiae als Co-Expressions-System für humane Protein-Komplexe |
| title_sort | evaluierung von saccharomyces cerevisiae als co expressions system fur humane protein komplexe |
| topic | Multiproteinkomplex (DE-588)4798068-0 gnd Heterologe Genexpression (DE-588)4342015-1 gnd Saccharomyces cerevisiae (DE-588)4178812-6 gnd Onkoproteine (DE-588)4318742-0 gnd |
| topic_facet | Multiproteinkomplex Heterologe Genexpression Saccharomyces cerevisiae Onkoproteine Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=020788056&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT poplawskygregor evaluierungvonsaccharomycescerevisiaealscoexpressionssystemfurhumaneproteinkomplexe |